Aula 2 - Padronização e Calibração

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PROFª. DRª. VIVIANE GOMES BONIFACIO
Análise Instrumental
profvivibonifacio@gmail.com
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Padronização
e Calibração
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Calibração
 Determina a relação entre a resposta analítica e a
concentração do analito.
 Uso de padrões químicos
 Quase todos os métodos analíticos requerem algum
tipo de calibração com padrões químicos.
 Usando equipamentos, recorre-se a métodos de
calibração
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Curva de calibração
 Curva analítica: representação gráfica da resposta do
instrumento (sinal analítico) em função da
concentração do analito proveniente de soluções
padrão (padrão externo). Também é chamada de
curva de trabalho ou curva de calibração.
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C
A
2,5 5 10
0.200
0.400
0.800
0
X
?
X=7,5
y = a + b x
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Padrão ➢ Concentração
conhecida.
➢ S1 ➢ S2 ➢ S3 ➢ S4 ➢ S5
➢ V1
➢ V2 ➢ V3
➢ V5
➢ V4
➢ Y = a + bx
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Método dos
Mínimos Quadrados
Ordinários
 Possui sigla MMQO
 Neste método, obtém-se uma reta que passa
entre todos os pontos de tal forma que a soma
dos resíduos seja a mínima.
 Esta reta possui uma equação,
denominada EQUAÇÃO DA RETA,
representada por:
y = a + bx
y = sinal analítico
b = inclinação (coeficinete angular)
a = intercepto (coeficiente linear)
x = Concentração da espécie de interesse
a
b
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• Devido aos erros indeterminados envolvidos no
processo de medida, nem todos os dados caem
exatamente na linha reta.
Considerações sobre o Método dos Mínimos
Quadrados
O analista precisa tentar traçar “a melhor” 
linha reta entre os pontos 
Análise de regressão fornece um meio para a 
obtenção de forma objetiva dessa linha. 
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Obtenção da Linha dos Mínimos Quadrados
• Os desvios verticais de cada ponto da linha reta
são chamados resíduos.
• A linha gerada pelo método dos mínimos
quadrados é aquela que minimiza a soma dos
quadrados dos resíduos para todos os pontos.
Fornece o melhor ajuste entre os pontos 
experimentais e a linha reta
➢ 1,0 mV
➢ X = 0,683 mg/L
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AnalistaA
➢ 0,1 mg/L ➢ 0,5 mg/L ➢ 1,0 mg/L ➢ 1,5 mg/L ➢ 2,0 mg/L
➢ 0,10 mV ➢ 2,70 mV➢ 0,50 mV ➢ 1,70 mV ➢ 2,10 mV
Analista B
➢ 0,1 mg/L ➢ 0,5 mg/L ➢ 1,0 mg/L ➢ 1,5 mg/L ➢ 2,0 mg/L
➢ 0,20 mV ➢ 1,0 mV ➢ 2,0 mV ➢ 2,90 mV ➢ 4,10 mV
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12
11
5 ppm
➢ 1 mL
➢ 0 mL
➢ 2 mL
➢3 mL➢ 4 mL
➢ Balões de
10 mL
➢ Fármaco (MM = 150 g/mol)
➢ Obtenha a curva analítica e a equação da reta.
➢ Avalie os casos a seguir.
➢ 5 mL
➢ 0,05 ➢ 0,151➢ 0,303➢ 0,452 ➢ 0,602
➢ Sinal Analítico:
➢ 0,756
➢ Absorvância (ABS)
Obtenção da Curva de 
Calibração
Exemplo:
Regressão Linear
Limpar dados: Shift Mode
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= =
Modo 
Regressão 
Linear:
Mode 3 1
Inserir Dados: x , y
M+
Obtenção dos 
Resultados
Shift 2
→ →
A 1
B 2
R 3
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➢ CASO 1
➢Após calibração, um analista fez a leitura de uma
solução contendo o fármaco e achou ABScorrigida =
0,500. Calcule a concentração do fármaco em solução.
➢ CASO 2
➢Após calibração, um analista fez a leitura de uma
solução contendo o fármaco e de uma solução de
branco. As leituras foram, respectivamente: ABS = 0,500
e ABS = 0,005. Calcule a concentração do fármaco em
solução.
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➢ CASO 3
➢Após calibração, um analista realizou o seguinte
procedimento: Transferiu 5 mL de amostra para um balão de 250
mL e ajustou o volume com solvente adequado. Em seguida, fez
a leitura da solução e achou ABScorrigida = 0,652. Calcule a
concentração do fármaco.
➢ CASO 4
➢Após calibração, um analista realizou o seguinte
procedimento: Dissolveu 0,0250 g de amostra em um balão de 10
mL. Em seguida, fez a leitura da solução e achou ABS = 0,457.
Calcule o teor de fármaco na amostra.
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➢ CASO 5
➢Após calibração, um analista realizou o seguinte
procedimento: Dissolveu 0,0052 g de amostra em um balão de
10 mL. Transferiu 5 mL de amostra para um balão de 100 mL e
ajustou o volume com solvente adequado. Em seguida, fez a
leitura da solução e achou ABScorrigida = 0,360. Calcule o teor
de fármaco na amostra.
➢ CASO 6
➢Nos casos 1, 2 e 3, calcule as respectivas
concentrações molares.
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Até a próxima aula
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