CQ Microbiologia para disciplina de estágio

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DISCIPLINA DE ESTÁGIO SUPERVISIONADO
CONTROLE DE QUALIDADE 
EM MICROBIOLOGIA
Dra. Helena Homem de Mello de Souza
UFPR – NEWPROV - NEBaC
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CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
 PROGRAMAS DE CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
	Finalidade: garantia da informação
acurácia
confiabilidade
reprodutibilidade
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CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
 PROGRAMAS DE CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
	Finalidade é atingida:
avaliação da qualidade das amostras
teste de desempenho de procedimentos, reagentes, meios, equipamentos e pessoal
revisão dos resultados dos exames
documentação da validação dos métodos
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CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
 PROGRAMAS DE CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
	Parâmetros gerais:
coleta e transporte de amostras
 (critérios de aceitabilidade)
manual de procedimentos (POPs)
pessoal (cursos de administração e reuniões)
documentação do CQ (registros)
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CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
 PROGRAMAS DE CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
	Parâmetros gerais (cont.):
resultados de exames (detecção de erros)
laboratórios de referência
participação em programa externo de controle de qualidade
programa interno de CQ
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CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
 PROGRAMAS DE CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
	Parâmetros específicos:
desempenho de instrumentos e equipamentos (manutenção preventiva)
CQ de meios de cultura
CQ de reagentes, corantes e anti-soros
CQ de kits comerciais
CQ do teste de suscetibilidade
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CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
 PROGRAMAS DE CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
	Seleção de métodos:
presença ou ausência da doença
 Validação dos métodos:
documentação da performance dos testes
comparabilidade de métodos
determinação da S, E, VPP, VPN e acurácia
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	Meios de cultura – apresentações:
Em placas e frascos
Em tubos
Kits e mini-kits
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	Meios de cultura – tipos:
de uso geral
seletivos, diferenciais, ou ambos
de enriquecimento
de transporte
para identificação bacteriana
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	Meios de cultura – obrigatoriedade:
Esterilidade
Capacidade de crescimento ou inibição de certos microrganismos
Respostas bioquímicas apropriadas
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	Fatores que afetam a qualidade:
Pesagem incorreta
Deterioração de materiais secos
Qualidade da água
Vidraria mal limpa
Dissolução incompleta 
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	Fatores que afetam a qualidade:
Superaquecimento
pH inadequado
Adição de suplementos
Ausência de programa de controle de qualidade do produto final
Estocagem inadequada
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	
Registros – ficha de produção:
Quantidade preparada
Origem dos ingredientes
Número do lote
Método de esterilização
Data de preparo
pH
Data de validade
Nome do “manufaturador”
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	
Etapas do procedimento:
Ingredientes “avulsos”
Meios desidratados
Meios preparados
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	
Ingredientes “avulsos” e meios desidratados:
Cada novo lote de meio-base ou reagente é testado em paralelo com um lote aprovado antes de ser liberado para uso
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	 
Meios preparados - Características verificadas:
Cor
Consistência
Profundidade ou inclinação do “pico de flauta”
Homogeneidade
Hemólise
Excesso de bolhas
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
Meios preparados - teste de esterilidade:
Amostragem:
		- 5% para lotes de até 100 unidades
		- 10 unidades para lotes maiores
Incubação:
		- 48h à tempª indicada para uso
		- 48h à tempª ambiente
	
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	 
Meios preparados – Teste de função:
Cada lote de meio preparado é testado com microrganismos selecionados para confirmar:
		- crescimento
		- seletividade
		- enriquecimento
		- resposta bioquímica
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	 
Microrganismos selecionados para testes de função/desempenho:
Cepas – padrão estabilizadas
Propriedades fisiológicas e bioquímicas conhecidas
Resultados previsíveis e reprodutíveis
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	 
Fontes de cepas – padrão:
Internacionais (USA):
	ATCC – American Type Culture Collection
Nacionais (Rio de Janeiro):
	INCQS – Fundação Oswaldo Cruz
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	 
Cepas – padrão:
Apresentação: liofilizadas
				discos de gelatina
				“culti-loops”
Conservação: congeladas (meio c/ glicerol)
				ágar tríptico de soja
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE MEIOS DE CULTURA
	 
Métodos de inoculação:
Propriedades nutritivas: 104 ou 103
Propriedades seletivas: 105
Meios líquidos: 106
Meios bioquímicos: de acordo com o uso
Meios de transporte: swab/108/tempo máx.
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Teste de função do ágar-sangue
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 Teste de função do ágar CLED
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Teste do ágar Mueller Hinton
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
CONTROLE DE QUALIDADE DE COLORAÇÕES
	Coloração de Gram:
Controle-positivo: S. aureus ATCC 25923
Controle-negativo: E. coli ATCC 25922
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DE COLORAÇÕES
	Coloração de Ziehl-Neelsen:
Controle-positivo: M. tuberculosis
Controle-negativo: E. coli ATCC 
 25922 
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
CONTROLE DE QUALIDADE DE COLORAÇÕES
	Técnica de confecção dos esfregaços:
1.	Fazer suspensão das bactérias-teste conforme escala 0,5 Mac Farland.
2.	Fazer 2 esfregaços na mesma lâmina: um da bactéria controle-positivo e o outro da bactéria controle-negativo, com alça 1:1000.
3.	Corar como de rotina.
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DOS TESTES DE SUSCETIBILIDADE:
	Finalidade: monitoração
precisão e acurácia do teste
desempenho dos reagentes
desempenho das pessoas que executam o teste e lêem os resultados
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA
CONTROLE DE QUALIDADE DOS TESTES DE SUSCETIBILIDADE:
	Método: teste de cepas de referência
mínimas recomendadas:
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Escherichia coli ATCC 25922
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Staphylococcus aureus ATCC 25922
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 CONTROLE DE QUALIDADE EM MICROBIOLOGIA 
CONTROLE DE QUALIDADE DOS TESTES DE SUSCETIBILIDADE:
Limites aceitáveis de diâmetros de halos de inibição para cada cepa de controle
Freqüência do teste de CQ: diário/semanal
Ações corretivas