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Genética Molecular – 5 Período Aula 2 - Estrutura do DNA Prof. Manildo Marcião de Oliveira Características Estruturais do DNA A dupla hélice contém dois polinucleotídeos; As bases nitrogenadas estão empilhadas no interior da hélice; As bases dos dois polinucleotídeos interagem através de pontes (ligações) de hidrogênio; Ocorrem dez pares de bases por giro da hélice; Os dois filamentos da dupla hélice tem sentidos inversos; A dupla hélice possui dois sulcos diferentes; A dupla hélice possui giro para direita; Nucleotídeo Pentose Bases nitrogenadas Purinas Pirimidinas Diferentes tipos de DNA Crescimento da cadeia de nucleotídeos Interação entre bases nitrogenadas dos nucleotídeos Par de bases complementares do DNA Sulcos da cadeia de DNA PROPRIEDADES FÍSICAS E QUÍMICAS DO DNA Soluções de DNA, em pH = 7,0 e temperatura ambiente, são altamente viscosas; A altas temperaturas ou pH extremos o DNA sofre desnaturação, isto porque ocorre ruptura das pontes de hidrogênio entre os pares de bases. Esta desnaturação faz com que diminua a viscosidade da solução de DNA; Durante a desnaturação nenhuma ligação covalente é desfeita, ficando portanto as duas fitas de DNA separadas; Forças que mantém a estrutura Ligações covalentes Efeitos hidrofóbicos Forças de Van der Waals Ligações de hidrogênio Neutralização das cargas negativas do fosfato Mg +2 Quando o pH e a temperatura voltam ao normal, as duas fitas de DNA espontaneamente se enrolam formando novamente o DNA dupla fita. Este processo envolve duas etapas: A primeira é mais lenta pois envolve o encontro casual das fitas complementares de DNA, formando um curto segmento de dupla hélice. A segunda etapa é mais rápida e envolve a formação das pontes de hidrogênio entre as bases complementares reconstruindo a conformação tridimensional. Durante a desnaturação por temperatura, podemos obter a Tm da molécula de DNA que é a temperatura necessária para desnatura 50% da molécula de DNA. Supertorção do DNA Além da estrutura secundária da dupla-hélice, o DNA assume uma conformação tridimensional denominada supertorcida, superenrolada ou super-hélice; Esta estrutura é definida como o enrolamento da dupla-hélice sobre si mesma. Tipos de supertorção Quando o superenrolamento é gerado pelo desenrolamento da dupla-hélice, ele é dito superenrolamento negativo; Se antes de selar as duas fitas, elas forem acrescidas de giros na mesma direção da dupla-hélice, essa assumirá um superenrolamento positivo.