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Bases Biológicas RODRIGO BARBOSA DO NASCIMENTO 1 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática é a identificação do DNA extraído a partir de material vegetal em solução de lise. METODOLOGIA Comecei separando os meterias que seriam necessários para a extração do DNA vegetal, nesse caso da cebola: Figura1 – Materiais Utilizados 2 Materiais utilizados: 1 Cebola grande 1 Faca de cozinha 2 Copos 1 Colher sopa 1 Colher de chá 1 Filtro de café 1 Coador de café 1 Tábua de corte Água Plástico filme Detergente incolor Sal de cozinha Panela com Água (Banho Maria) Descanso de panela de metal (que caiba dentro da panela Vasilha com gelo (Banho de gelo) Álcool 92% (gelado) 1 par de Luvas de Procedimento (látex) ETAPA 01 - Coloquei ¾ de água no copo, acrescentei uma colher de detergente líquido incolor (sem mexer muito para não espumar) e uma colher de chá de sal de cozinha e misturei bem com o auxílio de uma colher. Essa foi a solução de lise que utilizei para extrair o DNA do material vegetal. ETAPA 02 - Piquei o material vegetal (cebola) em pequenos pedaços e coloquei no recipiente com a solução de lise. Misturei tudo vagarosamente para evitar a formação de bolhas devido a presença de detergente na solução e cobri o recipiente com plástico. ETAPA 03 - Coloquei o recipiente com o material em água já aquecida (Banho Maria no fogo baixo) por cerca de 20 minutos. ETAPA 04 - Retirei o recipiente com material de dentro da água quente e filtrei o material utilizando o coador de café com papel filtro em um outro copo, colocando até a metade do copo. ETAPA 05 - Cobri com papel filme o recipiente com material coado e dei um banho de gelo e deixei esfriar por cerca de 5 minutos. ETAPA 06 - Retirei o recipiente do gelo e adicione o álcool gelado ETAPA 07 - Observei o DNA precipitando como uma nuvem esbranquiçada na divisa entre a água e o álcool, o que levou por volta de 5 a 10 minutos para o DNA ficar visível, finalizando assim a extração de DNA. PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal RESULTADOS E DISCUSSÃO Foi possível observar , através do experimento, o DNA da cebola separado do restante do material . Resultado final 12 PRÁTICA 1 Extração de DNA Vegetal CONCLUSÕES Conseguimos observar o DNA da cebola separado do restante do material Conseguimos separar e observar como o DNA vegetal se separa dos demais componentes. O experimento não é tão completo quanto em um laboratório, porém é possível, de forma caseira, ilustrar a extração do DNA vegetal. PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas Figura 1 – Materiais utilizados OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática é observar as alterações sofridas nas proteínas do ovo (albumina) e do leite (caseína) submetendo elas a diferentes tratamentos para que o processo de desnaturação aconteça, ou seja, a estrutura de uma proteína sendo mudada. METODOLOGIA Comecei separando os meterias que seriam necessários para a Desnaturação de Proteínas: 14 Materiais utilizados: 6 copos ou recipiente de vidro transparente 3 Ovos Álcool Vinagre Água fervente 100 ml Leite Integral 1 Limão Vinagre 1 copo medidor 1 colher de sopa 30 cm fio de barbante 1 pedaço de pano 20x20 (tecido de fralda) 1 par de Luvas de Procedimentos (látex) Etapa 1 - Peguei 3 ovos, quebrei e reservei apenas a clara. Adicionei uma clara em cada copo totalizando 3 copos com clara. Etapa 2 - No primeiro copo já com a clara adicionei 2 colheres de água fervente Etapa 3 - No segundo copo com a clara adicionei 2 colheres de vinagre Etapa 4 - E no terceiro copo com a clara adicionei 2 colheres de álcool Etapa 5 - Observei a proteína desnaturando em cada copo com a mistura do material, após alguns minutos. Foi possível observar a diferença na textura que foi ficando esbranquiçada, pois a clara do ovo sofreu uma alteração que foi visível. Desnaturação da Albumina (proteína da clara do ovo) Desnaturação da Caseína (proteína do leite) Etapa 1 - Coloquei 50 ml de leite integral em 2 recipientes transparentes. Etapa 2 - No primeiro recipiente já com os 50 ml de leite, adicionei 15 ou 20 gotas de suco de limão. Etapa 3 - No segundo recipiente já com os 50 ml de leite, adicione i1 colher de vinagre. Etapa 4 - Posteriormente aguardei alguns minutos e observei que o leite coalhar, formando um resíduo que se separou do líquido e ao filtrar consegui observar mais claramente, a desnaturação desta proteína. PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas RESULTADOS E DISCUSSÃO Figura 2 – Resultado Final Comecei separando os meterias que seriam necessários para a desnaturação das proteínas, no caso as claras de ovos e o leite. PRÁTICA 2 Desnaturação de Proteínas CONCLUSÕES Vimos aqui a desnaturação das proteínas, no caso das claras de ovos pudemos ver suas reações com água fervente onde a clara do ovo mudou sua textura como se ficasse mais liquida. Com o vinagre e a alteração de ph gerou alteração de cor, com alguns pontos ficando mais brancos e já com o álcool, o aspecto fica como de algo que foi cozido. Já na desnaturação da proteína do leite vemos a mudança do aspecto como se coalhasse ao colocar limão e o vinagre. Os objetivos foram alcançados já que conseguimos separar e observar como as proteínas se desnaturam O experimento não é tão completo quanto em um laboratório, porém é possível, de forma caseira, ilustrar a desnaturação da proteína. image2.png image3.png image4.png image5.png image6.jpeg image7.jpeg image8.jpeg image9.jpeg image10.jpeg image11.jpeg image12.jpeg image13.jpeg image14.jpeg image15.jpeg image16.jpeg image17.jpeg image18.jpeg image19.jpeg image20.jpeg image21.jpeg image22.jpeg image23.jpeg image24.jpeg