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INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO, CIÊNCIA E TECNOLOGIA DO TOCANTINS CAMPUS ARAGUAÍNA CURSO TÉCNICO EM ANÁLISES CLÍNICAS UNIDADE CURRICULAR: Hematologia Clínica MÓDULO: 3° EXTRAÇÃO DO DNA DA BANANA Alunos: Izadora Cristina, Derlani Silva Prof. Sabrina Guimarães Paiva ARAGUAÍNA, 2025 1. INTRODUÇÃO Durante a aula prática de Biologia Molecular, realizamos a extração do DNA de células vegetais utilizando como amostra uma banana. Essa atividade teve como principal objetivo reforçar os conceitos teóricos sobre a estrutura e função do DNA e nos proporcionar uma experiência prática de como esse material genético pode ser isolado de forma simples, utilizando reagentes acessíveis e de fácil manuseio. O DNA (ácido desoxirribonucleico) é a molécula que carrega toda a informação genética dos seres vivos e está presente no núcleo das células e, em alguns casos, nas mitocôndrias. Ele é composto por nucleotídeos, que contêm uma base nitrogenada, um açúcar (desoxirribose) e um grupo fosfato. Na extração do DNA, é necessário romper as membranas celulares e nucleares para que o conteúdo genético seja liberado. Para isso, utilizamos uma solução contendo detergente, que atua destruindo as membranas lipídicas, e sal, que ajuda a aglomerar o DNA ao neutralizar as cargas negativas da molécula. O álcool gelado, por sua vez, é responsável por precipitar o DNA, tornando possível visualizá-lo a olho nu. Nós, juntamente com nossa dupla, realizamos essa prática com atenção a cada etapa do procedimento, o que nos permitiu compreender como técnicas simples podem revelar processos moleculares complexos. Além de observarmos o DNA de forma visível, refletimos sobre a importância dessa biomolécula e como sua manipulação é essencial em diversas áreas da ciência, como genética, biotecnologia, medicina e pesquisas forenses. 2 OBJETIVOS Demonstrar e compreender o processo de extração do DNA de células vegetais (banana), utilizando reagentes caseiros. O experimento também busca explicar a função de cada reagente utilizado e o papel da temperatura elevada no sucesso do procedimento. 3 MÉTODOS O método utilizado baseia-se em técnicas simples de lise celular, separação de componentes e precipitação do DNA, seguindo os seguintes princípios: - Rompimento das membranas celulares com detergente; - Dissolução de proteínas com sal; - Liberação do DNA com auxílio de temperatura elevada; - Precipitação do DNA com álcool gelado. 3 MATERIAIS UTILIZADOS Banana madura: Fonte do material genético. Suas células contêm grande quantidade de DNA. Água morna: Auxilia na quebra das membranas celulares, acelerando a difusão dos reagentes e desnaturando proteínas. Detergente neutro: Rompe as membranas celulares e nucleares, liberando o conteúdo interno das células. Sal de cozinha: Neutraliza cargas negativas e ajuda a aglutinar as moléculas de DNA. Álcool etílico 96% gelado: Precipita o DNA, que é insolúvel em álcool, tornando-o visível. Peneira: Utilizada para separar os sólidos da solução contendo o DNA. Bastão de vidro: Usado para recolher e visualizar o DNA precipitado. 4 PROCEDIMENTOS - Maceração da banana: A banana madura foi descascada, cortada em pequenos cubos macerada com pilão até formar uma pasta homogênea. - Preparação da solução extratora: Em um béquer, foram misturados 100 mL de água morna, 2 g de sal e 10 mL de detergente neutro, homogeneizando-se com bastão de vidro até dissolver totalmente. - Extração do DNA: A solução extratora foi adicionada à banana macerada. A mistura foi colocada em banho-maria a 45 ºC por 15 minutos, com agitação suave. - Filtração: A mistura foi filtrada com o uso de peneira fina para separar a parte sólida do líquido contendo o DNA. - Precipitação do DNA: Foram transferidos 5 mL do filtrado para um tubo de ensaio e adicionados lentamente 10 mL de álcool etílico gelado pela parede do tubo. Após 3 a 5 minutos, observou-se a formação de uma camada viscosa branca. - Coleta do DNA: Os filamentos brancos formados foram coletados utilizando uma pipeta Pasteur ou bastão fino. 5 RESULTADO E DISCUSSÃO Durante o experimento, conseguimos visualizar uma substância branca e filamentosa, flutuando na interface entre o álcool e a solução aquosa. Concluímos que esse material corresponde ao DNA da banana, isolado das demais estruturas celulares. Durante a prática, aplicamos procedimentos que são etapas fundamentais da biologia celular. A solução com detergente e sal nos ajudou a romper as membranas celulares e nucleares, liberando o DNA. O uso do álcool gelado facilitou a precipitação do DNA, o que nos permitiu observá-lo a olho nu. A atividade nos proporcionou uma compreensão concreta dos processos de extração e isolamento do material genético.Respostas às Perguntas do Relatório RESPOSTA ÀS PERGUNTAS DO RELATÓRIO Qual a função do sal no processo? O sal ajuda a quebrar as interações entre as proteínas e o DNA, facilitando sua liberação e estabilizando as moléculas de DNA fora da célula. Qual a função do detergente no processo? O detergente rompe as membranas celulares e nucleares, dissolvendo os lipídios presentes e permitindo a liberação do conteúdo celular, incluindo o DNA. 6 Conclusão Com a realização dessa prática, conseguimos visualizar na prática os conceitos estudados sobre a estrutura e o isolamento do DNA. Através de etapas simples e com materiais acessíveis, conseguimos extrair o DNA da banana, observando-o a olho nu. A atividade foi importante para consolidarmos nossos conhecimentos em biologia molecular, especialmente sobre a composição das células, a quebra das membranas e o processo de precipitação do DNA. Além disso, reforçamos a importância do trabalho em equipe e da observação cuidadosa nos experimentos laboratoriais. 7 REFERÊNCIAS MILLER, K. R. & LEVINE, J. S. Biologia. 1. ed. São Paulo: Moderna, 2010.,