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32 Questões Concursos Coloração ( Gram e Ziehl-Neelsen)

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QUESTÕES: 
 
1. Durante a coloração de Gram, um técnico laboratorial em microbiologia inverteu a                         
ordem das etapas e submeteu a amostra à solução de álcool a 95% antes de tratar                               
a amostra com lugol. Com base na morfologia de procariotos e a finalidade desse                           
método de coloração, a opção que contém a consequência da distração do                       
profissional é: 
A) o álcool pode ser adicionado em qualquer etapa da coloração de Gram; 
B) o lugol funciona como descorante, retirando o excesso de cristal violeta; 
C) as bactérias Gram­negativas não serão coradas pelo lugol; 
D) o lugol não faz nenhuma diferença na coloração de Gram; 
E) as bactérias Gram­positivas serão descoradas pela ação do álcool. 
 
2. Um paciente, com suspeita de tuberculose, foi encaminhado a um laboratório de                         
microbiologia para realização da baciloscopia a fim de confirmar o diagnóstico da                       
doença. A presença da bactéria da tuberculose a partir do escarro foi evidenciada 
utilizando­se o método de 
A) Gram, que corou os bacilos álcool­ácido­resistentes em vermelho. 
B) Ziehl­Neelsen, que corou os bacilos álcool­ácido­resistentes em vermelho. 
C) Ziehl­Neelsen, que corou os bacilos não álcool­ácido­resistentes em violeta. 
D) Gram, que corou os bacilos não álcool­ácido­resistentes em violeta. 
 
3. Os corantes básicos de anilina são os mais utilizados dentre as técnicas de                           
coloração aplicadas na bacteriologia. Esses corantes apresentam grupos               
cromóforos, dotados de carga:  
A) positiva, que coram as mitocôndrias. 
B) negativa, que coram a membrana citoplasmática. 
C) negativa, que coram a parede celular. 
D) positiva, que coram os componentes nucleares.  
 
4. Um microbiologista recebeu um material biológico para que fosse preparado um 
esfregaço numa lâmina e submetido a uma técnica de coloração simples. Dentre as 
opções abaixo relacionadas ao preparo e fixação do esfregaço, o procedimento 
correto é:  
A) espalhar o material sobre a lâmina fazendo movimentos circulares e, ainda                       
úmido, 
passar a lâmina duas a três vezes na chama do bico de Bunsen. 
B) depositar uma gota do material sobre a lâmina, deixar secar à temperatura 
ambiente e, em seguida, passar a lâmina três vezes na chama do bico de Bunsen. 
C) espalhar o material sobre a lâmina fazendo movimentos circulares, deixar secar à 
temperatura ambiente e passar a lâmina três vezes na chama do bico de Bunsen. 
D) depositar uma gota de material sobre a lâmina e, ainda úmido, passar a lâmina 
duas a três vezes na chama do bico de Bunsen 
 
5. A coloração de Gram, amplamente utilizada na microbiologia, permite diferenciar                     
as bactérias Gram­positivas das Gram­negativas. Nessa técnica, a função do iodo é: 
A) fixar o corante no interior das células. 
B) atuar como agente diferenciador da coloração. 
C) corar o núcleo das células em púrpura. 
D) corar todas as células em púrpura.  
 
6. Os métodos de coloração de Gram e Ziehl­Neelsen são os mais usados em                           
bacteriologia clínica, podendo ser aplicados para caracterização e rastreamento da                   
maioria das cepas de importância clínica. Em relação aos métodos e ao                       
comportamento citomorfológico de bactérias, analise as afirmativas abaixo. 
1. Esfregaços corados pelo método de Ziehl­Neelsen são úteis no diagnóstico bem                       
como no acompanhamento da resposta do paciente ao tratamento. Usando a                     
metodologia para acompanhamento, caso o número de microrganismos não                 
diminua após o início da terapia, deve­se considerar a possibilidade de resistência                       
aos fármacos. 
2. Na caracterização dos principais patógenos envolvidos em quadros de meningite,                     
o método de coloração de Gram é de fundamental importância, visto que os                         
principais agentes etiológicos apresentam diferenças na coloração, sendo Neisseria                 
meningitidis diplococo Gram negativo, Streptococcus pneumoniae diplococo Gram               
positivo e Haemophilus influenzae cocobacilo Gram positivo. 
3. Alguns erros podem acontecer quando se realiza a coloração pelo método de                         
Gram, tais como a descoloração insuficiente com álcool­acetona, resultando na                   
retenção do cristal violeta dificultando a observação de bactérias Gram negativas 
 
A alternativa correta é: 
a) Opção 1. 
b) Opções 1 e 2. 
c) Opções 1 e 3. 
d) Opções 2 e 3. 
e) Todas as opções (1, 2 e 3). 
 
