Prévia do material em texto
1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO INSTRUÇÕES GERAIS 1. Neste experimento, você irá aprender o método de FISH e o ARRAY CGH. 2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do VirtuaLab. 3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial VirtuaLab” presente neste Roteiro. 4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”. 5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação de Resultados”. mailto:contato@algetec.com.br 2 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO RECOMENDAÇÕES DE ACESSO PARA ACESSAR O VIRTUALAB 1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome; 2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox; 3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador; 4. Verifique se o seu navegador está atualizado; 5. Realize teste de velocidade da internet. Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/ Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco! ATENÇÃO: O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET. O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB. SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA. mailto:contato@algetec.com.br https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/ 3 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO PERGUNTAS FREQUENTES 1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer? a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> “Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a opção e reinicie o navegador. b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de máximo desempenho. Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de vídeo instalado na máquina. c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador. d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> “Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o computador. mailto:contato@algetec.com.br 4 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder? a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> “Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente novamente. b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de máximo desempenho. Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de vídeo instalado na máquina. c) Verifique se o navegador está atualizado. mailto:contato@algetec.com.br 5 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO MATERIAIS NECESSÁRIOS • 2x SSC; • Álcool a 70%, 90% e 100%; • Amostra DNA referência e DNA teste; • Berço lâmina; • Braçadeira metálica; • Câmara úmida; • Chapa de aquecimento; • Estufa bacteriológica; • H2O destilada; • Hipoclorito de sódio; • Lâmina de vidro e Lamínula aCGH; • Micropipeta 10 µl; • Microscópio de fluorescência; • Notebook; • Óleo de imersão; • Pinça metálica; • Scanner; • Silicone; • Solução DAPI/antifade; • Solução de lavagem 1; • Solução de lavagem 2; • Sonda. mailto:contato@algetec.com.br 6 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO PROCEDIMENTOS 1. SELECIONANDO O EXPERIMENTO Visualize o menu numérico, de 1 e 2, dos métodos a serem realizados: Hibridização da sonda (Fish) e Método Array CGH (aCGH). HIBRIDIZAÇÃO DA SONDA 2. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Higienize as mãos na pia. Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”: jaleco, luvas, óculos e máscara. 3. PREPARANDO A LÂMINA Pipete 5 µl da sonda na lâmina com o material fixado. Em seguida, coloque a lamínula e aplique o silicone com a bisnaga. Leve a lâmina para chapa de aquecimento e ligue-a, deixe aquecendo por 5 minutos. Retire a lâmina da chapa, coloque-a na câmara úmida, leve para a estufa e incube overnight. Retire a câmara da estufa e a lâmina de dentro dela e, em seguida, retire o silicone e lamínula com a pinça. 4. REMOVENDO O EXCESSO DE SOLUÇÃO Coloque a lâmina dentro do berço e leve para a cuba contendo a solução 2SSC. Incube por 2 minutos. Depois mova o berço para a cuba com água destilada e deixe incubando por 20 segundos. Em seguida, mova o berço para a cuba com álcool 70%. Repita esse mesmo processo para o álcool 90 % e 100%. mailto:contato@algetec.com.br 7 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 5. VISUALIZANDO A LÂMINA NO MICROSCÓPIO Coloque a lâmina na banca e espere secar. Em seguida, pipete 10 µl de DAPI na lâmina, coloque uma lamínula por cima, leve ao microscópio e observe até a objetiva de 100x. Lembre-se de adicionar o óleo de imersão para visualizar a lâmina na objetiva de maior aumento. Ligue o notebook para concluir observação. 6. SELEIONANDO O EXPERIMENTO Visualize o menu numérico, de 1 e 2, dos métodos a serem realizados: Hibridização da sonda e MÉTODO ARRAY CGH (aCGH) 7. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Higienize as mãos na pia. Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”: jaleco, luvas, óculos e máscara. 8. MIX DAS AMOSTRAS Pipete na lâmina: 10 µl da amostra de DNA referência e 10 µl da amostra de DNA teste. 9. HIBRIDIZAÇÃO Leve a lâmina para abraçadeira de fixação, coloque a lamínula e feche a braçadeira. Mova a braçadeira para o agitador e ligue-o edeixe a amostra por 24 horas. mailto:contato@algetec.com.br 8 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 10. REMOÇÃO DO EXCESSO DA AMOSTRA Retire a braçadeira do agitador, a lâmina de dentro da braçadeira e coloque no berço. Leve o berço para a cuba contendo a solução de lavagem 1. Em seguida, leve para o agitador e deixe por 5 minutos. Depois mova o berço para a cuba com solução de lavagem 2 e retorne para o agitador deixando por 5 minutos a rotação de 20 rpm a 37°C. 11. DETECÇÃO DA FLUORESCÊNCIA Retire a cuba do agitador, retire o berço da cuba, coloque a lâmina na banca e espere secar. Ligue o computador, selecione o ícone “Scanner array” e leve a lâmina para o scanner. 