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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: BIOQUIMICA HUMANA – Aula 1 DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: MATRÍCULA: CURSO: Enfermagem POLO: PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): TEMA DE AULA: ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. A amilase salivar é uma enzima, que é responsável por fazer a hidrolise do amido, o mesmo é um polissacarídeo bem abundante na alimentação. No processo de mastigação se inicia o processo digestivo dos carboidratos, onde assim facilita o acesso das enzimas ao amido. O amido é geralmente derivado de sementes, tubérculos (ex. Cenouras, beterrabas), talos de raízes (como batatas) e frutas. Para alimentos amiláceos. A digestão começa na boca digerindo o amido e outros polissacarídeos (por exemplo, glicogênio) em moléculas de maltose (dissacarídeo). Os sais da saliva neutralizam as substâncias ácidas e retêm um pH levemente ácido na boca tornando-a ideal para a ação da ptialina. 2. Materiais utilizados. 2 pipetas de vidro de 3ml; 6 tubos de ensaio; 1 estante pra tubos de ensaio; 1 pera de borracha; água destilada; 1 cronometro; 2 erlenny; solução de acido clorídrico; lugol 1% e gelo. 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição do amido? O amido é um polissacarídeo encontrado em grande abundância na natureza formado por uma cadeia composta por dois polissacarídeos: amilose, e as amilopectina. B) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise química do amido. Tubos hidrolise química do amido: T1: Não houve hidrolise- Têm amido no tubo. T2: Houve interação do lugol com o amido. T3: Houve interação do lugol com o amido. C) Qual o objetivo do uso de HCl, aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido?A reação com ácido clorídrico facilita a hidrólise do amido. Portanto, RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 quando esses compostos são misturados em uma reação, a glicose é produzida como produto final. As enzimas têm uma peculiaridade, dependendo do meio que ela estar (calor, temperatura, reação catalítica) ela pode alterar a reação, pois a mesma sofre alterações do meio. Idealmente, a reação é realizada por aquecimento por um curto período de tempo seguido de resfriamento com gelo. D) Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose. Com a mastigação, a alfa-amilase na saliva é liberada. Catalisa a hidrólise de ligações glicosídicas de amilose (α1→4), produzindo maltose, glicose e amilopectina; e ligações de amilopectina (α1→4), produzindo dextrina, uma mistura de polissacarídeos. E) Comente os resultados obtidos nos tubos 1, 2 e 3 no procedimento da hidrólise enzimática do amido. T1: Ao adicionar o lugol à cor da reação mudou para esverdeada, não havia hidrolise. Mesmo após o banho de gelo ainda tinha presença de amido na reação. T2: Após adicionar o lugol à cor da reação ficou azul, e o lugol interagia com o amido. T3: Ao adicionar o lugol: cor azul escuro, lugol interagia com o amido. F) Explique a relação entre a atividade da amilase salivar, o tempo de incubação da enzima com o amido e a variedade de cores observada no procedimento da hidrólise enzimática do amido. O tempo que o experimento passa no banho Maria e incubação influência na hidrolese.O lugol ao reagir com a composição do amido formam cores esverdeadas, azuladas quando encontra o amido. 4. Conclusão sobre a atividade catalítica da amilase salivar. A amilase salivar quem faz a quebra dos carboidratos para que assim o organismo consiga digerir mais facilmente, quebrando as ligações glicosídicas do amido. TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES) RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Aldoses e centoses são carboidratos. Onde as aldoses fazem parte do grupo dos carboidratos simples, e a centose fazem parte do grupo cetona. 2. Materiais utilizados. Acido clorídrico 0,1; glicose 1%; frutose 1%; reativo seliwanoff, 3 tubos de ensaio; 4 pepetas; 1 pera de borracha ; banho Maria 3. Responda as Perguntas: A) Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff. É um teste químico que faz a distinção entre aldoses e cetoses, onde a reação positiva é caracterizada pelo aparecimento de uma coloração avermelhada, Se um açúcar contiver um grupo cetona, é uma cetose; se, por outro lado, contiver um grupo aldeído, é uma aldose. Este teste baseia-se no princípio de que, quando aquecidas, as cetoses sofrem desidratação muito mais rapidamente que as aldose B) Comente os resultados obtidos nos 3 tubos utilizados no procedimento, correlacionando com a presença ou não de aldoses e cetoses. T1: Glicose= Não é centose T2: Frutose= Centose T3: Inalterado C) Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada. Controle negativo. D) Qual a função do ácido clorídrico (HCl) e da fervura aplicados no teste de Seliwanoff? O acido clorídrico é quem faz a desidratação dos carboidratos. O experimento só tem resultados se houver o aquecimento dos materiais. 