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INDICADORES MICROBIOLÓGICOS DE QUALIDADE E SEGURANÇA DOS ALIMENTOS MILENA LIDIANE BOMFIM DE MELO INDICADORES DE QUALIDADE DE PRODUTOS Definição: São microrganismos e/ou produtos do seu metabolismo cuja presença em determinados alimentos e em certos níveis costuma ser utilizada para avaliar a qualidade ou “determinar” a vida de prateleira do produto. INDICADORES DE QUALIDADE DE PRODUTOS Características do microrganismo indicador: - Estar presente e ser detectável em todos os alimentos cuja qualidade deva ser avaliada. - Sua concentração e seu crescimento devem ter uma correlação inversamente proporcional à qualidade do produto. - Deve ser facilmente detectável, quantificado e distinguido de outros microrganismos. - Deve ser quantificado em um curto período de tempo. - Seu crescimento não deve ser afetado por outros microrganismos da flora do alimento. INDICADORES DE SEGURANÇA DOS ALIMENTOS Indicadores microbiológicos são empregados para avaliar: 1 – Segurança dos Alimentos 2 – Sanificação dos Alimentos INDICADORES DE SEGURANÇA DOS ALIMENTOS Histórias dos Indicadores de Segurança - Patógenos de interesse eram provenientes de fontes intestinais. - Indicadores sanitários – historicamente utilizados para detectar contaminação fecal de águas e possível presença de patógenos intestinais. - 1º indicador fecal – Escherichia coli. INDICADORES DE SEGURANÇA DOS ALIMENTOS Indicadores de Contaminação Fecal O uso de Escherichia coli como um indicador de contaminação de origem fecal presente em água foi proposto em 1892 por Escherich. COLIFORMES TOTAIS Bactérias da família Enterobacteriaceae (Citrobacter, Enterobacter, Eschecrichia e Klebsiella), capazes de fermentar a lactose com produção de gás, quando incubadas entre 35-37ºC, por 48 horas. São gram-negativas e não formadoras de esporos. Escherichia → habitat primário é o trato intestinal do homem e animais. Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella → presentes nas fezes, vegetais e solo. A presença destes microrganismos não indica necessariamente contaminação fecal recente ou ocorrência de enteropatógenos. o Escherichia coli: coliforme fecal o Klebsiella pneumoniae: coliforme fecal o Enterobacter aerogenes, Citrobacter, Klebsiella: (fezes, vegetais e solo): coliforme ambiental COLIFORMES TOTAIS Critérios relacionados aos indicadores fecais em alimentos - A bactéria relacionada deve demonstrar especificidade, ocorrendo apenas em ambientes intestinais; - Os indicadores devem ocorrer em altas concentrações nas fezes e devem poder ser encontrados em altas diluições; - Devem apresentar resistência ao ambiente extra-entérico; - Devem permitir uma detecção relativamente fácil e rápida, mesmo quando presentes em quantidades muito baixas. COLIFORMES TOTAIS COLIFORMES FECAIS E ESCHERICHIA COLI Correspondem aos coliformes totais que continuam fermentando lactose com produção de gás, quando incubadas à temperatura de 44-45,5ºC. Cerca de 90% das culturas de E. coli são positivas nessas condições. COLIFORMES FECAIS E ESCHERICHIA COLI Crescem entre pH de 4,4 a 9. A E.coli, pode crescer em meios mínimos contendo apenas uma fonte de carbono (glicose) e uma fonte de nitrogênio e outros minerais. Crescem bem em ágar nutriente. Suas colônias podem ser visíveis dentro de 12 a 16 horas a 37ºC. Portaria MS Nº 2914 DE 12/12/2011 (Federal) Potabilidade da Água Controle de Qualidade da Água Físico-Químico e Microbiológico METODOLOGIAS: Teste Presuntivo Teste Confirmativo Teste Completo ANÁLISE BACTERIOLÓGICA DA ÁGUA incubação a 35ºC/24-48 h: formação de gás: NMP Técnica dos tubos múltiplos para determinação do Número Mais Provável de coliformes - Teste Presuntivo 10 ml por