HistologiaTecido Epitelial

Prévia do material em texto

BIOLOGIA
Histologia / Tecido Epitelial
___
Mônica Andres
Lâminas Histológicas
Preparado histológico é uma lâmina retangular de vidro sobre a qual foram colocadas fatias
extremamente finas de tecidos e órgãos. Para proteção, os cortes são cobertos por uma delgada
lâmina de vidro colada à lâmina, denominada lamínula
Preparo da Lâmina:
Preparo Lâmina Histológica:
2
1) COLETA E DISSECAÇÃO: a primeira etapa e consiste na retirada de uma amostra de tecido
para a investigação, chamadas de biópsias.Essa amostra removida durante uma biópsia é
chamada de espécime. Os cassetes histológicos são usados para acomodar esses espécimes e
também durante todas as etapas de preparação do tecido.
2)FIXAÇÃO:. A fixação evita a autólise celular e impede a proliferação de microrganismos,
preservando a morfologia do tecido e fornecendo maior resistência para as etapas seguintes. A
fixação utiliza processos físicos ou químicos para imobilizar as substâncias constituintes das
células e dos tecidos. Os agentes fixadores mais utilizados são o formol tamponado e o líquido
de Bouin.
3) PROCESSAMENTO: Esse processo é realizado principalmente para dar mais resistência ao
tecido e assim poder cortá-lo em dimensões mínimas. Pode ser feito manualmente ou por meio
de um processador.
No processamento, o tecido é mantido 1 hora em cada recipiente:
1-Formol;
2-Álcool 80
3-Álcool 90
4-Álcool 95
5-Álcool 100
6-Álcool 100
7-Álcool 100
8-Xinol
9-Xinol
10-Xinol
11-Parafina
12-Parafina
Possui 3 etapas:
3
a)Desidratação:Consiste na remoção da água dos tecidos. Vários métodos são utilizados, porém
o mais comum compreende uma série de soluções alcoólicas em concentrações diferentes,
chegando até o álcool 100%.
b)Clarificação ou Diafanização:
Essa etapa remove totalmente o álcool, preparando o espécime para a etapa seguinte. Para
remover o álcool e preparar o tecido para a penetração da parafina, utiliza-se o xilol. Conforme
o xilol penetra o tecido, em substituição ao álcool, o material se torna mais claro.
c)Inclusão: Mesmo após a fixação e a desidratação, as amostras de tecido são ainda muito
frágeis. Acontece então a impregnação do tecido com uma substância de consistência firme.
Assim o tecido é endurecido, o que facilita o corte em camadas finas. A parafina é a mais
utilizada neste procedimento.
4)MACROTOMIA: Depois de endurecido, o bloco de parafina deve ser cortado em seções
extremamente finas, que permitam a visualização do tecido ao microscópio. Para isso, é
utilizado o equipamento de precisão micrótomo, que alcança a espessura dos cortes de 5 a 15
µm.
5)COLORAÇÃO:como as seções de parafina são incolores, os espécimes não estão ainda
adequados para exame com microscópio de luz. São então corados para possibilitar a análise.A
parafina deve ser dissolvida e removida. Em seguida os tecidos na lâmina são reidratados por
meio de uma série de soluções de álcool em concentrações decrescentes.Os cortes de tecido
podem então ser corados com hematoxilina. Por sua natureza básica, a hematoxilina vai corar os
ácidos nucleicos dos núcleos.Em seguida, os cortes são lavados em e corados pela eosina, um
corante de natureza ácida e que irá corar os componentes básicos predominantes no citoplasma
das células.Após a coloração, os cortes são protegidos por uma lamínula e podem ser analisados
por microscopia.
4
1. Microscópio Óptico
Oculares: geralmente tem poder de aumento de 10X e é por meio delas que observamos a
imagem ampliada.
Tubo: Suporte das oculares. Também chamado de canhão.
Revólver: Peça giratória que comporta as objetivas.
Objetivas: Geralmente três ou quatro, são lentes de maior poder de ampliação.
Platina: Também chamada de mesa, é o suporte onde será colocada a lâmina. A platina pode ser
levantada ou baixada para regular o foco, utilizando-se os parafusos macro e micrométrico.