7. A observação da forma das bactérias é possível pela utilização do microscópio.                         
Para facilitar essa observação, existe uma série de combinações entre substâncias                     
químicas e corantes. Essas técnicas de coloração para posterior visualização são                     
utilizadas rotineiramente no laboratório de microbiologia. Com relação às técnicas                   
de coloração, julgue as assertivas abaixo: 
I. O preparo de suspensões de microorganismos para posterior observação é                     
realizado utilizando uma alça de platina, com a qual uma gota é retirada da solução                             
contendo o microorganismo e espalhada sobre uma lâmina limpa e seca. 
II. A alça de platina deve ser flambada entre a semeadura em uma lâmina e outra,                               
mesmo que sejam microorganismos semelhantes. 
III. O tempo de incubação da fucsina sobre a lâmina é de 45 segundos na coloração                               
simples com fucsina. 
IV. O óleo de imersão deve ser evitado quando utilizada a coloração simples de                           
fucsina. 
V. A coloração pela fucsina tinge os microrganismos de vermelho 
 
8. Considerando a técnica de coloração de Gram e as características da parede                         
bacteriana, julgue as assertivas abaixo: 
I. As bactérias, de acordo com a coloração apresentada pela técnica de Gram,                         
podem ser classificadas em Gram positivas e Gram negativas. 
II. A parede das bactérias consideradas Gram positivas é mais delgada, permitindo                       
a entrada do corante na célula bacteriana. 
III. As bactérias Gram positivas apresentam coloração azul ao final da técnica. 
IV. A parede celular das bactérias consideradas Gram negativas é composta por:                       
lipopolissacarídeos, fosfolipídeos, lipoproteínas e uma fina camada de               
peptideoglicano. 
V. As bactérias consideradas Gram negativas apresentam coloração vermelha ao                   
final da técnica. 
 
9. Na realização da técnica de Gram, todos os passos devem ser criteriosamente                         
seguidos pelo técnico do laboratório de microbiologia, de modo a evitar o                       
comprometimento da técnica e a dificuldade na interpretação dos resultados.                   
Considerando essas informações, julgue as assertivas abaixo: 
I. A exposição máxima da lâmina ao cristal violeta deve ser de 15 segundos. 
II. O lugol deve ser adicionado posteriormente ao cristal violeta e o tempo para                           
reação é de 1 minuto. 
III. A lâmina, após o lugol, deve ser lavada com água destilada para retirar o                             
excesso. 
IV. O óleo de imersão deve ser acrescentado ao final do processo para observação                           
no microscópio. 
V. A fucsina é o primeiro corante a ser acrescentado à lâmina na técnica de Gram.10. As interpretações dos esfregaços corados pelo Gram envolvem considerações                   
relacionadas com as características da coloração, tamanho, forma e agrupamento                   
das células. Estas características podem ser influenciadas por vários fatores. Dentre                     
eles podem­se incluir:  
A) forma de coleta e transporte do material, experiência do profissional, estado                       
nutricional do paciente.  
B) experiência do profissional, estado imunológico do paciente e a presença de                       
substâncias inibidoras.  
C) o meio de cultivo utilizado, a atmosfera de incubação, experiência do profissional,                         
estado imunológico do  paciente.  
D) idade da cultura, presença de substâncias inibidoras, estado imunológico do                     
paciente e forma de coleta e transporte do material.  
E) idade da cultura, o meio de cultivo utilizado, a atmosfera de incubação e a                             
presença de substâncias  inibidoras.  
 
11. Para o estudo da morfologia bacteriana é correto utilizar, na rotina, a coloração                           
de:  
A) Ziehl­Neelsen.  
B) Gram.  
C) Leishman.  
D) White.  
 
