Reação em cadeia da Polimerase

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Daniella Machado
 	 Turma XXVI 
Genética – Módulo 1 Daniella Machado
Morfofuncional– 1º período UniEVANGÉLICA 	 Turma XXVI 
Reação em cadeia da Polimerase (PCR)
Genética – Introdução ao Estudo de Medicina
Morfofuncional: Módulo 1
É uma técnica para fazer muitas cópias de uma região específica do DNA, in vitro, pode ser usado para testes de paternidade e da COVID-19.
O que precisa
Amostra de DNA
Primers
dNTPs- nucleotídeos: A, T, C, G
TAQ polimerase
Tampão – buffer: água e íons cofatores
Termociclador: equipamento que vai esquentar e esfriar para q a molécula de DNA sej copiada 
DNA polimerase termoestável 
Bactéria: Thermus aquaticus (TAQ polymerase), uso sintético in vitro dela mix mais o DNA do paciente.
Etapas da PCR
Desnaturação (96ºC)
Aquece fortemente a reação para separar, ou desnaturar, as fitas de DNA. Isso proporciona um molde de fita simples para a próxima etapa.
Anelamente (55-65º C)
Resfria a reação para que os primers possam se ligar às suas sequências complementares no DNA molde de fita simples.
Extensão (72º C)
Eleva a temperatura da reação para que a Taq polimerase estenda os primers, sintetizando novas fitas de DNA.
DNA- replicação 
DNA molde de fita dupla
Substratos: moléculas para produzir as novas fitas trifosfatos de desoxirriboses (dNTPs)
Enzimas e outras proteínas copiam o molde
PCR test
Essa técnica faz uso da DNA-polimerases purificadas para replicar sequências de DNA definidas de forma seletiva. Como esse método de amplificação de uma sequencia específica de DNA extremamente rápido, ele permite uma varredura acelerade de milhares de amostras por vez