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Regulação da expressão dos genes em organismos procariotos Regulação da expressão dos genes em procariotos • Os genes estão organizados dentro da célula em um único cromossomo • Genes específicos serão ativados para responder à estímulos em uma determinada situação Transcrição de um gene – procariotos • A transcrição e a transdução acontecem simultaneamente – não há compartimentalização. Geralmente iria ocorrer a transdução no citoplasma e a transcrição no núcleo, o procarioto não tem essa divisão então ocorre simultaneamente Transcrição de um gene: • Para iniciar a transcrição é necessário formar um mRNA Quem começa esse processo? A enzima RNA polimerase, ela precisa se ligar a um segmento de DNA denominado de promotor. • Tem que haver um consenso – sequencias de nucleotídeos no promotor que são necessárias para reconhecimento da RNA polimerase Sitio de iniciação – ponto +1 no DNA • Local onde o primeiro nucleotídeo será transcrito em mRNA Sequências consenso dos promotores • TATA BOX (-10) : TATAAT • (-35): TTGACG A RNA polimerase tem que reconhecer essas sequências consenso para dar início a transcrição FATOR SIGMA – ajuda a RNA polimerase a reconhecer os promotores Para que a transcrição ocorra: • Necessário que a fita de DNA se abra • Desnaturada com ruptura de pontes de hidrogênio • Se abrindo – permite que a RNA polimerase a copie • Somente uma fita do DNA será transcrita • Sentido da transcrição no DNA 5’ – 3’, adicionando ribonucleotídeos na extremidade 3’ OH da fita em alongamento • RNA polimerase é dependente de DNA • A RNA polimerase catalisa as ligações fosfodiester entre os ribonucleotídeos para geras a cadeia mRNA a partir de nucleotídeos livres, ATP, GTP, CTP, UTP • Requer além do molde todos os quatro ribonucleotídeos 5’ trifosfato como percussores das unidades nucleotídeas do RNA, além de Mg2+ • RNA polimerase se ligou ao promotor, a transcrição pode começar OPERON BACTERIANO • Formado por regiões que vão codificar proteínas e por regiões que não vão codificar proteínas, mas irão regular a transcrição desse operon • Codificam para mais de uma proteína ao mesmo tempo Cistron • Segmento de DNA que codifica para uma cadeia polipeptídica • Contém sinais de iniciação e término da proteína Operons policistrônicos • Transcritos em m RNA • Codificam para mais de um Cistron ao mesmo tempo • Várias proteínas de uma só vez MECANISMO REGULADORES DA TRANSCRIÇÃO • Interação com proteínas que levam ao controle da transcrição no operon • Bloqueio da transcrição (controle negativo) – reprimida • Ativação da transcrição (controle positivo) - induzida Promotor forte: • quanto mais similar com as sequencias do promotor estiver com a sequência dos elementos -10 e -35 • maior chance de ser transcrito do que aqueles que possuem promotor fraco Promotor fraco: • sequencias dos elementos de reconhecimento para a RNA polimerase não tão conservadas. Não reconhecendo a região promotora, fazendo que a transcrição fique prejudicada O controle da transcrição pode ser reprimido ou estimulado pela ausência ou presença de determinadas moléculas no meio em que este organismo está inserido Essas moléculas vão interagir com proteínas especificas, as operadoras do operon para controlar sua transcrição • rRNA16S se liga ao mRNA • 16S se liga por complementação a uma sequência específica • Essa sequência está próxima ao códon de início AUG e é conhecida como sequência Shine-Dalgarno CONTROLE NEGATIVO DA TRANSCRIÇÃO POR REPRESSÃO • Controle negativo - feedback • Controlar o gasto desnecessário dessa energia seria impedir a síntese de um produto quando ele já está presente no meio • Repressor – uma proteína que se liga ao DNA no sítio do operador, impedindo que a RNA polimerase inicie a transcrição, tendo uma perda de energia desnecessária. CONTROLE POSITIVO DA TRANSCRIÇÃO POR INDUÇÃO • O controle positivo da transcrição ocorre quando a síntese da enzima que vai catabolizar o carboidrato presente no ambiente é induzida. • Quando a presença de carboidrato promove a transcrição do gene para a enzima que irá quebrá-lo. REPRESSÃO CATABOLICA • Controle global da transcrição de enzimas que não estão relacionadas. • Realizado pela proteína CAP (catabolite activator protein) • Operons que estão sob controle da CAP não serão transcritos REGULAÇAÕ DA TRADUÇÃO • Os níveis de proteína gerado ocorrem através da regulação da tradução • Controle traducional é desempenhado por proteínas ou RNA – exposição ou bloquei Shine- Dalgarno • Proteínas repressoras de tradução – mRNA • S-adenosilmetionina • Ligação de um RNA complementar ao mRNA
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