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DISCIPLINA: Análise de proteínas por eletroforese (ANA 00090) N°°°° de créditos: 2 Carga Horária: 30 Distribuição Didática (obrigatória): Teórica: 10 Prática: 20 Outras atividades: RESPONSÁVEL: Antonio José Goulart Rubens Monti Conteúdo Programático Teórico • Eletroforese o Teoria da eletroforese o Métodos de eletroforese o Eletroforese em gel de poliacrilamida em condições não desnaturante e desnaturante o Focalização isoelétrica o Eletroforese bidimensional • Imobilização o Princípios gerais de imobilização o Confinamento em gel de policrilamida • Deteção de proteínas no gel de poliacrilamida o Fixação de corante na proteína o Desenvolvimento de coloração através de atividade enzimática Prático • Aspectos práticos de Eletroforese o Instrumentação o Preparação dos reagentes o Coloração e detecção de bandas eletroforéticas • Eletroforese não desnaturante em gel de poliacrilamida • Eletroforese em condições desnaturantes em gel de poliacrilamida • Atividade de enzimas em gel de poliacrilamida em condições não desnaturantes. • Imobilização de enzimas em gel de poliacrilamida. Ementa • - Teoria da eletroforese • - Eletroforese desnaturante e não-desnaturante • - Eletroforese uni e bidimensional • - Imobilização de proteínas em gel de poliacrilamida • - Atividade enzimática em gel de poliacrilamida • - Coloração de géis Objetivos Após o curso, o aluno será capaz de desenvolver as técnicas de e letroforese em gel de pol iacri lamida, bem como entender como as proteínas migram sob influência de um campo elétrico. Critérios de Aval iação A aval iação será feita por acompanhamento do desempenho do aluno durante as aulas práticas e elaboração de um relatório f inal . Bibliografia 1 – ANDREWS, T.A. Electrophoresis: theory, techniques and biochemical and clinical applications. Clarendon Press, Oxford, 1995. 2-BOYER, F.R. Modern Experimental Biochemistry. The Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc. California, 1993. 3- PATEL, D. Gel electrophoresis: essential data. John Wiley, 1994. 4- HAMES, B.D.; RICKWOOD, D. Gel electrophoresis of proteins: a practical approach. Oxford University, 1990. 5- WESTERMEIER, R. Electrophoresis in practice: a guide to theory and practice. John Wiley, 2005.
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