Avaliação I - Individual

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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:883916)
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Prova 74655484
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 7/3
Nota 7,00
A hibridização in situ foi elaborada com o objetivo de isolar e identificar fragmentos, através do 
anelamento entre duas fitas simples de origens distintas, sejam elas DNA ou RNA. Sobre essa técnica, 
associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Northen-blotting.
II- Southern-blotting.
III- Hibridização in situ.
( ) Técnica que utiliza sondas de ácidos nucleicos, com marcação química, no local em que a 
molécula de interesse deve ser encontrada (RNA dentro da célula, DNA específico em cromossomos). 
( ) Técnica que avalia padrões de sequências de nucleotídeos de genes do DNA e utiliza sondas de 
DNA molde, os quais são marcados com radiação ou quimicamente. 
( ) Nesta técnica, o RNA mensageiro (mRNA) é utilizado a fim de buscar comparar situações 
distintas, como, por exemplo, utilizar amostras controle como padrão para expressão do gene de 
interesse e, assim, comparar com a amostra de interesse. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - II - III.
B III - II - I.
C II - I - III.
D I - III - II.
O sequenciamento Shotgun, o qual é aplicado como estratégia para o sequenciamento de 
grandes sequências de nucleotídeos, especialmente genomas inteiros dos mais diversos organismos. 
Sobre o sequenciamento Shotgun, avalie as asserções a seguir e relação proposta entre elas:
I- Devido ao grande volume de informação gerado por esse procedimento, é necessário que 
programas computacionais sofisticados sejam utilizados para a determinação da sequência do material 
em estudo. 
PORQUE
II- Na técnica Shotgun, o material clonado é sequenciado diversas vezes, fornecendo uma quantidade 
de dados de cerca de 10 vezes o tamanho do material genético que está sendo estudado, assegurando 
que todos os nucleotídeos presentes no material genético sejam detectados e inseridos na sequência 
final do DNA. 
Assinale a alternativa CORRETA:
 VOLTAR
A+ Alterar modo de visualização
1
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A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
C As asserções I e II são proposições falsas.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática 
depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após a desnaturação 
(período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o 
momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia 
de um organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade de pares de 
base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre 
porque o par G-C é mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta 
apenas com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de 
hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão, outros fatores podem 
interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses fatores, analise as opções a seguir:
I- Temperatura de fusão.
II- pH alto para produzir condições de hibridização.
III- Concentração de cátions monovalentes.
IV- Presença de solventes orgânicos.
Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a opção II está correta.
B Somente a opção I está correta.
C Somente a opção III está correta.
D As opções I, II, III e IV estão corretas.
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Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da técnica. Em 
torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se obter milhares de cópias de 
DNA. Sobre os ciclos do PCR associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
( ) Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar.
( ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de cada uma das 
fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º C.
( ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, denominada 
como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - I - III.
B III - II - I.
C I - III - II.
D I - II - III.
Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se aplica dependendo 
da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas recentes, que são mais robustas e 
sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, ainda assim, demonstram um excelente resultado, 
apesar de serem mais complicadas e menos automatizadas. Sobre essas técnicas, associe os itens, 
utilizando o código a seguir:
I- Sequenciamento de Sanger. 
II- Next Generation Sequencing. 
III- Sequenciamento de terceira geração.
( ) Método de primeira geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de cadeia 
(ddNTP).
( ) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única molécula de DNA, 
sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo real.
( ) São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores de cadeia para o 
processamento das amostras.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A II - I - III.
B III - II - I.
C I - III - II.
D I - II - III.
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"A clonagem de genes possui variadas aplicações na área de pesquisa, por meio do conhecimento da 
organização de genomas, da sequência de genes e suas proteínas codificadas, da criação de bibliotecas 
de DNA e cDNA, além de produtos que beneficiam a sociedade, como a produção de enzimas 
industriais, produção de insulina humana, vacinas, hormônios de crescimento e melhoramento 
genético". Sobre as principais diferenças entre essas técnicas, destacando os objetivos de cada uma 
delas, analise as sentenças a seguir:
I- As Bibliotecas de DNA ou cDNA são grandes coleções de material genético mantidas em colônias 
de bactérias, nas quais um fragmento específico de DNA ou um gene podem ser procurados.
II- Uma biblioteca de DNA é formada por fragmentos originados a partir de um DNA genômico. Já 
uma biblioteca de cDNA é formada por sequências codificantes dos genes que estavam expressos na 
forma de mRNA em uma determinada amostra.
III- A formação das bibliotecas de DNA e cDNA permite que fragmentos clonados sejam mantidos e 
replicados por tempo indeterminado.
Assinale a alternativa CORRETA:
Fonte: CALEFFE, R. T. T.; OLIVEIRA, S. R.; FREITAS, A. C. O.; KIDO, K. K.; GARCIA, A.; 
PAMPHILE, J. A. Clonagem de genes: métodos e aplicações. Revista UNINGÁ, v. 47, p. 73-77, 
jan./mar. 2016. Disponível em: http://revista.uninga.br/index.php/uninga/article/view/1252/874. 
Acesso em: 5 fev. 2021.
A Somente a sentença I está correta.
B Somente a sentença III está correta.
C Somente a sentença II está correta.
D As sentenças I, II e III estão corretas.
Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o gene de um 
organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis mutações, cadeias de 
transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. De acordo com as técnicas 
empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as 
falsas:
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( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o método de 
Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com eletroforese. 
( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo 
adicionado à nova fita. 
( ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de 
sequenciamento que conhecemos atualmente,sendo a primeira geração de sequenciamento de DNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - F - V.
B V - V - F.
C V - F - V.
D V - F - F.
O gráfico a seguir ilustra uma curva de amplificação da PCR em tempo real. De acordo com a 
interpretação do gráfico, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct. 
( ) A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade de 
material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse. 
( ) A amostra B ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade 
intermediária de amostra, quando comparadas às amostras A e C. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - F - V.
B V - F - V.
C V - V - F.
D V - F - F.
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[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as 
amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e 
armazenadas em tubos, ambos “livres” de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse 
– nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou - 80 ºC). Todos os procedimentos 
devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de 
nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA 
identificado na prática, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Etapa de Lise.
II- Etapa de Ligação.
III- Etapa de Lavagem.
IV- Etapa de Eluição.
( ) Pipete 25 µl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 µl da amostra de sangue 
no mesmo tubo e, por último, pipete 200 µl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e 
homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min.
( ) Pipete 210 µl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, 
pipete 640 µl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto. 
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 µl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue 
novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem utilizará 600 µl do 
tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo 
de coleta e centrifugue novamente.
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 µl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e 
centrifugue a amostra.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A IV - III - II - I.
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B I - II - III - IV.
C I - II - IV - III.
D II - III - IV - I.
Para detecção do DNA em bibliotecas de DNA, uma membrana é colocada em contato com as 
colônias na placa logo após o crescimento das colônias bacterianas em placas de cultivo contendo 
meio sólido. Algumas células irão se aderir à membrana, formando uma impressão das colônias 
presentes na placa. Em seguida, as células aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar o DNA, que 
permanece aderido à membrana. Por fim, a membrana é incubada com sondas de hibridização 
marcadas, complementares à porção do gene de interesse, permitindo a visualização da posição dos 
clones que contêm o fragmento de interesse. Sobre a técnica exposta, assinale a alternativa 
CORRETA:
A Northen-blot.
B Hibridização in situ.
C Southern-blot.
D Hibridização em colônia.
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