12. AVALIANDO OS RESULTADOS Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo com o que foi observado nos experimentos mailto:contato@algetec.com.br 9 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 1. Qual a diferença do método FISH para o aCGH? 2. Quais são as aplicações para esses dois métodos? mailto:contato@algetec.com.br 10 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO TUTORIAL VIRTUALAB 1. SELECIONANDO O EXPERIMENTO Visualize o menu numérico, de 1 e 2, dos métodos a serem realizados: Método Fish e Método aCGH. mailto:contato@algetec.com.br 11 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Selecione o “Método Fish” clicando com o botão esquerdo do mouse. mailto:contato@algetec.com.br 12 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 2. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Armário de EPIs” localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+2”. Lave as mãos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pia. mailto:contato@algetec.com.br 13 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Armário de EPIs” ou através do atalho do teclado “Alt+2”. Abra o armário de EPI clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. mailto:contato@algetec.com.br 14 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco e luvas. Feche as portas do armário clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. mailto:contato@algetec.com.br 15 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 3. PREPARANDO A LÂMINA Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Experimento” ou através do atalho do teclado “Alt+3”. Ajuste o volume da micropipeta clicando com o botão direito do mouse e selecione a opção “Reajustar volume”. mailto:contato@algetec.com.br 16 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Configure o volume para 5 µl utilizando o seu teclado numérico e confirme clicando com o botão esquerdo do mouse em “Ok”. Destampe o tubo com substância fluorescente clicando com o botão esquerdo do mouse na sonda. mailto:contato@algetec.com.br 17 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Pipete 5 µl da substância fluorescente clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em sonda”. Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em lâmina”. mailto:contato@algetec.com.br 18 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Troque a poteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Desprezar líquido”. Coloque a lamínula clicando com o botão esquerdo do mouse na lamínula. mailto:contato@algetec.com.br 19 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Aplique o silicone clicando com o botão esquerdo do mouse na bisnaga de silicone. Mova a lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina. mailto:contato@algetec.com.br 20 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Ligue a chapa de aquecimento clicando com o botão esquerdo do mouse nos botões indicados. Aqueça a lâmina por 5 minutos ou avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. mailto:contato@algetec.com.br 21 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Retire a lâmina da chapa clicando com o botão direito do mouse na lâmina e selecione a opção “Colocar na bancada”. Mova a lâmina para a câmara úmida clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina. mailto:contato@algetec.com.br 22 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Tampe a câmara úmida clicando com o botão esquerdo do mouse na câmara úmida. Mova câmara para a estufa clicando com o botão direito do mouse na câmara úmida e selecione a opção “Colocar na estufa bacteriológica”. mailto:contato@algetec.com.br 23 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Feche a porta da estufa clicandocom o botão esquerdo do mouse na porta da estufa bacteriológica. Ligue a estufa clicando com o botão esquerdo do mouse no botão “Power”. mailto:contato@algetec.com.br 24 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Incube a lâmina por 24 horas ou avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. Abra a estufa clicando com o botão esquerdo do mouse na porta da estufa bacteriológica. mailto:contato@algetec.com.br 25 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Retire a câmara úmida clicando com o botão esquerdo do mouse na câmara úmida. Destampe a câmara clicando com o botão esquerdo do mouse na câmara úmida. mailto:contato@algetec.com.br 26 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Retire a lâmina clicando com o botão direito do mouse na lâmina e selecione a opção “Retirar objetos”. Retire o silicone clicando com o botão esquerdo do mouse na pinça metálica. mailto:contato@algetec.com.br 27 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Retire a lamínula clicando com o botão esquerdo do mouse na lamínula. mailto:contato@algetec.com.br 28 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 4. REMOVENDO O EXCESSO DE SOLUÇÃO Coloque a lâmina no berço clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina. Mova a o berço de lâminas clicando com o botão esquerdo do mouse no berço de lâminas. mailto:contato@algetec.com.br 29 