12. Para a coloração de bacilos álcool­ácido resistentes, devemos utilizar a                     
coloração de Ziehl­Neelsen  na seguinte ordem:  
A) Fucsina diluída, álcool­acetona e Azul de Metileno.  
B) Fucsina fenicada, álcool­acetona e Azul de Metileno.  
C) Fucsina diluída, álcool­ácido e Azul de Metileno.  
D) Fucsina fenicada, álcool­ácido e Azul de Metileno 
 
13. A coloração pelo método de Gram identifica as bactérias gram­positivas por                       
apresentarem um maior percentual de:  
(A) lipídeos;  
(B) peptideoglicanos;  
(C) proteínas nucleares;  
(D) proteínas citosólicas;  
(E) carboidratos.  
 
14. Mycobacterium tuberculosis se diferencia de outras bactérias que não são                     
álcool­ácido resistentes, pelo método de Ziehl­Neelsen, por apresentar uma                 
coloração:  
(A) roxa;  
(B) Azul­escuro;  
(C) verde;  
(D) vermelha;  
(E) laranja. 
 
15. Assinale a opção CORRETA:  
A) Bactérias Gram negativas sofrem descoloração pelo iodo.  
B) Bactérias Gram positivas sofrem descoloração pelo álcool.  
C) Bactérias Gram positivas coram­se com safranina após descoloração pelo álcool.                     
D) Bactérias Gram positivas coram­se de violeta e bactérias Gram negativas                     
coram­se de vermelho 
 
16. Dadas as afirmativas abaixo quanto aos Métodos de Coloração de                     
Microorganismos para visualização em microscópio óptico:  
I. A coloração de Ziehl­Neelsen pode ser utilizada somente para coloração de                       
micobactérias.  
II. Ao final da coloração de Gram, as bactérias Gram positivas coram­se com o                           
corante primário, denominado safranina ou fucsina.  
III. Ao final da coloração de Gram, as bactérias Gram negativas coram­se com o                           
corante secundário, denominado safranina ou fucsina.  
IV. Colorações simples utilizam um único corante 
Verifica­se que estão corretas apenas  
A) III e IV.  
B) II e IV.  
C) II e III.  
D) I, III e IV.  
E) I e II.  
 
17. ​A coloração de Gram é um importante método empregado na microbiologia, que                         
permite diferenciar bactérias em duas classes as Gram­positivas e Gram­negativas                   
em função das propriedades químicas da parede celular. As bactérias                   
Gram­positivas possuem na parede celular uma camada espessa de                 
peptideoglicano, que é uma rede polimérica contendo açúcares (N­acetilglicosamina                 
e ácido N­acetilmurâmico) e oligopeptídeos, enquanto que as bactérias                 
Gram­negativas contêm uma camada fina. Na coloração de Gram utiliza­se o cristal                       
violeta (cloreto de hexametilpararoanilina), que interage com o peptideoglicano. A                   
adição de iodeto causa a precipitação do corante e as partículas sólidas ficam                         
aprisionadas na rede polimérica, corando a parede celular. Ao lado estão                     
esquematizadas a rede polimérica do peptideoglicano e as estruturas das espécies                     
envolvidas. 
 
A partir das informações fornecidas, é correto afirmar que a principal interação entre o                           
cristal violeta e a parede celular é:  
a) ligação de hidrogênio 
b) interação íon­dipolo. 
c) interação íon­dipolo instantâneo 
d) interação dipolo­dipolo. 
e) interação dipolo­dipolo instantâneo 
18. ​Para a identificação de bactérias a coloração é um dos passos mais                         
importantes, cuja finalidade é sua observação microscópica para diferenciação. Em                   
relação às colorações, assinale a alternativa incorreta: 
A. Na coloração de Gram as bactérias Gram­positivas retêm o precipitado azul                     
formado pelo corante cristal violeta, reagindo com o lugol. 
B. Na coloração de Gram as bactérias Gram­negativas não retêm o precipitado                     
azul formado e adquirem a coloração do corante de fundo. 
C. Na coloração de Ziehl­Neelsen a coloração é feita a frio pelo azul de                         
metileno. 
D. A resistência de muitas bactérias Gram­positivas à descoloração diminui à                   
medida que a célula bacteriana envelhece. 
E. As bactérias Gram­negativas são facilmente dissolvidas ou desorganizadas               
pelo álcool 
 
19. A identificação de micro­organismos requer, entre outros, a observação de sua                       
morfologia. Após o preparo do esfregaço, a lâmina é passada algumas vezes pela                         
chama, num processo denominado:  
A) Secagem do esfregaço.  
B) Fixação do esfregaço.  
C) Ebulição do esfregaço. 
D) Coloração do esfregaço. 
E) Evaporação do esfregaço. 
 