tubo 0,1 ml por tubo 1 ml por tubo Amostra de água Teste Presuntivo: caldo lauril triptose (caldo lactosado) – E. coli Teste confirmativo: caldo lactosado bile-verde brilhante Tubos com gás do teste anterior Tubos com caldo lactosado bile verde brilhante Incubação a 35 ºC/24-48 h Teste Confirmativo para Coliformes Totais Teste Confirmativo para Coliformes Fecais Tubos com gás Caldo lactosado do teste confirmativo incubação a 44,5 ºC Coliformes fecais fermentam a lactose a 44,5 ºC Coliformes não fecais fermentam a lactose somente até 37 ºC Teste da Membrana Filtrante Colônias típicas: brilho metálico Colônias típicas: azuis Método Substrato Cromogênico/Fluorogênico - Baseia-se na utilização de substratos similares à lactose - Específicos para Escherichia coli. - Teste do Colilert - Ferramenta poderosa para identificação de Escherichia coli (teste confirmativo) Alimentos vegetais frescos Único indicador válido de contaminação fecal é a E. coli Alimentos frescos de origem animal Ocorrência de números elevados de Enterobacteriaceae pode indicar manipulação sem cuidados de higiene e/ou armazenamento inadequado. CONTAMINAÇÃO DE COLIFORMES EM OUTROS ALIMENTOS o Alimentos processados → a presença de um número considerável de coliformes ou Enterobacteriaceae indica: Processamento inadequado e/ou recontaminação pós-processamento (matéria-prima, equipamento sujo ou manipulação sem cuidados de higiene) e/ou, proliferação microbiana que poderia permitir a multiplicação de microrganismos patogênicos e toxigênicos. CONTAMINAÇÃO DE COLIFORMES EM OUTROS ALIMENTOS INDICADORES GERAIS DE CONTAMINAÇÃO DO ALIMENTO Contagem de bactérias aeróbias mesófilas Comumente empregada para indicar a qualidade sanitária dos alimentos. Um elevado número indica que o alimento é insalubre. Contagem elevada desse grupo de bactérias nos alimentos não perecíveis é indicativa do uso de matéria-prima contaminada ou processamento insatisfatório. Em alimentos perecíveis, pode indicar abuso durante o armazenamento em relação ao binômio tempo/temperatura. Todas as bactérias patogênicas de origem alimentar são mesófilas A deterioração de alimentos pode ser causada pelo crescimento de microrganismos que levariam a alterações organolépticas. INDICADORES GERAIS DE CONTAMINAÇÃO DO ALIMENTO Contagem de bactérias psicrotróficas e termófilas Avaliam o grau de deterioração de alimentos refrigerados ou daqueles submetidos a tratamento térmico Contagem de bactérias anaeróbias A presença de anaeróbios é indicativa de que houve condições favoráveis para a multiplicação de microrganismos patogênicos anaeróbios, como Clostridium botulinum e Clostridium perfringens. INDICADORES GERAIS DE CONTAMINAÇÃO DO ALIMENTO Contagem de bolores e leveduras Microrganismos importantes como contaminantes em alimentos ácidos e de baixa atividade de água, como frutas frescas, vegetais e cereais. São também responsáveis pela deterioração de sucos de frutas, queijos, alimentos congelados, desidratados e em conserva, como picles. A presença desses microrganismos pode tornar-se um perigo à saúde pública devido à produção de micotoxinas pelos bolores. INDICADORES GERAIS DE CONTAMINAÇÃO DO ALIMENTO o Boas práticas de higiene; o Alimentos devem chegar o mais rápido possível ao consumidor; o Armazenamento de alimentos congelados deve ser feita a temperaturas inferiores a -12ºC; o Eliminar ou reduzir o contato do ar através de embalagens; o Adicionar ácidos ou conservantes químicos, como benzoatos ou sorbatos; o Aquecer o alimento na etapa final de processamento para destruição de células vegetativas e esporos, etc. MEDIDAS PARA REDUZIR OU ELIMINAR OS MICRORGANISMOS PATOGÊNICOS DOS ALIMENTOS
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