4. Conclusão sobre a identificação de aldoses e cetoses utilizando o teste de Seliwanoff. O teste permite fazer a diferenciação das aldoses e centoses, onde é possível observar que a reação da centose é mais rápida e tem uma coloração mais intensa. TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. As proteínas são polímeros de aminoácidos e são responsáveis por determinar sua estrutura tridimensional e as propriedades especifica. Estas proteínas por terem em sua estrutura carbanímicos. Elas podem reagir e se precipitar com algumas substâncias, como é o caso dos ácidos fortes, substâncias como metais pesados como cobre, chumbo, mercúrio. 2. Materiais utilizados. Ácido tricloroacético 20% ; Acetato de chumbo 10% ; Ovoalbumina 10%; Pera de borracha ;Pipeta Becker. 3. Responda as Perguntas: A) Comente os resultados obtidos no procedimento da precipitação da ovoalbumina com ácido forte e metal pesado. No experimento foi observado que houve uma precipitação, onde foi possível observar um material leitoso e branco. B) Qual a fundamentação teórica que explica o processo de precipitação das proteínas com ácidos fortes e metais pesados? Os cátions de metais pesados como Hg2+, Pb2+, Cu 2+, dentre outros, formam precipitados insolúveis de proteínas. Esta precipitação é mais forte quando o pH está acima do ponto isoelétrico (pI). Isto porque, acima do pI, a carga líquida da proteína torna- se negativa, favorecendo a interacção com os cátions do sal. C) O que ocorreu com a ovoalbumina para que ela formasse um precipitado insolúvel neste experimento? Nesta prática, além de alterar o ponto eléctrico,o meio da carga iónica,um ponto importante para toda esta precipitação nas nossas proteínas,alguns tipos de elementos químicos que podem ser capturados,podemos também fazer ácidos e metais pesados, tornando este processo de precipitação É possível perceber que se quebra a estrutura da proteína.Os cátionsdemetaispesadoscomoHg2+,Pb2+,C u2+,Fe2+,Cd2+eZn2+formam precipitados de proteínas insolúveis denominados pelo elemento produtor(por exemplo, proteína de mercúrio,proteína de chumbo,etc.).Esta precipitação é mais forte quando o H está acima do ponto isoeléctrico(pI).Isto porque,acima do pI,a carga líquidas sob a proteína torna-se negativa(ver determinação do ponto isso eléctrico da caseína),favorece do interacção comcátionsa partir de sais. 3. Conclusão sobre a precipitação de proteínas por ácidos fortes e metais pesados. É um experimento realizado para assim ver a influencia de sais de metais pesados e de ácidos fortes sobre as proteínas. TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. As proteínas são compostos orgânicos que em sua composição contem aminoácidos que se produz entre as ligações peptídicas. Na estrutura dos aminoácidos contem: carbono, acido carboxílico, amina e radical livre. Uma proteína pode apresentar mais de setenta aminoácidos. Todos os seres vivos contêm proteínas. As proteínas podem se desvia de seu estado original quando expostos a grandes temperaturas, pH, agitação e radiação, onde assim danifica ou altera a estrutura. 2. Materiais utilizados. 2 pipeta de 5ml; 1 pipeta de vidro de 1ml; 1 pera de borracha; água destilada; 2 tubos de ensaio; 1 estante para tubos de ensaio; solução concentrada de sulfato de amônia; solução de ovoalbumina à 10%. 3. Responda as Perguntas: A) O que é “Salting out”, “Salting in” e camada de solvatação? “Salting in” é um processo pelo quais as substancias solúveis em água passa, quando há adição de sais. Onde o efeito visto é de precipitação, onde se vê duas fases: uma sólida e uma fase líquida. “Salting out” as moléculas de água, se interagem com os íons, desfazem a interação com a proteína, e se interagem entre si, onde ocorre a diminuição da solubilidade em meio aquoso. B) Explique o princípio Bioquímico da precipitação de proteínas por adição de soluções salinas. Ao adicionar sais neutros a uma solução, a um aumento da força iônica do sistema, portanto dependendo do ambiente que se coloca uma proteína ela pode interagir de forma iônica com alguns compostos, onde pode mudar a concentração iônica ao adicionar sais. C) Comente os resultados observados da precipitação da proteína por sulfato de amônio na presença e ausência da água, correlacionando com a solubilidade da proteína. Ao adicionar o sulfato de amônia no tubo A, foi observado a formação de uma solução leitosa com uma cor branca com ausência da água , por que a amônia se interagem com as moléculas sobre a solubilidade da proteína. 