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21/10/2016 1 Prof.: Me. Allysson Haide ENZIMAS Faculdade Maurício de Nassau Cursos de Biomedicina, Enfermagem, Farmácia e Fisioterapia Disciplina de Bioquímica 21/10/2016 2 O que será abordado sobre as enzimas? Introdução às enzimas Propriedades e classificação das enzimas Modelos de interação enzima/substrato Inibições enzimáticas e cinética enzimática Fatores que interferem na velocidade enzimática Enzimas 21/10/2016 3 INTRODUÇÃO 21/10/2016 4 Enzimas O milagre da vida é uma miríade de reações químicas ocorrendo simultaneamente na célula. Gasolina (hidrocarboneto) CO2 + H2O T = 2.200 ºC Glicose CO2 + H2O T = 37 ºC O segredo dos organismos vivos é a CATÁLISE. 21/10/2016 5 Enzimas Em que consiste a CATÁLISE? Sacarose Comidas e bebidas doces CO2 + H2O Energia livre Beber, andar, pensar e ver O2 As enzimas são catalisadores biológicos responsáveis pelo crescimento, restauração e manutenção de um organismo vivo. 21/10/2016 6 Enzimas Catalisadores São substâncias que aumentam a velocidade de uma reação química reduzindo seus requisitos energéticos. 21/10/2016 7 A maioria das enzimas consiste em proteínas Exceto um pequeno grupo de moléculas que catalisam o RNA • A atividade catalítica depende da integridade da conformação da proteína nativa • Se a proteína for clivada há a perda da atividade catalítica • Se a proteína for desnaturada, sua atividade catalítica usualmente é perdida Enzimas Características das enzimas proteícas Fatores que afetam a atividade das enzimas 21/10/2016 8 Enzimas Fatores que afetam a atividade das enzimas proteícas • Temperatura ― Quanto maior a temperatura, mais rápida será a reação ― Temperatura ótima consiste na melhor temperatura para o funcionamento de uma enzima (~ 40ºC) • pH ― Faixa ótima de pH ― Se o pH de um substrato é muito diferente do pH ótimo necessário para a enzima, ela não poderá funcionar pH ~ 2,0 para a pepsina pH ~ 8,2 para a tripsina 21/10/2016 9 Fatores que afetam a atividade das enzimas proteícas • Concentração das enzimas •Velocidade de transformação do S em P qtidade de E. •Recomenda-se: • Enzimas com alto grau de pureza; • Substratos puros; • Métodos de análise confiável. Enzimas 21/10/2016 10 Fatores que afetam a atividade das enzimas proteicas • Concentração dos substratos • [S] varia durante o curso da reação à medida que S é convertido em P. •Medir Vo = velocidade inicial da reação. vo [S] Vmax Enzimas 21/10/2016 11 Fatores que afetam a atividade das enzimas proteicas • Presença de Inibidores Inibidor é qualquer substância que reduz a velocidade de uma reação enzimática. Enzimas 21/10/2016 12 Fatores que afetam a atividade das enzimas proteicas Enzimas 21/10/2016 13 NOMENCLATURA E CLASSIFICAÇÃO 21/10/2016 14 Enzimas As enzimas são classificadas pelas reações que elas catalisam Tabela. Classificação internacional das enzimas Nº Classe Tipo de reação que catalisa 1 Oxidoredutases Transferência de elétrons 2 Transferases Reações de transferência de grupos funcionais 3 Hidrolases Reações de hidrólise 4 Liases Adição de grupos à ligações duplas ou remoção de dupla ligações pela remoção de grupos 5 Isomerases Transferência de grupos dentro das moléculas para produzir formas isoéricas 6 Ligases Formação de ligações C―C, C―S, C―O e C―N ATP + D-Glicose ADP + D-glicose 6 fosfato ATP:glicose fosfotransferase 21/10/2016 15 CINÉTICA ENZIMÁTICA 21/10/2016 16 Enzimas Modelos de interação enzima/substrato ES = Complexo enzima-substrato EP = Complexo enzima-produto As enzimas não são consumidas na reação 21/10/2016 17 As enzimas atuam em pequenas concentrações 1 molécula de Catalase decompõe 5 000 000 de moléculas de H2O2 pH = 6,8 em 1 min Número de renovação = n° de moléculas de substrato convertidas em produto por uma única molécula de enzima em uma dada unidade de tempo. Enzimas 21/10/2016 18 Enzimas Modelos de interação enzima/substrato Como as enzimas trabalham? Emil Fischer (1894): alto grau de especificidade das enzimas Koshland (1958): Encaixe Induzido 21/10/2016 19 ENZIMAS X CATALISADORES QUÍMICOS 21/10/2016 20 Característica Enzimas Catalisadores Químicos Especificidade ao substrato alta baixa Natureza da estrutura complexa simples Sensibilidade à T e pH alta baixa Condições de reação (T, P e pH) suaves drástica (geralmente) Custo de obtenção (isolamento e purificação) alto moderado Natureza do processo batelada contínuo Consumo de energia baixo alto Formação de subprodutos baixa alta Separação catalisador/ produtos difícil/cara simples Atividade Catalítica (temperatura ambiente) alta baixa Presença de cofatores sim não Estabilidade do preparado baixa alta Energia de Ativação baixa alta Velocidade de reação alta baixa
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