Condensador: Concentra os raios luminosos que incidem sobre a lâmina.
Fonte de luz: Nos microscópios modernos é uma lâmpada, mas em microscópios mais antigos
era um espelho que refletia a luz.
Liga/desliga: Botão para ligar e desligar a lâmpada.
Macrométrico: Parafuso que permite regular a altura da platina. Faz movimentos amplos para
um ajuste grosso.
Micrométrico: Parafuso que permite regular a altura da platina. Permite um ajuste fino do foco.
5
Braço: Também chamado de coluna, é fixo na base do microscópio e serve de suporte para as
demais partes.
Charriot: Peça que permite movimentar a lâmina sobre a platina.
Microscopia Óptica e Eletronica
A principal diferença entre a microscopia óptica e microscopia eletrônica é o tipo de radiação
utilizado para a visualização das estruturas, que são o feixe de luz, no microscópio óptico e o
feixe de elétrons no microscópio eletrônico. A resolução da imagem obtida no microscópio
eletrônico é muito mais alta, mas este utiliza uma tecnologia mais cara.
Para visualizar uma célula na pele, a microscopia óptica é suficiente, desde que a lâmina com o
tecido seja devidamente preparada e corada. Já para visualizar organelas como a mitocôndria e
bactérias, estruturas bem menores, se faz necessário o uso da microscopia eletrônica .Uma
vantagem da microscopia ótica está no fato de os microscópios não utilizarem luz e sim feixes
luminosos, fazendo assim com que a imagem seja mais nítida.
Glândulas Epiteliais
Glândulas exócrinas: mantêm a sua conexão com o epitélio do qual se originaram, possuem
ductos tubulares formados por células que transportam a secreção glandular para a superfície do
corpo ou para o interior (lúmen) de um órgão cavitário. Ex: glândulas sudoríparas, salivares e
intestinais.
Glândulas endócrinas: não possuem ductos, a sua conexão com o epitélio foi obliterada durante
o desenvolvimento e sua secreção é liberada diretamente na corrente sanguínea é transportada
para o seu local de ação, o seu “tecido alvo”. A secreção das glândulas endócrinas contém
hormônios.
Questão número 4
Após a coleta de uma amostra da pele e de seu processamento histológico, um estudante de
biologia levou seu material para análise em um microscópio óptico e observou que o mesmo
tinha 4 tipos de lentes objetivas com aumentos de 10, 20, 40 e 100 vezes. Ele percebeu que a
ocular do aparelho
tinha uma lente com ampliação de 4,5 vezes. Em que ampliações esse aluno visualizou seu
material, considerando que ele utilizou todas as objetivas?
(4,5 x 10= 45) (4,5 x 20= 90) (4,5 x 40= 180) (4,5x100= 450)
6
Questão 6
Microvilos (ou microvilosidades):Os microfilos são invaginações da superfície apical da célula
que aumentam a superfície de absorção;
Estereocílios: Sua denominação está relacionada ao fato de serem imóveis. São microvilos
longos, com 100 a 150nm de diâmetro e até 120µm de comprimento. Assim como os microvilos,
possuem filamentos de actina no interior, mas podem ser ramificados;
Placas da membrana: São áreas da membrana celular apical do epitélio que reveste o trato
urinário, capazes de suportar a osmolaridade da urina, devido à composição diferenciada, com
elevada concentração de esfingolipídios e a presença de proteínas exclusivas, as uroplaquinas;
Pregas basolaterais (invaginações ou interdigitações):São invaginações das superfícies basal e
laterais das células. Ocorrem nas células envolvidas no transporte de líquido e íons,
aumentando a superfície para a inserção de proteínas transportadoras. Há uma concentração de
mitocôndrias entre as invaginações para fornecer energia ao transporte ativo de íons;
Cílios: São projeções da superfície apical da célula maiores que os microfilos: cerca de 250nm de
diâmetro e 5 a 10m de comprimento. Possuem axonema, o que permite o seu movimento,
fazendo com que o material na superfície das células seja transportado, como ocorre na
traqueia;
Flagelo: Possui estrutura semelhante à do cílio, mas é mais longo (cerca de 55 m) e único na
célula. Ocorre no espermatozoide.