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Cocos Gram+ 
de interesse 
clínico
Profa. Dra. Viviani Milan
viviani.rastelli@cruzeirodosul.edu.br
Cocos 
Gram 
positivos
Microrganismos mais 
frequentemente isolados de 
amostras biológicas humanas.
Família Micrococcaceae => 4 
gêneros
• Planococcus; 
• Micrococcus; 
• Stomatococcus; 
• Staphylococcus.
Staphylococcus spp.
✓Características gerais:
✓Cocos gram-positivos
✓Isolados ou aos pares => em cadeias curtas ou agrupados.
✓Aspecto macroscópico da colônia em meio sólido =>presença de
pigmento e hemólise em ágar sangue
✓Imóveis,
✓Anaeróbios facultativos,
✓Não formadores de esporos
✓Produtores de catalase.
Staphylococcus spp
Geralmente encontrados na pele e mucosas do 
homem e de outros animais. 
Muitas espécies são isoladas de partes específicas do 
corpo humano ou de certos animais, por exemplo:
• S. Auricularis encontrado como parte da microbiota humana do 
conduto auditivo 
• S. Hyicus causando dermatite infecciosa em suínos.
Staphylococcus spp.
37 espécies, 17 delas podem ser 
isoladas de amostras biológicas 
humanas
Staphylococcus – Importância clínica
• Agentes mais frequentemente relacionados à doenças humanas
• Pneumonias;
• Bacteremias;
• Infecções de pele e tecidos moles;
• Infecções relacionadas ao uso de próteses e cateteres venosos;
• Meningites.
• Agentes colonizantes => colonização pode ser transitória ou persistente
• Nasofaringe;
• Pele;
• Períneo.
Staphylococcus aureus
Maior 
problema 
patogênico
Problema de 
saúde 
mundial
Infecções 
relacionadas à 
assistência à 
saúde
Resistente a 
maioria dos 
antimicorbianos
Identificação
Staphylococcus
Staphylococcus - Isolamento
• Meios Líquidos - cocos isolados,
aos pares ou agrupados em
forma de cachos de uva
• Meio sólido – ágar sangue
incubada em 5% de tensão de CO2
Identificação Staphylococcus
Identificação
Staphylococcus
Identificação
Staphylococcus
Identificação
Staphylococcus
Identificação
Staphylococcus
Identificação
Staphylococcus
Identificação
Staphylococcus
Identificação Staphylococcus
Identificação Staphylococcus
Staphylococcus - Resistência
Resistência à penicilina
• Penicilinase
• Enzima sintetizada pelos estafilococos após exposição aos beta-lactâmicos;
• Hidrolisa o anel beta-lactâmico e inativa o antimicrobiano. 
Resistência à oxacilina (Meticilina, Nafcilina, Cloxacilina, Dicloxacilina)
• Alteração proteínas ligadoras de penicilinas denominadas pbps. 
• PBPs são enzimas importantes na síntese da parede bacteriana. 
Muito frequente que a resistência à oxacilina esteja acompanhada por resistência a outras classes de 
antimicrobianos, como clindamicina, eritromicina e tetraciclina, levando muitas vezes a poucas opções 
terapêuticas.
Staphylococcus - Resistência
Resistência aos glicopeptídeos
• Aumento da produção de monômeros de mureína (precursores do peptideoglicano);
• Maior quantidade de resíduos livres de D-alanil-D-alanina ou debris da parede bacteriana liberados 
para o meio extra-celular;
• Elevada atividade autolítica;
• Aumento da produção e expressão da PBP2a.
Resistência aos macrolídeos, lincosaminas e estreptogramina B 
• Modificações no alvo de ligação no ribossomo codificado pelo gene ermA ou ermC conferindo 
resistência cruzada aos macrolídeos, lincosamidas e estreptogramina B (fenótipo MLSB); 
• Efluxo ativo codificado pelo gene mrsA que confere resistência aos macrolídeos e estreptogramina B; 
• Inativação da droga.
Cocos 
gram 
positivos
Família Streptococcaceae: 
=> 2 gêneros
•Enterococcus
•Streptococcus
Enterococcus - Características
Cocos gram-positivos agrupados em cadeia; 
Anaeróbios facultativos;
Catalase negativa;
Crescimento a 10°C e 45°C e em ph 9,6;
Sobrevivem na concentração de 6,5% de nacl, a 60°C por 30 minutos;
Enterococcus –
Importância 
Clínica
Amplamente distribuídos na natureza
Microbiota normal do ser humano, 
principalmente do trato gastrointestinal. 
Podem ser isolados em indivíduos 
saudáveis em outras localizações:
• Pele, 
• Região peri-anal, 
• Via hépato-biliar
• Secreções de orofaringe e vaginal.