20. Para a visualização da morfologia, arranjo e/ou reação tintorial, os                     
micro­organismos sofrem um processo de coloração. O primeiro passo das técnicas                     
de coloração consiste  
(A) na preparação da suspensão bacteriana.  
(B) na confecção do esfregaço bacteriano.  
(C) na preparação da eluição bacteriana.  
(D) na confecção do inóculo bacteriano.  
 
21. Para cada questão marque V, se a proposição é verdadeira; F, se a proposição                             
é falsa. 
( ) As bactérias do gênero Mycobacterium resistem à descoloração por solventes                       
orgânicos fortes, motivo pelo qual são coradas através do método de Ziehl­Neelsen. 
( ) A principal utilização da coloração negativa é a detecção de endosporos nas                           
bactérias. 
( ) A identificação presuntiva de bactérias pode ser realizada através da utilização                         
da coloração de Gram, associada à morfologia das células. 
 
22. O método de Gram, técnica de coloração de bactérias desenvolvida pelo médico                         
dinamarquês Gram, permite separar as espécies de bactérias em dois grandes                     
grupos: as bactérias gram­positivas e as gram­negativas. A coloração de Gram é                       
um dos mais importantes métodos de coloração empregados nos laboratórios de                     
microbiologia na determinação de amostras de bactérias. Assinale a opção que                     
explica o princípio desse método.  
A As mitocôndrias de bactérias gram­positivas retêm o corante cristal violeta usado,                       
enquanto as mitocôndrias de bactériasgram­negativas não o fazem.  
B Os ácidos nucleicos de bactérias gram­positivas retêm o corante cristal violeta                       
usado, enquanto as paredes celulares de bactérias gram­negativas não o fazem.  
C Os núcleos de bactérias gram­positivas retêm o corante cristal violeta usado,                       
enquanto os núcleos de bactérias gram­negativas não o fazem.  
D As membranas plasmáticas de bactérias gram­positivas retêm o corante cristal                     
violeta usado, enquanto as membranas plasmáticas de bactérias gram­negativas                 
não o fazem.  
E As paredes celulares de bactérias gram­positivas retêm o corante cristal violeta                       
usado, enquanto as paredes celulares de bactérias gram­negativas não o fazem. 
 
23. Em 1884, o bioquímico dinamarquês Hans Christhian Gram (1853­1938) criou                     
um processo, chamado coloração de Gram, usado para classificar as bactérias em                       
gram­positivas ou gram­negativas, conforme absorvam ou não um determinado                 
corante. Neste procedimento, as bactérias:  
(A) gram­positivas são identificadas em vermelho pela coloração de contraste com                     
fucsina. 
(B) gram­negativas são identificadas em roxo pela coloração de contraste com                     
safranina. 
(C) gram­positivas são identificadas em vermelho pela coloração de contraste com                     
safranina. 
(D) gram­positivas são identificadas em roxo pela coloração de contraste com lugol.                       
(E) gram­negativas são identificadas em vermelho pela coloração de contraste com                     
safranina.  
 
24. Sobre a coloração de Ziehl­Neelsen, avalie as afirmativas a seguir:  
I – É uma coloração feita a quente e a fucsina concentrada fica retida nas bactérias                               
álcool ácido resistentes.  
II – Como a coloração de fundo é feita com azul de metileno, as bactérias que não                                 
são resistentes tornam­se azuis.  
III – As bactérias álcool ácido resistentes coram­se de rosa já que estas retêm o                             
corante após a descoloração do esfregaço feita com uma mistura de álcool e ácido                           
clorídrico.  
Assinale a alternativa correta.  
a) Somente as afirmativas I e II estão corretas.  
b) Somente as afirmativas I e III estão corretas.  
c) Somente as afirmativas II e III estão corretas.  
d) Somente a afirmativa II está correta.  
e) Todas as afirmativas estão corretas.  
 
