Mycobacterium: Características e Diagnóstico

Prévia do material em texto

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA 
INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE 
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS DA BIOINTERAÇÃO 
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA IV 
- 2013 - 
 Mais de 20.000 anos... 
 Pré-história: 
 Domesticação dos animais 
 Primeiras civilizações: Egito, Índia, Grécia, China 
 
 Séc. XVIII e XIX: “Peste branca” 
 25% das mortes dos adultos na Europa 
 
La miseria (Cristobal Rojas, 1886). 
 24 de março de 1882: Robert Koch 
 
 Atualmente: ainda um grave problema 
 Morte de 10 milhões de pessoas/ano 
 1/3 da população mundial portadora 
 
Países onde 80% dos casos de tuberculose humana estão concentrados. Fonte: OMS (2007) 
 Reino: Bacteria 
 Filo: Actinobacteria 
 Classe: Actinobacteria 
 Ordem: Actinomycetales 
 Família: Mycobacteriaceae 
 Gênero: Mycobacterium 
 
 Mais de 50 espécies 
 M. tuberculosis, M. leprae, M. bovis, M. avium, M. avium 
subespécie paratuberculosis 
 Grupo CMN: 
Mycobacterium, 
Nocardia, Rhodococcus 
e Corynebacterium 
 
 Organização específica 
de parede celular 
 Grande concentração de 
C + G no DNA 
Árvore filogenética do grupo CMN. Adaptado de <http://www.bacterialphylogeny.info/groupspecific/actinobacteria/actino_evotree.pdf> 
 
 Complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT) 
 M.tuberculosis 
 M.bovis 
 M.africanum 
 M. canetti 
 M. microti 
 
 Complexo Mycobacterium avium (MAC) 
 M. avium 
 M. intracellulare 
 M. colombiense 
 M. chimaera 
 Morfológicas: 
 Bacilos curtos (0,5-0,7μm x 0,3μm) 
 Imóveis 
 Não capsulados 
 Não flagelados 
 Não esporulam 
 Crescimento: 
 Lento 
 E. coli – 20 minutos 
 M. bovis - 15 horas 
 M. avium – 10 horas 
 Exigente (Lowenstein-Jensen) 
 Aeróbio estrito 
 Temperatura: 
▪ Mamíferos: 33-39ºc 
▪ Aviário: 25-45ºC 
 Colônias: 
▪ Mamíferos: irregulares e fiáveis 
▪ Aviário: arredondadas 
 Micobactérias não tuberculosas: pigmentos carotenóides e dependência de luz 
M. tuberculoisis 
M. avium 
Micobactéria fotocromógena 
 Tintoriais: 
 Gram positivos do ponto de vista citoquímico 
 Bacilos Álcool Ácido Resistentes (BAAR) 
▪ Resistência à descoloração com etanol + 3% HCl 
▪ Coloração de Ziehl-Neelsen 
▪ Corantes fluorescentes (auramina-rodamina) 
 Parede celular: peptideoglicanos e lipídios complexos 
1) Lipídeos externos 
2) Ácidos micólicos 
3) Polissacarídeo 
- arabinogalactan 
4) Peptídeoglicano 
5) M. Plasmática 
6) LAM 
7) Manosídio de fosfatidilinositol 
8) PAREDE CELULAR 
 
 Fatores de virulência: 
 
 Componentes de parede celular relacionados: 
 
▪ Ácidos micólicos 
▪ Fator Corda 
 
▪ Lipoarabinomanano (LAM) 
 Fatores de virulência: 
 
 Proteína de 19 kDa 
 
 Proteínas de estresse oxidativo 
 
 Moléculas de Adesão 
▪ HBHA (adesina hemoaglutinante ligante de heparina) – liga à células não fagocíticas 
▪ Pili (M. tuberculosis) 
 
 Não secretam toxinas!!! 
Produção de pili por cepas de M. tuberculosis. Adaptado Alteri, et al. 
Mycobacterium tuberculosis produces pili during human 
infection. PNAS, v. 104, n. 12, p. 5145-50, 2007 
 
 Reservatórios: 
 M. tuberculosis: humanos 
 M. bovis: bovinos 
 M. avium: aves 
 
 Transmissão: 
 Inalação 
 Ingestão 
 Rara infecção intra-uterina em 
bezerros 
 Transmissão: 
 M. bovis: zoonose – doença ocupacional 
 M. tuberculosis: cães e gatos também merecem cuidado! 
Adaptado de: DHEDA, K.; SCHWANDER, S. K.; ZHU, B.; ZYL-SMIT, R. N.; ZHANG, Y. The immunology of tuberculosis: from bench to bedside. 
Respirology, v.15, n. 3, p. 433-50, 2010. 
 