3. Conclusão sobre a precipitação das proteínas por adição de sais neutros (soluções salinas concentradas) Essa precipitação por adições de sais neutros, ocorre devido efeito da força iônica. Quando se adiciona sais aumenta assim a força iônica, onde a proteína diminui a interação e aumenta a solubilidade. TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES) RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 RELATÓRIO: 1. Resumo sobre o tema abordado em aula. Açucares redutores são alguns carboidratos que na sua estrutura contém uma hidroxila no seu carbono C1, onde essa hidroxila reage com vários íons principalmente os metálicos, como é o caso do (Reativo de Benedict). Onde esse reativo na sua composição contém íons cúpricos que ao reagir com essa carbolina se forma um composto chamado de oxido cuproso. A reação é positiva quando a coloração passa do azul para um vermelho tijolo. Assim com essa reação conseguisse identificar quais são os açucares redutores. Essa reação demora um certo tempo para dar o resultado, assim como precisa ser aquecida em banho Maria. 2. Materiais utilizados. Glicose 1%; solução sacarose 1%; reativo de Benedict, tubos de ensaio; água destilada; pera de borracha; pepeta; banho Maria. 3. Responda as Perguntas: A) Qual a composição do Reativo de Benedict? Anidro de carbono de sódio; citrato de sódio; cobre (II) de sulfato penta hidrato (coloração azul) B) O que são açúcares redutores? Açucares redutores são carboidratos monossacarídeos, que reduzem a sais de cobre, prata e bromo em contato com soluções alcalinas, pois possuem grupos aldeídos ou acetonas livres. C) Explique a fundamentação teórica do Teste de identificação de açúcares redutores com o Reativo de Benedict. É usado para detectar a presença dos carboidratos (açúcares redutores) Essas substâncias podem ser submetidas a reações químicas em que doam elétrons para outros compostos, resultando na produção de novas substâncias, que reagem com o reagente de Benedict para produzir composto insolúvel de cor vermelho tijolo. D) Comente os resultados observados no experimento relacionando com a identificação de açúcares redutores. As colorações dos três tubos erram azul, após o aquecimento no banho Maria por cinco minutos, após o aquecimento a coloração azul permaneceu no tubo que tinha: água e sacarose, uma vez que a água e a sacarose não são agentes redutores. Já no tubo que contém glicose ouve uma alteração na coloração, visto que a mesma reage positivamente frente à redução dos íons de cobre. E) Exemplifique algumas aplicações deste teste na área clínica. É um teste qualitativo ou quantitativo? O reagente de Benedict é usado também para detectar excesso de açucares na urina e assim detectar uma possível diabetes. É um teste qualitativo ele é usado simplesmente para verificar se o açúcar redutos esta presente ou não. 3. Conclusão sobre a identificação de açúcares redutores utilizando o Teste de Benedict. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 Na reação com o Benedct os íons cúpricos são reduzidos pela carbolina a íons cuprosos formando assim o óxido cuproso onde sua coloração passa a ser vermelho tijolo ou marrom claro. Referências 1. BARREIROS, André Luís Bacelar Silva; BARREIROS, Marizeth Libório. CARBOIDRATOS EXPERIMENTAL. RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EAD AULA 1 DATA: 07/09/2022 VERSÃO:01 2. GONÇALVES, Tiago Maretti. Uma proposta de aula experimental no ensino a distância: Identificando proteínas em alimentos do cotidiano na disciplina de Bioquímica. Research, Society and Development, v. 10, n. 4, p. e52110414441-e52110414441, 2021. 3. MATIAS, Ana Elisa Barreto. Fundamentos da bioquímica: carboidratos. 2022. 4. MENDES, Martha Grasielle Alves; VELOSO, Pedro Henrique Fonseca; SILVA, Maia Cecília. Identificação da ação catalítica da enzima α-amilase salivar em solução de amido. 5. POMIN, Vitor Hugo; MOURÃO, P. A. S. Carboidratos. Ciência Hoje, v. 35, n. 233, p. 24-35, 2006.
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