Enterococcus – Importância Clínica
Mais frequentes nas manifestações clínicas => E. Faecalis e E. Faecium
Infecções mais frequentes:
• Endocardite bacteriana
• Infecções do trato urinário (ITU);
• Infecções da corrente sanguínea (ICS);
• Infecções de sítio cirúrgico e intra-abdominais.
Infecções mais raras:
• Pneumonias em pacientes debilitados;
• Meningites (AIDS)
Enterococcus – Isolamento
Meios enriquecidos:
• Ágar sangue
• BHI
• Ágar azida
Temperatura adequada de crescimento é de 35±2ºc
Concentrações aumentadas de CO2
Enterococcus – Identificação
Enterococcus – Identificação
Enterococcus – Identificação
Hidrólise da Arginina
Detecção da Produção de Ácido a 
Partir de Diferentes Carboidratos
motilidade
Enterococcus – Resistência
β-lactâmicos:
• Produção de proteínas ligadoras de penicilina de baixa 
afinidade
Aminoglicosídeos
• Baixa permeabilidade da membrana
• produção de enzimas modificadoras de aminoglicosídeos
Streptococcus spp.
• Cocos Gram-positivos;
• Anaeróbios facultativos;
• Não produtores de catalase e de citocromo-oxidase.
• Homofermentadores => ácido lático 
• Produzir hemolisinas.
Streptococcus spp.
α-hemólise
ß-hemólise- hemólise
Classificação de Lancefield
Grupo A - Streptococcus 
pyogenes
Grupo B - Streptococcus 
agalactiae
Grupo C - Streptococcus 
equisimilis , Streptococcus 
equi , Streptococcus 
zooepidemicus , 
Streptococcus dysgalactiae
Grupo D - Enterococcus 
faecalis , Enterococcus 
faecium , Enterococcus 
durans e Streptococcus 
bovis
Grupo F, G e L -
Streptococcus anginosus
Grupo H - Streptococcus 
sanguis
Grupo K - Streptococcus 
salivarius
Grupo L - Streptococcus 
dysgalactiae
Grupo M e O -
Streptococcus mitis
Grupo N - Lactococcus lactis
Grupo R&S - Streptococcus 
suis
Outras espécies de 
Streptococcus são 
classificadas como 
'estreptococos não 
Lancefield'.
Streptococcus pneumoniae
• Meio sólido => Colônias lisas, pequenas, brilhantes,
côncavas, podendo exibir uma zona de depressão central
causada por uma autólise parcial das células bacterianas.
• Ágar sangue => Colônias circundadas por um halo
esverdeado de hemólise parcial ou hemólise alfa.
• Catalase negativo
• Diplococos Gram-positivos, com as extremidades em
ponta de lança ou em chama de vela.
• Imóveis (sem flagelos), não formam esporos e podem
possuir cápsula, o seu principal fator de patogenicidade.
• Cápsula de polissacarídeo => fator de virulência.
Streptococcus pneumoniae
Importância clínica:
• Habitat => sistema 
respiratório 
• Exigente
• Transmissão aérea por 
gotículas de salivas 
eliminadas durante a tosse 
ou espirros.
Doenças pneumocócicas
• Pneumonia
• Derrame pleural
• Bacteremia
• Meningite (>30% †)
• Otite média aguda
Streptococcus pneumoniae - Identificação
O teste da optoquina (sensível à optoquina)
O teste de solubilidade biliar (positivo)
Reação de inchaço capsular
Streptococcus pneumoniae em ágar sangue
Streptococcus pneumoniae cultivado em
ágar sangue Columbia com 5% de
sangue de ovelha desfibrinado.
Cultivo 48 horas, 37 °C em atmosfera
aeróbica enriquecida com 5% de dióxido
de carbono.
Streptococcus pneumoniae alfa-hemólise
Colônias mucoides de Streptococcus
pneumoniae circundadas por uma zona de
alfa-hemólise.
Ágar sangue de ovelha Columbia. Cultivo
48 horas, atmosfera aeróbica, 5% dióxido
de carbono, 37°C.
Streptococcus pneumoniae - o teste de optoquina
O teste de optoquina permite a
diferenciação de pneumococos de outros
estreptococos alfa-hemolíticos e
lactobacilos.
Streptococcus pneumoniae - teste de 
solubilidade biliar
O teste de solubilidade biliar é usado para 
diferenciar Streptococcus pneumoniae 
de Streptococcus spp. alfa-hemolítico.
As células pneumocócicas sofrem lise na 
presença de desoxicolato de sódio (sais 
biliares).
Streptococcus pneumoniae coloração Gram
Os pneumococosaparecem como células 
únicas, em pares ou em cadeias curtas de 
cocos. As bactérias estão na superfície de 
uma célula epitelial.