Exposição à bactéria 
Infecção pelos testes de 
imunodiagnóstico 
Tuberculose latente Doença clínica ou 
subclínica 
Contaminados 
Re-infecção 
Uma proporção de indivíduos 
expostos resolvem a infecção 
através: 
(i) Imunidade Inata 
(ii) Imunidade Adaptativa 
 Componentes de parede: impedem a fusão do fagolisossoma 
 Proliferação 
intracelular 
 
 Formação do 
granuloma 
M. bovis – macrófagos, neutrófilos 
- Entrada 
- Replicação 
Células T (CD4+, CD8+ T) 
- IFN-g 
- TNF 
 
 
Infecção micobacteriana 
- Granulomas (macrófagos, linfócitos T e 
B, células dendríticas, neutrófilos, 
fibroblastos e componentes da matriz 
extracelular). 
- Necrose caseosa 
 Bovinos 
 M. bovis e M. avium 
 Equinos 
 M. avium > M. bovis 
 Suínos 
 M. bovis, M. avium 
 Ovinos e caprinos 
 M. bovis 
 Cães e gatos 
 M. bovis, M. tuberculosis 
 Aves 
 M. avium, M. bovis 
 Primatas 
 M. bovis, M. tuberculosis 
 M. avium (imunocomprometidos) 
 Amostras: lavados, secreções, tecidos 
 Microscopia: pesquisa dos BAAR 
 Cultura bacteriana: exigências, morfologia colonial, provas bioquímicas 
 Imunodiagnóstico 
 Teste da Tuberculina (Tuberculinização) 
▪ Teste alérgico cutâneo 
▪ PPD (Purified Protein Derivative – Derivado Protéico Purificado) 
 
 Imunodiagnóstico 
 Teste da Tuberculina (Tuberculinização) 
▪ Teste cervical simples (TCS): positivos ≥ 4,0mm 
Tricotomia Medida da espessura da 
pele com cutímetro (mm) 
Inoculação de PPD 
bovina 
Leitura do resultado 
(cutímetro) 
 Imunodiagnóstico 
 Teste da Tuberculina (Tuberculinização) 
▪ Teste da prega caudal (TPC): positivos = qualquer aumento 
Inoculação de PPD bovina em uma 
das pregas da cauda 
Comparação de aumento de 
espessura com a prega oposta 
(visual e palpação) 
 Imunodiagnóstico 
 Teste da Tuberculina (Tuberculinização) 
▪ Teste cervical comparativo (TCC): TCS e TPC 
▪ Positivos: (∆B - ∆A) ≥ 4,0mm 
Tricotomia Medida da espessura 
da pele 
1- Inoculação de PPD aviária 
2- Inoculação de PPD bovina 
Leitura (cutímetro) 
 Biologia molecular: PCR 
 
 
 Anatomopatológico  lesões para histopatologia 
 Animais: não existe!!! 
 Descarte dos animais 
 Incineração das carcaças 
 Notificação obrigatória 
 
 Humanos: 
 Mínimo de 6 meses 
 1ª escolha: Estreptomicina, Isoniazida (INH), Etambutol, Rifampicina 
 2ª escolha: Pirazinamida, Ácido Para-Aminossalicítico, Canamicina, 
Ciclosserina, Capreomicina e Etionamida 
 
 
 
 Isolamento dos suspeitos 
 Abate dos positivos 
 Desinfecção 
 Consumo de leite pasteurizado 
 Consumo de carne inspecionada 
 Vacinação: 
 Humanos: BCG (Bacillus Calmette-Guérin) 
▪ Vacina viva atenuada 
▪ M. bovis 
 Animais: sem vacina