Resumo Biologia Molecular

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Beatriz Carvalho Pontes
Resumo Biologia Molecular – Pós-graduação em Terapia Celular/Gênica
Conceitos básicos – Introdução à matéria:
- Constituição do DNA – açúcar+fosfato+1base nitrogenada (purinas) = 1 NUCLEOTÍDEO
- 1 cromossomo = 1 fita contínua. O cromossomo carrega a mesma info, o que faz a variedade são os alelos. 
- Cariótipo – número total de cromossomos, é onde se vê as grandes alterações estruturais/ nos alelos.
- Gene – pedaço do cromossomo com uma informação
Função do telômero no cromossomo: proteção
Cada emaranhado se encaixa no local certo o cromossomo correspondente
Como o DNA se copia? Replicação baseada na fita molde e ela é semi-conservativa
O DNA é tensionado pelas histonas para proteger seu material genético, no entanto, para que sua replicação ocorra, é necessário com que ele perca essa força temporariamente. Quem é o responsável por tirar essa tensão das fitas e abrir o zíper? TOPOISOMERASE
DNA Polimerase
Enzima que atua como um zíper. 
Ela se liga a fita de DNA e sintetiza a nova fita, a partir de marcações metil H³/epigenicas encontradas na fita base. 
A ligação ao DNA se dá por tentativa e erro de nucleotídeos. Quem encontra erros de transcrição? A própria DNA Polimerase, essa sinalização acontece quando a região E se vira p/ o meio externo. 
A DNA Polimerase sempre está presente na célula, porém fica inativa, sua ativação se dá somente quando há uma sinalização para que aumente a sua expressão. 
A DNA polimerase ainda é quem insere a primase, que irá fazer com que através de um RNA primer, indique o ponto partida para que a DNA polimerase possa iniciar seus trabalhos de replicação ou transcrição. Porém, quem abre o zíper para a DNA polimerase é a DNA Helicase!
RNA
Diferente do DNA, não possui histonas. Apenas é enovelado pelas ligações complementares. Ademais, ele é transitório, por isso carrega uracila, já que após um tempo ela se degrada. 
Tipos de RNA:
mensageiro (primário e secundário – é o secundário quem realiza a tradução, se diferencia pela sua cauda poli-A);
ribossomal – capacidade de enzima; 
transportador – ponte entre o códon e o aminoácido correspondente;
regulatórios – interfere nos processos do metabolismo da cél, pela transcrição, tradução etc.
Proteínas
Junção de aminoácidos que forma peptídeos, que quando em conjunto, formam-se proteínas.
OBS: A ligação peptídica ocorre por meio de um RNA ribossomal.
Enzimas são proteínas. Hormônios são proteínas. 
Anticorpos, balanceamento ácido-basico etc, são proteínas.
peptídeos
proteína
aminoácidos
A co-formação de uma proteína indica a função.
Código degenerado
Quando uma tradução diferente acaba gerando um mesmo produto. 
Ex: Proteína Alanina (AAA) porém também pode ser feita através da sequência de códons (AAT). Portanto, se ocorrer um erro de tradução do qual ao invés de traduzir AAA, traduza em AAT, o produto final continuará sendo Alanina. 
Qual a vantagem de uma degeneração? Não evita a mutação, porém serve como uma contenção! O nível de aceitação de mutação torna-se considerável. É possível chamar de degeneração silenciosa.
Ex: No DNA há 3 stop códons (UAC), pois se houver uma mutação, há a chance de parar o erro mais rápido. “Controle de qualidade/vistoria” constante. 
OBS: Splicing – a partir de éxons e íntrons, reconhece onde cortar. 
Splicings acontecem apenas no RNA!
Tradução e a região EPA
A tradução é mediada por um ribossomo. Quando suas duas partes do ribossomo se juntam, a tradução pode iniciar. Porém, como as duas partes se juntam?
A parte pequena do Ribossomo está dissociada da grande, porém a subunidade de metionina liga-se ao 5’3’, ao achar um AUG encaixa-se um RNA transportador e a subunidade grande chega para traduzirem. 
A região EPA é localizada dentro do Ribossomo, e é quem determina a ordem da tradução.
A ou arrival, é o local onde chega o RNA transportador. 
P (peptídica) é onde ocorre a ligação amina+carboxila. 
E ou exit, é o local onde através de um reconhecimento de um stop códon, libera a cadeia peptídica. 
Morte celular e o P53
A morte celular nem sempre é aleatória. É um mecanismo bioquímico controlado, a célula processa sinais e executa no sistema. 
Apoptose é o primeiro sistema descoberto. Acontece por uma via bioquímica interna que decide normalmente. É induzido por P53
Protease executora > Caspase > Reconhecimento pelos fagócitos
Nerose, segundo sistema. Apoptose tardia, perde membrana, fenotipicamente apresenta necrose e trás inflamação. 
Cas 3 e 7 são responsáveis por clivar, essa clivagem faz com que os fagócitos tenham uma digestão mais rápida. 
Ademais anotações:
APAF 1 se liga ao citocromo C e ao A, que é liberado, e fará morte celular por falta de energia. 
-
SMAC bloqueia a morte celular, quando ligado ao XIAP, que se liga ao Cas 9 e Cas 3, aumentando a tolerância ao citocromo C. 
Via de morte celular: 
Intrínseca – Passa pela mitocôndria
Extrínseca – Fas se liga à Cas 8 e ativa Cas 3, que diretamente ativa receptores de morte. 
Família pró apoptose e anti-apoptose: BCl-2 
São quem determinam a liberação ou não o citocromo C
Ciclo celular
Proliferação a partir de duplicação do genoma. 
Cél. cresce > acumula organelas > se duplica.
Fase GAP na mitose:
G0 – crecimento e acumulação
G1/S ciclina – da START na progressão
G1 – favorável 
checkpoint S – estimula eventos iniciais da mitose
G2 – confere as estruturas 
checkpoint M – estimula a entrada para a mitose
OBS: Ciclinas só aparecem quando há ciclo celular. Cdk está em circulação sempre mas só ativa com a ciclina. Cdk é o executor e a Ciclina o modulador. 
Sinalização celular
Molécula de sinalização > Proteína receptora 
Transmissão de sinal por segundo mensageiro ativando ou inativando, causando uma fosforilação por uma proteína-cinase e desfosforiladas por uma proteína. 
Ligação à GTP > Cascata de sinalização > Enzima
Aumentando a hidrolise de GTP, fatores de troca de nucleotídeos de guanina, liberam GDP para que um novo GTP se ligue. Ativadas sequencialmente, de forma rápida, eficiente e seletiva, a cascata de sinalização evita info cruzada.
Sinalização
Molécula de sinalização celular atravessa 7x a bicamada lipídica da membrana, sinalizando que ativa vários receptores que estão acoplados a proteína G, que por meio da subunidade Alfa e o complexo Beta e Gama, irão regular atividades das moléculas de sinalização. 
AMP cíclico
Molécula importante na transdução, uma vez ativada, é sintetizada ATP + enzima adenilciclase. É formado rapidamente e continuamente destruído pelas fosfodiestrases de CAMP, que fica em baixa quantidade quando a proteína G inibitora é ativada, que inibe acetilciclase. 
A proteína G (estimulatória), que ativa a adenilatociclase – enzima intracelular aderida à membrana plasmática que catalisa a formação de 3'-5' adenosina monofosfato cíclico (AMPc) a partir do trifosfato de adenosina (ATP) – está relacionada com o aumento da resposta celular.
Mol. De sinalização > proteína receptora > cascata de sinalização > proteína efetora(enzima)
Beatriz Carvalho Pontes