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NUTRIÇÃO, CULTIVO, DIVERSIDADE METABÓLICA E CRESCIMETO BACTERIANOS Bruno Francesco Rodrigues de Oliveira LAMAB – IPTSP/UFG AGORA EU SOU UMA BACTÉRIA!!! Naegleria fowleri NUTRIÇÃO MICROBIANA Parte da fisiologia microbiana que lida com os nutrientes necessários para o crescimento microbiano Mecanismo que fornece às células microbianas às ferramentas químicas necessárias para a síntese dos diversos monômeros Organismos diferentes necessidades nutricionais diferentes Macronutrientes: em grandes quantidades Micronutrientes: em menores quantidades Carbono (C) Principal macronutriente: (50%) do peso seco celular Fonte: compostos orgânicos (com C) Autótrofos: síntese de C a partir de CO2 Nitrogênio (N) 2º principal macronutriente: 13% do peso celular Constituintes de proteínas, ácidos nucleicos e etc. Formas disponíveis: Compostos inorgânicos: amônia (NH3) e nitrato (NO2) N2 (bactérias fixadoras de N) Outros macronutrientes Fósforo (P) Na forma de fosfato orgânico ou inorgânico Síntese de ácidos nucleicos e fosfolipídios Enxofre (S) Maior parte de fontes inorgânicas Papel estrutural nos aa cisteína e metionina Presente em várias vitaminas Potássio (K) Atividade enzimática (síntese proteica) Magnésio (Mg) Estabilização de ribossomos, membranas celulares de ácidos nucleicos e para atividade enzimática Cálcio (Ca) Auxílio na estabilização das paredes celulares e termoestabilidade de endósporos Sódio (Na) Necessidade como reflexo do habitat Ferro (Fe) Respiração Componente essencial dos citocromos e de proteínas com Fe e S necessárias para transporte de elétrons Sideróforos: captura de Fe 3+ em condições oxigênicas E. coli e S. typhimurium Bactérias marinhas Micronutrientes (Elementos Traços) Necessários em ínfimas quantidades Maioria metais = papel estrutural em enzimas Fatores de crescimento Compostos orgânicos necessários em pequenas quantidades Em alguns tipos celulares Vitaminas, aa, purinas e pirimidinas Alguns precisam estar pré-formados MEIOS DE CULTURA Soluções de nutrientes empregadas para promover o crescimento de micro-organismos em laboratório Tipos de meio de cultura Quimicamente definidos: Adição de compostos puros em quantidades precisas com água destilada Conhecimento da composição química exata do meio Complexos: Produtos de digestão de caseína, carne, soja, levedura ou outras substâncias altamente nutritivas (ainda que quimicamente indefinidas) Sem precisão quanto a concentração dos componentes Forma líquida = caldo nutriente; forma sólida = ágar nutriente Quem tem a maior capacidade biossintética? CULTIVO LABORATORIAL DE MICRO-ORGANISMOS Uma vez que o meio está PREPARADO, ele pode ser INCUBADO em condições que permitam o CRESCIMENTO microbiano CULTURA PURA: a que contém um único tipo de micro-organismos Evitar CONTAMINANTES, outros micro-organismos indesejáveis, para manter a cultura pura Empregos de meios sólidos (em PLACAS DE PETRI): manutenção e avaliação da pureza de culturas puras + ÁGAR Preservando culturas bacterianas Refrigeração: CURTO período de tempo Ultracongelamento: cultura pura suspensa em líquida e rapidamente congelada a – 50ºC a -95ºC; pode ser descongelada e cultivada por vários anos depois Liofilização: a suspensão microbiana é rapidamente congelada a – 54ºC a -72ºC; a água é removida a vácuo (sublimação) e o recipiente é selado; “pó microbiano” pode ser estocado por anos e reativado com hidratação (acréscimo em caldo nutriente adequado) DIVERSIDADE METABÓLICA Tipo Fonte de energia para o crescimento Fonte de carbono para o crescimento Exemplo de Gênero Fototrófico Fotolitotrófico (autotrófico) luz CO2 Chromatium Fotorganotrófico (heterotrófico) luz Compostos orgânicos Rhodopseudomonas Quimiotróficos Quimiolitotrofico (autotrófico) Oxidação de compostos inorgânicos CO2 Acidothiobacillus Quimiorganotrófico (heterotróficos) Oxidação de compostos orgânicos Compostos orgânicos Escherichia EFEITOS AMBIENTAIS SOBRE O CRESCIMENTO MICROBIANO Temperatura pH Pressão Osmótica Oxigênio Luz Temperatura Psicrófilas: entre 12 e 17°C Psicotolerantes: crescem a 0°C, mas otimamente entre 20°C - 40°C Mesófilas: entre 28 e 37°C Termófilas: entre 57 e 63°C Termófilas extremas (hipertermófilos): entre 83 e 87°C pH Ácidófilos: 1,8 a 5,0 Neutrófilos: 5 a 9,0 Alcalófilos: 9,0 a 11,0 Pressão Osmótica Oxigênio Aeróbias estritas: necessidade absoluta de oxigênio Microaerófilas: necessitam de oxigênio, mas não o toleram em alta concentração Facultativas: tanto na presença como auxência de oxigênio Anaeróbias aerotolerantes: não utilizam o oxigênio como aceptor final de elétrons Anaeróbias estritas: o oxigênio é letal a. AERÓBIOS OBRIGATÓRIOS: oxigênio penetra pouco no tubo crescimento apenas na superfície b. ANAERÓBIOS: crescem somente no fundo c. AERÓBIOS FACULTATIVOS: tanto na superfície quanto no fundo; crescimento melhor na superfície (respiração aeróbia) d. MICROAERÓFILOS: afastam da zona com + oxigênio e. ANAERÓBIOS AEROTOLERANTES: crescem em toda a extensão do tubo; pouco na superfície (fermentadores) Luz Para bactérias fotossintetizantes CRESCIMENTO BACTERIANO Aumento do número de células bacterianas + comum = FISSÃO BINÁRIA Crescimento populacional Taxa de crescimento: variação do número de células por unidade de tempo Geração: intervalo em que 1 célula origina 2 novas Tempo de geração: tempo para uma população dobrar de número Crescimento exponencial: padrão de aumento em que o número de células é duplicado a cada período de tempo Fases do crescimento bacteriano Fases do crescimento bacteriano Medidas do crescimento microbiano Medidas do crescimento microbiano Cada célula viável é capaz de formar uma colônia Medidas do crescimento microbiano UFC Unidade Formadora de Colônia Medidas do crescimento microbiano Figura 1 – Ciclo de vida de Streptomyces coelicolor. Fonte: ANGERT, E. R. Alternatives to binary fission in bacteria. Nature Reviews Microbiology, v. 3, n. 3, p. 214-224, 2005 (Adaptado). VIVÍPAROS?
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