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Meio Tríplice Açúcar Ferro (TAF) ou Triple Sugar Iron (TSI) Esta prova é, geralmente, utilizada para diferenciar os diferentes gêneros das Enterobactérias e para distinguir esta família de outros bacilos Gram-negativos de origem intestinal. Esta diferenciação é feita atendendo às diferenças na fermentação dos carboidratos presentes no meio e à produção de sulfureto de hidrogénio (H2S). O TSI é um meio sólido e apresenta uma base e uma inclinação. É constituído de glicose (0,1%), lactose (1,0%) e sacarose (1,0%), peptonas, aminoácidos, incluindo sulfurados, tiossulfato de sódio e citrato férrico amoniacal (indicador da produção de H2S), com pH neutro e um indicador de pH, o vermelho de fenol. O meio é inoculado por picada, no cilindro e por estria, na superfície inclinada. Após o crescimento da bactéria pode-se observar os seguintes resultados: ÁCIDO (amarelo) / ÁCIDO (amarelo) – A/A – fermentação de glicose, lactose e sacarose. Ocorre acidificação do meio de cultura devido a grande produção pelas bactérias, superando a reação alcalina que ocorre na superfície, tornando o meio de cultura amarelo. ÁCIDO (amarelo) / ALCALINO (vermelho) – A/K – indica que o microrganismo fermenta a glicose, mas não a lactose e a sacarose. Estes microrganismos fermentam a glicose produzindo ácidos orgânicos, que alteram o pH. A base fica amarela e a superfície inclinada fica vermelha. ALCALINO (vermelho) / ALCALINO (vermelho) – K/K – organismos não fermentadores não provocam alterações, seja na base, seja na superfície inclinada. A formação de H2S é demonstrada pela reação com o sulfato ferroso, que escurece o meio. Condição Superfície Base Não fermentador Alcalino Alcalino Fermentador de glicose Alcalino Ácido Fermentador de glicose, sacarose e lactose Ácido Ácido
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