Streptococcus pneumoniae coloração Gram
Pneumococos encapsulados no escarro 
(indicado com setas). Observe a zona clara ao 
redor das células bacterianas coradas de azul 
causada pela presença de uma cápsula 
polissacarídica .
Streptococcus pneumoniae coloração Gram
Pneumococos no escarro circundados por 
uma ampla camada de uma cápsula 
polissacarídica. A cápsula polissacarídica em 
pneumococos é considerada o principal 
fator de virulência
Streptococcus pyogenes
• Colônias β-hemolíticas;
• Vários fatores de virulência. 
• Doenças:
• Faringites, 
• Infecções respiratórias, 
• Impetigo, 
• Erisipela, 
• Endocardites, 
• Meningites
• Artrites. 
• Infecções por cepas produtoras 
de toxinas => febre escarlatina e 
choque tóxico. 
• A faringite por S. pyogenes é 
comum e pode evoluir com 
sequelas como febre reumática e 
glomerulonefrite aguda.
Características básicas do Streptococcus pyogenes
Coco Gram-
positivo
Não móvel
Não 
formadora de 
esporos
Catalase: 
negativo
Oxidase: 
negativo
Facultativo 
anaeróbio
Identificação de Streptococcus pyogenes
O teste da catalase (negativo)
O teste PYR (positivo)
Presença de antígeno do grupo A de Lancefield (por 
exemplo, aglutinação de látex )
Streptococcus pyogenes em ágar sangue
Grandes colônias beta-
hemolíticas de Streptococcus
pyogenes em placa de ágar
sangue.
Cultivo 48 horas, 37 °C em
atmosfera aeróbica enriquecida
com 5% de dióxido de carbono.
Streptococcus pyogenes e atividade PYRase
O teste PYR determina a atividade de PYR,
também chamada de pirrolidonil
aminopeptidase, uma enzima produzida
por Streptococcus pyogenes , mas não por
outros estreptococos beta-hemolíticos.
Streptococcus pyogenes - Aglutinação de látex
A maioria dos estreptococos patogênicos possui antígenos
específicos de carboidratos , que permitem a classificação
dos estreptococos em grupos .
O antígeno extraído em conjunto com a aglutinação de látex
oferece um método rápido, sensível e específico para
identificação de estreptococos grupos A, B, C, D, F e G de
placas de cultura primárias.
Se o antígeno estiver presente, ele reagirá com os
anticorpos fazendo com que as esferas de látex se
aglomerem.
Streptococcus 
pyogenes coloração
Gram
S. agalactiae
• β-hemolítica
• Podem causar infecções 
graves em neonatologia, como 
sepse e meningite. 
• A detecção deste patógeno no 
trato genital e/ou 
gastrointestinal de parturientes 
pode identificar um risco para 
infecção dos recém-nascidos e 
guiar a terapia antimicrobiana 
intraparto.
• Algumas condições 
(neoplasias, imunodeficiências 
e diabetes mellitus) podem 
predispor adultos a infecções 
por este patógeno como 
• bacteremia,
• endocardite, 
• infecções de pele e tecidos 
moles, 
• pneumonia 
• osteomielites.
Características básicas do Streptococcus 
agalactiae
Coco gram-
positivo
Não móvel
Não 
formadora de 
esporos
Catalase: 
negativo
Oxidase: 
negativo
Facultativo 
anaeróbio
Identificação de Streptococcus 
agalactiae
O teste da catalase (negativo)
O teste CAMP (positivo)
O teste de hipurato (positivo)
O teste PYR (negativo ao contrário de S.pyogenes )
Presença do antígeno do grupo B de Lancefield ( aglutinação de látex )
Streptococcus agalactiae em meio de cultivo 
em ágar
Streptococcus agalactiae (estreptococo beta-
hemolítico do grupo B, GBS) cultivado em ágar
Columbia com 5% de sangue de ovelha desfibrinado.
Cultivo 24 horas em atmosfera aeróbica enriquecida
com 5% de dióxido de carbono.
Streptococcus agalactiae beta-hemólise
Streptococcus agalactiae em ágar sangue CAP
(ágar sangue de ovelha com colistina + aztreonam;
antibióticos inibem bactérias Gram-negativas).
Cultivo 24 horas, 37°C em atmosfera aeróbica
enriquecida com 5% de dióxido de carbono.
Streptococcus agalactiae-teste CAMP
O teste CAMP é um teste para identificar os
estreptococos beta-hemolíticos do grupo B
com base na formação de uma substância ( fator
CAMP ) que aumenta a área de hemólise formada
pela ß-hemolisina de Staphylococcus aureus .
Streptococcus agalactiae coloração de Gram
Os estreptococos do grupo B
(S.agalactiae) produzem
cadeias curtas de cocos Gram-
positivos em meios de cultura
líquidos. Ampliação ×1000.