25. A coloração é um dos passos mais importantes na identificação de bactérias.                         
Assinale a alternativa incorreta sobre as técnicas de coloração.  
a) Os esfregaços são fixados, na rotina de laboratório, pelo calor, passando­se a                         
lâmina com esfregaço rapidamente pela chama do bico de Bunsen.  
b) Raramente, em laboratórios clínicos, usa­se coloração de esfregaços apenas                   
com um corante, pois a coloração diferencial é mais satisfatória e fornece um                         
número muito maior de informações.  
c) As colorações de maior importância para a microbiologia são as de Gram e Ziehl­                             
Neelsen.  
d) As bactérias se comportam como o material nuclear e, por isso, a maioria dos                             
corantes utilizados na bacteriologia possuem características básicas.  
e) Fatores como pH da solução de lavagem, pureza dos reagentes e limpeza das                           
lâminas não influenciam nos resultados da coloração quando as técnicas são                     
seguidas.  
 
26. O método de coloração de Gram consiste no tratamento sucessivo de um                         
esfregaço bacteriano, fixado pelo calor e corado com determinados reagentes.                   
Assinale o item que contempla a ordem correta dos reagentes durante a reação.  
A) Cristal violeta, lugol, fucsina básica e etanol­acetona.  
B) Fucsina básica, cristal violeta, lugol e etanol­acetona.  
C) Cristal violeta, lugol, etanol­acetona e fucsina básica.  
D) Cristal violeta, fucsina básica, lugol e etanol­acetona.  
E) Fucsina básica, etanol­acetona, cristal violeta e lugol.  
 
27. A técnica de coloração de Gram está relacionada às características de cada                         
microrganismo específico. Baseado nessa técnica, é correto afirmar que:  
A) esta técnica permite somente a separação de amostras bacterianas em Gram                       
positivas.  
B) o corante cristal violeta pode ser substituído, com os mesmos resultados, pela                         
safranina. 
C) as bactérias Gram positivas e Gram negativas absorvem de maneira idêntica o                         
corante primário e o fixador.  
D) as bactérias Gram positivas não retêm o cristal violeta, após o tratamento com                           
etanol­acetona.  
E) o corante fucsina básica pode ser substituído com os mesmos resultados pelo                         
azul de metileno 
 
28. Um estagiário do laboratório de Microbiologia Clínica recebeu uma lâmina                     
contendo esfregaço de Escherichia coli e uma lâmina contendo esfregaço de                     
Staphylococcus aureus para serem coradas pela coloração de Gram (cristal violeta,                     
lugol, álcool, fucsina diluída). Após fixar os esfregaços pelo calor, o estagiário                       
realizou a coloração, porém inverteu a ordem da utilização dos corantes (fucsina,                       
álcool diluído, cristal violeta, lugol). Qual foi o resultado da coloração observado ao                         
microscópio para E. coli e S. aureus, respectivamente?  
(A) Bacilos violeta­escuro e cocos vermelho­claros.  
(B) Bacilos vermelho­claros e bacilos violeta­escuro.  
(C) Bacilos e cocos vermelho­claros.  
(D) Bacilos e cocos violeta­escuro.  
(E) Cocos vermelho­claros e cocos violeta­escuro. 
 
29. A sequência CORRETA na qual os corantes e reagentes são utilizados para a                           
realização de uma coloração de Gram é a da opção: 
A) Lugol, álcool, cristal violeta e safranina.  
B) Cristal violeta, lugol, álcool e safranina.  
C) Cristal violeta, safranina, álcool e lugol.  
D) Cristal violeta, álcool, lugol e safranina. 
 
30. Descreva um texto sobre a função dos reagentes para identificação de bactérias                         
Gram positivas e negativas (princípio do método), e comente a importância do                       
método de coloração de Gram para o laboratório de microbiologia. 
 
31. Ao fazer uma coloração de Gram, o técnico equivocou­se e esqueceu­se de                         
aplicar o mordente, o resultado esperado para a coloração de um micro­organismo                       
Gram positivo e um Gram negativo é respectivamente:  
A) Rosa e rosa.  
B) Violeta e rosa.  
C) Rosa e violeta.  
D) Violeta e violeta.  
E) Violeta e incolor 
 
32. A preparação de esfregaço a partir de uma cultura em caldo dispensa a                           
utilização de:  
A) Lâmina.  
B) Alça de platina.  
C) Bico de Bunsen.  
D) Salina fisiológica.  
E) Fixação do esfregaço

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