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Incube a lâmina por 2 minutos ou avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. Mova a o berço de lâminas clicando com o botão esquerdo do mouse no berço de lâminas. mailto:contato@algetec.com.br 30 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Repita esse processo para a cubras com o álcool a 70%, 90% e 100%. Retire o berço de lâminas clicando com o botão esquerdo do mouse na cuba com álcool a 100%. mailto:contato@algetec.com.br 31 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 5. VISUALIZANDO A LÂMINA NO MICROSCÓPIO Retire a lâmina clicando com o botão direito do mouse no berço de lâminas. Espere a lâmina secar por 1 minuto ou avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. mailto:contato@algetec.com.br 32 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Ajuste o volume da micropipeta clicando com o botão direito do mouse e selecione a opção “Reajustar volume”. Configure o volume para 10 µL utilizando o seu teclado numérico, em seguida, clique em “ok” com o botão esquerdo do mouse. mailto:contato@algetec.com.br 33 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Pipete 10 µL clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em DAPI/Antifade”. Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em lâmina”. mailto:contato@algetec.com.br 34 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Troque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Desprezar líquido”. Coloque a lamínula clicando com o botão esquerdo do mouse na lamínula. mailto:contato@algetec.com.br 35 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Mova a lâmina clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Levar para microscópio”. Visualize o interruptor do microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Microscópio Lateral” ou através do atalho do teclado “Alt+6”. mailto:contato@algetec.com.br 36 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Ligue o microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse no interruptor localizado na base lateral do equipamento. Visualize o microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Microscópio” ou através do atalho do teclado “Alt+5”. mailto:contato@algetec.com.br 37 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Movimente as lentes objetivas pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre o revólver e movimentando o cursor à direita ou à esquerda. Realize o ajuste do foco pressionando o botão esquerdo do mouse sobre o parafuso macrométrico e movimentando o cursor à direita ou à esquerda. mailto:contato@algetec.com.br 38 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Se for necessário um ajuste mais apurado do foco, gire o botão micrométrico pressionando o botão esquerdo do mouse sobre ele e movimentando o cursor à direita ou à esquerda. Para movimentar a lâmina à direita ou à esquerda, gire a peça inferior do charriot pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre ela e movimentando o cursor à direita ou à esquerda. mailto:contato@algetec.com.br 39 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Para movimentar a lâmina à frente ou para trás, gire a peça superior do charriot pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre ela e movimentando o cursor à direita ou à esquerda. Visualize a lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o ícone “ver ocular” localizadoabaixo do ícone da engrenagem no canto superior direito da tela. mailto:contato@algetec.com.br 40 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Visualize a lâmina em todas as objetivas pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre o revólver e movimentando o cursor à direita ou à esquerda. Para análise na objetiva de 100 X coloque o óleo de imersão na lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse no óleo de imersão. mailto:contato@algetec.com.br 41 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Visualize o notebook clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Notebook” ou através do atalho do teclado “Alt+7”. Ligue o Notebook clicando com o botão esquerdo do mouse no botão “on/off”. mailto:contato@algetec.com.br 42 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Inicie o programa clicando com o botão esquerdo do mouse no ícone “Analisar DNA”. mailto:contato@algetec.com.br 43 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 6. SELECIONANDO O EXPERIMENTO Visualize as opções para selecionar o experimento clicando com o botão esquerdo do mouse em “Opções”. Selecione o “Método aCGH” clicando com o botão esquerdo do mouse. mailto:contato@algetec.com.br 44 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 7. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Armário de EPIs” localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela. Se preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+2”. Lave as mãos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pia. mailto:contato@algetec.com.br 45 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Armário de EPIs” ou através do atalho do teclado “Alt+2”. Abra o armário de EPI clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. mailto:contato@algetec.com.br 46 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco e luvas. Feche as portas do armário clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. mailto:contato@algetec.com.br 47 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 8. MIX DAS AMOSTRAS Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Experimento” ou através do atalho do teclado “Alt+3”. Destampe os tubos Eppendorf clicando com o botão esquerdo do mouse na sonda. mailto:contato@algetec.com.br 48 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Pipete 10 µl da substância fluorescente clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em amostra DNA referência”. Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em lâmina”. mailto:contato@algetec.com.br 49 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Torque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Trocar ponteira”. Pipete 10 µl da substância fluorescente clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em amostra DNA teste”. mailto:contato@algetec.com.br 50 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Mova a micropipeta clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Colocar em lâmina”. Torque a ponteira clicando com o botão direito do mouse na micropipeta e selecione a opção “Trocar ponteira”. mailto:contato@algetec.com.br 51 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 9. HIBRIDIZAÇÃO Mova a lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina. Mova a lamínula clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina. mailto:contato@algetec.com.br 52 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Monte a braçadeira clicando com o botão esquerdo do mouse na braçadeira. Mova a braçadeira clicando com o botão direito do mouse na braçadeira e selecione a opção “Colocar em chapa de aquecimento”. mailto:contato@algetec.com.br 53 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Ligue a chapa de aquecimento clicando com o botão esquerdo do mouse nos botões indicados. Mantenha a chapa em aquecimento a 20 RPM por 24 horas. Avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. mailto:contato@algetec.com.br 54 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 10. REMOVENDO O EXCESSO DA AMOSTRA Retire a braçadeira clicando com o botão direito do mouse na braçadeira e selecione a opção “Colocar na bancada”. Desmonte a braçadeira clicando com o botão esquerdo do mouse na braçadeira. mailto:contato@algetec.com.br 55 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Retire a lâmina clicando com o botão direito do mouse na lâmina e selecione a opção “Retirar lâmina”. Coloque a lâmina na braçadeira clicando com o botão esquerdo do mouse nalâmina. mailto:contato@algetec.com.br 56 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Mova o berço clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina. Mova a cuba clicando com o botão direito do mouse na cuba e selecione a opção “Colocar em agitador”. mailto:contato@algetec.com.br 57 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Ligue a chapa de aquecimento clicando com o botão esquerdo do mouse nos botões indicados. Mantenha a chapa de aquecimento ligada por 5 minutos. Avance o tempo clicando cm o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. mailto:contato@algetec.com.br 58 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Mova a cuba clicando com o botão direito do mouse na cuba e selecione a opção “Colocar na bancada”. Mova o berço clicando com o botão esquerdo do mouse no berço. mailto:contato@algetec.com.br 59 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Mova a cuba clicando com o botão direito do mouse na cuba e selecione a opção “Colocar em agitador”. Ligue a chapa de aquecimento clicando com o botão esquerdo do mouse nos botões indicados. mailto:contato@algetec.com.br 60 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Mantenha a chapa de aquecimento ligada por 5 minutos. Avance o tempo clicando cm o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. mailto:contato@algetec.com.br 61 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 11. DETECÇÃO DE FLUORESCÊNCIA Mova a cuba clicando com o botão direito do mouse na cuba e selecione a opção “Colocar na bancada”. Mova o berço clicando com o botão direito do mouse na cuba e selecione a opção “Colocar na bancada”. mailto:contato@algetec.com.br 62 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Retire a lâmina clicando com o botão direito do mouse no berço. Mantenha a lâmina secando por 1 minuto. Avance o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. mailto:contato@algetec.com.br 63 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Mova a lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina. Feche a tampa do scanner clicando com o botão esquerdo do mouse no scanner. mailto:contato@algetec.com.br 64 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Visualize o notebook clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome “Notebook” ou através do atalho do teclado “Alt+6”. Ligue o notebook clicando com o botão esquerdo do mouse no botão “on/off”. mailto:contato@algetec.com.br 65 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO Inicialize o sistema do scanner clicando com o botão esquerdo do mouse no ícone do programa. Analise o resultado clicando com o botão esquerdo do mouse em “Analisar”. mailto:contato@algetec.com.br 66 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br LABORATÓRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR / GENÉTICA HIBRIDIZAÇÃO 12. AVALIANDO OS RESULTADOS Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo com o que foi observado nos experimentos. mailto:contato@algetec.com.br