PAP - Pesquisa de antígeno D fraco

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PROTOCOLO DE AULA PRÁTICA 
Número: 
LAB-PAP-XX 
CURSO: Biomedicina Aprovação: 
DISCIPLINA: Hemoterapia e Banco de sangue 
Diretoria Acadêmica 
Ser Educacional 
ELABORADO POR: 
Willians Emanuel da Silva Melo 
DATA: 
05/11/2017 
Revisão: 
00 
 
 1 / 2 
 
Quando impresso este documento passa a ser cópia não controlada. 
Antes de imprimir, pense na Natureza. 
 
NOME DA PRÁTICA: 
Pesquisa de Antígeno D fraco 
OBJETIVOS DA PRÁTICA: 
• Estabelecer o processo técnico para a pesquisa de antígeno D fraco 
 
OBS.: A quantidade (qtd) material listada abaixo é estimada para apenas um grupo de alunos. A 
quantidade de grupos, por aula, deve ser definida pelo professor. Sugestão (XX – XX) aluno por grupo. 
QTD DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS QTD REAGENTES E SOLUÇÕES 
20 Tubo de vidro 1 Soro fisiológico 500 mL 
 1 Soro anti-D 
 1 Soro controle RhD 
 1 Soro de Coombs 
 1 Hemácias controle (controlcell) 
 
QTD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO QTD EQUIPAMENTOS POR GRUPO 
20 Ponteiras 1 1 Centrifuga 
 1 Pipetas 50μL, 100 μL e 1000 μL 
 1 Estante 
 1 Aglutinoscópio 
MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO 
 
 
 
• 1- Identificar um tubo com o número da amostra do paciente e preparar uma suspensão de 
hemácias a 5% (19 gotas de salina + 1 gota do concentrado de hemácia); 
• 2- Identificar 02 tubos com o número da amostra do paciente e as seguintes identificações 
Anti-D, Controle Rh (Ctrl); 
• 3- Colocar uma gota dos anti-soros correspondentes Anti-Rh (D), Ctrl Rh em cada tubo; 
• 4- Adicionar uma gota da suspensão de hemácias do paciente aos tubos com os anti-soros; 
• 5- Homogeneizar todos os tubos e centrifugá-los por 15 segundos de 3000 a 3600 rpm. Agitar 
levemente os tubos, realizando a leitura, um a um, sobre um fundo branco ou aglutinoscópio. 
Ler e anotar a intensidade da aglutinação (de 0 a 4+); 
• 6- Comparar os resultados de aglutinação obtidos nas provas e classificá-lo; 
• 7 - Em seguida, incubar todos os tubos a 37ºC durante 20 minutos ou conforme instrução de 
cada fabricante do reagente; 
• 8 - Homogeneizar todos os tubos e centrifugá-los por 15 segundos de 3000 a 3600 rpm. Agitar 
levemente os tubos, realizando a leitura, um a um, sobre um fundo branco ou aglutinoscópio. 
Ler e anotar a intensidade da aglutinação (de 0 a 4+); 
• 9 - Lavar 3 vezes em salina e decantar totalmente o sobrenadante; 
• 10 - Adicionar 1 gota de soro anti-IgG e centrifugar por 15 segundos de 3000 a 3600 rpm; 
• 11 - Agitar levemente os tubos, realizando a leitura, um a um, sobre um fundo branco ou 
aglutinoscópio. Ler e anotar a intensidade da aglutinação (de 0 a 4+); 
• 12 - Interpretar resultados; 
 PROTOCOLO DE AULA PRÁTICA 
Número: 
LAB-PAP-XX 
CURSO: Biomedicina Aprovação: 
DISCIPLINA: Hemoterapia e Banco de sangue 
Diretoria Acadêmica 
Ser Educacional 
ELABORADO POR: 
Willians Emanuel da Silva Melo 
DATA: 
05/11/2017 
Revisão: 
00 
 
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Antes de imprimir, pense na Natureza. 
 
• 13 - Realizar o controle de Coombs aos tubos com resultados negativos, adicionando 1 gota 
de Controcel. Centrifugar por 15 segundos de 3000 a 3600 rpm. Ler e observar se houve 
aglutinação. Este procedimento é obrigatório a presença de aglutinação, pois significa que o 
soro antiglobulina está reagindo; 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
* Equipamentos de uso coletivo da turma