VIROLOGIA HIV (RESUMO FÁCIL)

Prévia do material em texto

MANUAL TÉCNICO PARA O DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO HIV -
MINISTÉRIO DA SAÚDE. 
 Resumo: o genoma do HIV-1 é composto de duas cópias de RNA de cadeia 
simples, dentro da partícula do vírus existem as enzimas transcriptase reversa, 
integrase e protease que são envolvidas por uma rede proteica (p-24); uma 
camada mais externa (p-17) recobre a camada p24 e por fim a última camada 
chamada envelope recobre todo o vírus, sendo essa camada composta de 
lipídeos e das glicoproteínas GP41(mais interna) e GP120(mais externa). São 
as glicoproteínas GP41 e GP120 que entraram em contato com a células do 
hospedeiro. 
 Como o HIV infecta as células humanas? 
Resposta: o vírus do HIV tem compatibilidade com as células CD4, macrófagos 
e células dendríticas, podendo adentrar tais células e as infectar, diminuindo o 
seu número no organismo. As glicoproteínas GP120 e GP41 se ligam ao 
receptor CD4 da célula, o envelope viral se liga a membrana celular e o cerne 
viral é liberado no interior da célula; no citoplasma, o cerne viral se desfaz 
liberando as fitas de RNA e as enzimas transcriptase reversa, integrase e 
1
protease; a transcriptase reversa copia o RNA viral e cria uma fita de DNA e em 
seguida uma molécula de DNA dupla fita; a integrase se combina ao DNA 
direcionando o conjunto ao núcleo celular; no núcleo a integrase incorpora a 
molécula viral ao DNA da célula hospedeira; assim o DNA viral será transcrito e 
enviado ao citoplasma da célula formando novos vírus que podem infectar 
novas células. 
 Antígenos (ag) e anticorpos (ac) circulantes: a janela diagnóstica é o 
período onde não há teste que detecte o vírus no hospedeiro seja por meio de 
anticorpos ou RNA viral, já o termo janela imunológica significa o tempo onde 
não há presença de anticorpos contra o vírus detectáveis em testes. O primeiro 
marcador que pode ser detectado é o RNA viral (12 dias da infecção em média), 
seguido da proteína P24 (15 dias em média); a fase aguda da doença (IgM) 
pode ser detectada a partir da terceira semana e a fase crônica (IgG) a partir de 
um mês do contato com o agente viral. 
 Estrutura do HIV: o HIV é uma partícula esférica de 100 a 120nm de 
diâmetro, pertence ao gênero Lentivirinae e família Retroviridae, apresenta em 
seu núcleo duas cópias de RNA de cadeia simples, encapsuladas por uma 
camada proteica (capsídeo) e um envelope externo composto por uma 
bicamada fosfolipídica. 
 Infecção e resposta imunológica contra o HIV: a maioria das infecções por 
HIV-1 ocorrem por contato sexual, onde o HIV e células infectadas atravessam a 
barreira da mucosa; o pico da viremia ocorre entre 21 e 28 dias do contato, 
onde há baixa de linfócitos CD4; o aumento de anticorpos no organismo 
contribui para que o vírus não colonize novas células e a resposta específica 
mediada por CD8 contribui na destruição de células infectadas; a resposta 
imunológica humoral é induzida pelas glicoproteínas imunogênicas do envelope 
(GP120 e GP41) e do capsídeo viral (P24); os níveis de IgG podem atingir altos 
níveis por anos enquanto os níveis de IgM vão diminuindo gradativamente.
 Imunoensaio(IE) de triagem: Primeira geração: o imunoensaio indireto 
2
busca a presença de anticorpos específicos a partir de um conjugado 
constituído por um anticorpo anti-IgG humana; na fase sólida, os antígenos são 
originados de um lisado viral de HIV; esses antígenos são obtidos por cultura do 
HIV, que serão purificadas; o ensaio tem pouca especificidade pois detecta 
apenas IgG e são menos sensíveis, pois possuem uma janela de soroconversão 
de 6 a 8 semanas; esse método tem perdido espaço para outros mais 
qualificados./ Segunda geração: também é um imunoensaio indireto, porém 
utiliza-se de antígenos recombinantes ou peptídeos sintéticos derivados de 
proteínas do HIV; o ensaio ganha maior especificidade e sensibilidade por 
conter epítopos imunodominantes que são alvos preferenciais da resposta 
imune humoral; a janela de soroconversão do teste varia de 28 a 30 dias.
terceira geração: o ensaio tem formato imunométrico que utiliza-se de 
antígenos recombinantes ou peptídeos sintéticos; o teste permite detectar tanto 
anticorpos IgG quanto IgM; o ensaio é mais sensível e específico que ao das 
gerações anteriores e a janela de soroconversão é de 22 a 25 dias./Quarta 
geração: o ensaio detecta o antígeno P24 e os anticorpos específicos anti-HIV; 
o teste detecta todas as imunoglobulinas contra proteínas derivadas da GP41, 
GP120 e GP160; o componente de detecção da P24 é constituído de anticorpo 
monoclonal na fase sólida e de um conjudado de um antissoro (anticorpo) 
poliespecífico contra a proteína P24; a janela diagnóstica é de 
aproximadamente 15 dias.
 Testes rápidos: são imunoensaios simples que podem ser realizados em 
menos de 30 minutos e fora de laboratórios. Os testes podem ser realizados 
com fluido oral, sangue, soro e plasma.
3
 Ensaios complementares: como os testes de imunoensaio e teste rápido 
podem evidenciar resultados falso-positivo, testes adicionais são utilizados para 
garantir a qualidade do diagnóstico, os métodos empregados são o Western 
blot, Imunoblot e imunofluorescência indireta; o Western blot e o Imunoblot 
utilizam tiras de membrana com proteínas nativas do HIV que são separadas 
por eletroforese ou por proteínas recombinantes como no caso do Imunoblot; 
para confirmar o Western blot reagente, o teste deve ser positivo para pelo 
menos duas das seguintes proteínas: p24, gp41, gp120 e gp160. 
 Diagnóstico por amplificação de ácidos nucleicos (NAT): a infecção pelo 
HIV pode ser diagnosticada de forma direta, detectando os componentes virais 
antígeno p24, RNA ou DNA pró viral; são especialmente úteis no diagnóstico de 
crianças com menos de 18 meses e em adultos com HIV em fase aguda; a 
detecção molecular do ácido nucleico é mais sensível que a detecção do 
antígeno p24; o teste NAT é muito utilizado na triagem de doadores de sangue, 
aumentando a segurança dos hemocomponentes e hemoderivados. 
4
 
5