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7 DNA e Eletroforese MaVu ]p TbdX Xg eaUdX Te X Te X dXefd sra X Va a X Te V hT a ;E8 X YdTZ X fae( MaVu fT Ut XhX fXd afT a cgX X T Zg e TbTe X dXefd sra g T X T ba X bda g d g fae YdTZ X fae X ;E8( GTdT dXT Td T ZXefra Va X Te X dXefd sra UTefT TVdXeVX fTd Ta ;E8 T X T XeX]T T X X iT' T TZ d g fX ba X fX bXdTfgdT Tbdabd T ae( 8 fXe X T dXTsra Va XsTd T efgdT a fgUa bTdXVX g Y g a V Tda( 8a ftd a T dXTsra T efgdT Va f gT V TdT F [T a TbX Te bTdT a fgUa Va a haVu ba X Xd cgX TVa fXVXg T Zg T Va eT7 GTdT hXd Y VTd a bda gfa X g T dXTsra X ZXefra Va X Te X dXefd sra haVu XhX eXd VTbT X h egT Td ae YXdX fXe YdTZ X fae bda g ae( i efX VadT fXe cgv Vae cgX VadT a ;E8 Te aUh T X fX ra t Ua T V a Td XefXe VadT fXe o efgdT a fgUa( Ea TUadTf d a ae V X f efTe gf T g bdaVXeea V[T T a eletroforese em gel bTdT eXbTdTd ae YdTZ X fae X ;E8 X a a cgX X Xe ba X h egT Td a dXeg fT a X g T ZXefra T t X agfdae bdaVX X fae ( 8 X XfdaYadXeX X ZX gf T T TfgdX T cgv VT a ;E8 bTdT eXbTdTd ae YdTZ X fae( JaU V dVg efq V Te ad T e ae Zdgbae YaeYTfa T VT X T a ;E8 era VTddXZT ae XZTf hT X fX( fra Te a tVg Te X ;E8 era g fa T e TfdTv Te bX a cgX t VTddXZT a bae f hT X fX( Ea ZX X X XfdaYadXeX Te a tVg Te X ;E8 era Va aVT Te X g VT ba X tfd Va a cgT fX g b a bae f ha X g b a XZTf ha X hra ZdTd bTdT a b a bae f ha( F VT ba X tfd Va YT Va cgX Te a tVg Te X ;E8 eX ahT Te bTdT cgX X Te eX eXbTdX X eX]T ef Zg Te g Te Te agfdTe fa a a bdaVXeea aVaddX X g ZX Tv hX a a X X XfdaYadXeX X gel ( GTdT eXbTdTd a ;E8 era gf T ae YXdX fXe f bae X ZX ( F ZX T e YdXc X fX X fX gf T a T X XfdaYadXeX X ;E8 t V[T T a X agarose X eX Va badfT Va a g T ZX Tf T Va XefvhX badt eX TszVTd X eX Vad( GTdT YT Xd g ZX bTdT ;E8 ag bTdT a Td g ZX haVu XhX eea hXd T TZTdaeX X b X g fT bra YXdhX fX Va aVTd X g dXV b X fX Tbdabd T a X X iTd dXeYd Td( cgT fa efa XeYd T ea Y VT( 8 GTdT Tb VTd a ;E8 a ZX X TZTdaeX gf T'eX g bX fX Tbdabd T a T TZTdaeX T T vcg T X ]p ebaefT a dXV b X fX( HgT a T TZTdaeX eX ea Y VT X a bX fX t dXf dT a bXd T XVX g T Y T X bXcgX ae ad YvV ae a ZX ( 8e T aefdTe X ;E8 era Va aVT Te ae basae T fXe a vV a T X XfdaYadXeX( GTdT T X XfdaYadXeX fa a a ZX t Va aVT a X g T VgUT X X XfdaYadXeX Va g fT bra pZgT % eT ( n Tb VT T g T VaddX fX X tfd VT T cgT hT Y g d TfdThte a fT bra X a ZX ( HgT a T VaddX fX t Tb VT T Te a tVg Te X ;E8 Va XsT T ZdTd bTdT a b a bae f ha a VT ba X tfd Va = ZgdT , ( + Figura 2. Na eletroforese, o gel é colocado em uma cuba com solução salina e é aplicada uma corrente elétrica. O DNA carregado negativamente migra para o pólo positivo. Ka a a ;E8 ZdT bTdT a b a bae f ha Te a TfXd T a ZX fad T T ZdTsra T e YvV bTdT Te a tVg Te X ;E8 T adXe a cgX bTdT Te X adXe( fra X g Xe a bXdva a X fX ba g YdTZ X fa bXcgX a X ;E8 ba X ZdTd g fa T e a ZX a cgX g YdTZ X fa ZdT X( MaVu ba X bX eTd a ZX X X XfdaYadXeX Va a g T b efT X Vadd T a X ae VaddX adXe Te a tVg Te T eXdX eXbTdT Te eX eXbTdT Va a Cuba de eletroforese com solução salina − − − − − − DNA Fonte de energia 9 Tf XfTe X g T Vadd T dXT = ZgdT - ( 8e a tVg Te X adXe VaddX T e dpb Te( ;gTe a tVg Te a Xe a fT T [a hra VaddXd XiTfT X fX ]g fTe( + + + Figura 3. Na eletroforese, os “DNAs pequenos” sempre ganham. 8b e T Zg fX ba T VaddX fX X tfd VT t VadfT T X a ZX t Va aVT a X g T ea gsra VadT fX( 8b e T Va adTsra a ;E8 ba X eXd h egT T a( F tfa a T e gf T a bX ae bXecg eT adXe t T Va adTsra Va Uda Xfa X Xfv a( HgT a a Uda Xfa X Xfv a eX ZT Ta ;E8 XefX Y gadXeVX eaU g g fdTh a XfT LM ( Obs: O brometo de etídio é mutagênico e requer extrema cautela durante a sua utilização e recipientes adequados para descarte ( F bT dra aUeXdhT a t g T etd X X d eVae UT Te a ZX 5 VT T UT T t Va baefT bad a tVg Te X ;E8 X g fT T [a( ET hXd T X Xi efX [yXe X a tVg Te X ;E8 X g T Xe T UT T Te X Te era a Xe a fT T [a ag X fT T [ae g fa bd i ae ( 8b e T ZXefra Va X Te X dXefd sra a ZX XhX TbdXeX fTd g T UT T bTdT VT T YdTZ X fa X fT T [a YXdX fX bda g a T ZXefra( F YdTZ X fa X ad 10 eXdp TcgX X cgX Zdag T e a ZX a basa a X Ya Va aVT a T T aefdT X a YdTZ X fa T ad eXdp TcgX X cgX Zdag X ae = ZgdT . ( A B 8 aefdTe 3( Era [p T aefdTe 2( a dXefT fX a ZX .( -( ,( Figura 4. Uma das finalidades da eletroforese em gel é separar produtos de digestão com enzimas de restrição. (A) Mapa de restrição com o tamanho dos fragmentos em pares de base. (B) Esquema de um gel após a eletroforese. 8.000 2.000 3.000 4.000 9.000 1. Digestão com enzima de restrição 2. Eletroforese 3. Visualização e análise do gel
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