Resumo - estágio rotatório 2

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Resumo
Este estágio foi realizado de forma integrada ao projeto de pesquisa que visa
entender como a interação entre células de Glioblastoma (GBM) com a matriz
extracelular de astrócitos que não expressam o supressor de tumor p53 pode afetar
o tratamento contra o tumor cerebral, tornando essas células tumorais mais
resistentes. Desta forma, objetiva-se compreender melhor qual a influência de p53
no fenótipo das células tumorais e de que maneira isso contribui para a progressão
do tumor. Nesse contexto, foram acompanhados procedimentos e protocolos como
imunofluorescência e ensaio de transwell, a fim de avaliar como a interação entre a
matriz extracelular depositada pelos astrócitos pode afetar a resistência de
linhagens celulares de glioblastoma (U87MG e T98G).
Além disso, também houve a participação em procedimentos na cultura de células,
com a finalidade de aprender os procedimentos utilizados na contagem de células,
assim como também a realização do ensaio de MTT para avaliar a viabilidade
celular. Ademais, também foi realizado o acompanhamento ao biotério,
acompanhando como as colônias de camundongos são mantidas e preparadas para
serem utilizadas nos experimentos e a forma como os animais são separados e
identificados pela numeração na orelha e a diferenciação de sexo. Ainda foi
realizada a participação na limpeza e manutenção das gaiolas, no procedimento de
eutanásia respeitando as regulações da bioética e no processo de estabelecimento
de acasalamentos para aumentar a colônia de acordo com a demanda dos
experimentos. Deste modo, a partir dos camundongos criados foi realizada a coleta
de um pedaço da sua cauda para extração de DNA, para ser usada na genotipagem
pelo método de PCR, a fim de identificar quais animais são homozigotos,
heterozigotos ou nocaute para p53, com o intuito de serem utilizados nos
experimentos.