reação do biureto

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 b) Reação do biureto
 Biureto é o nome dado à estrutura originada a partir da decomposição da uréia, quando essa é submetida a uma
temperatura de, aproximadamente, 180oC:
 Soluções alcalinas que contenham biureto desenvolvem uma coloração violeta, quando em presença de sulfato de
cobre (CUSO4). Esse fenômeno deve-se à formação de um complexo entre o íon Cu2+ e os átomos de nitrogênio
presentes na molécula do biureto. O esquema abaixo representa um modelo da formação desse complexo:
Interação biureto / Cu2+
Se fizermos uma boa observação, veremos que as ligações
existentes na molécula de biureto são muito parecidas com as
ligações peptídicas estabelecidas entre os aminoácidos
durante a formação de peptídeos e, finalmente, das proteínas.
Observe o esquema abaixo, que representa a interação entre
as ligações peptídicas de uma proteína ou peptídeo com íons
Cu2+:
 Assim, a reação de peptídeos e proteínas com o sulfato
de cobre recebeu o nome de Teste do Biureto, e é utilizada
para pesquisa de ligações peptídicas.
Interação ligação peptídica / Cu2+
 a.1. Material
 a) Reagentes e soluções
 - reagente de biureto *
 - solução de ovoalbumina 2%
 - solução de glicina 0,1%
 - solução de cistina 1%
 - água destilada
 - solução de amostra desconhecida
 b) Vidraria e instrumental
 
          
 - 05 tubos de ensaio
 - pipetas de 2 mL (plásticas ou de vidro)
 - conta-gotas ou pipeta Pasteur
 
 * Preparo do reagente de biureto: dissolva 1,5g de sulfato de cobre (CuSO4 . 5H2O) e 6,0g de tartarato duplo de
sódio e potássio (KNaC4H4O6 . 4H2O) em 500 mL de água destilada. Adicione, sob agitação constante, 300 mL de
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Veja as fotos desse experimento
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solução de NaOH 10%. Adicione 1g de iodeto de potássio (KI). Complete o volume para 1L com água destilada e
guarde o reagente em frasco âmbar. Esse reagente conserva-se por tempo indefinido.
 a.2. Procedimento
 1. Numerar os tubos de ensaio e preparar a seguinte bateria:
 (1) 2 mL da solução de ovoalbumina 2%
 (2) 2 mL da solução de glicina 0,1%
 (3) 2 mL da solução de cistina 1%
 (4) 2 mL de água destilada
 (5) 2 mL de amostra
 2. A cada tubo de ensaio adicione,gota a gota, o reagente de
biureto;
 3. agite os tubos;
 4. observe e anote os resultados.
 O aparecimento de coloração violeta indica que os íons Cu2+ provenientes do CuSO4 formaram complexo com
ligações peptídicas presentes na amostra, indica que se trata de uma proteína ou peptídeo.
 3.2. Reações para aminoácidos sulfurados
 O enxofre está presente como constituinte de aminoácidos como cistina, cisteína (que é, na verdade, um duplo
aminoácido) e metionina. Comparativamente, o enxofre da metionina apresenta-se mais estável do que nas
moléculas de cistina ou cisteína. Por esse motivo, nem todas as reações de detecção de enxofre são aplicáveis a
todos esses aminoácidos.
  a) Reação do acetato de chumbo em meio alcalino
 O enxofre, presente em moléculas de alguns aminoácidos, é convertido a sulfeto por ação de bases e do calor.
Esse, por sua vez, pode ser detectado com a adição de um sal de chumbo: forma-se sulfeto de chumbo, composto de
coloração escura.
 a.1. Material
 a) Reagentes e soluções
 - solução de hidróxido de sódio (NaOH) 40%
 - solução de acetato de chumbo [Pb(C2H3O2)2.3(H2O)] 10%
 - solução de ovoalbumina 2%
 - solução de tirosina 1% 
 - solução de cisteína 1%
 - solução de cistina 1%
 - água destilada
 - solução de amostra desconhecida
 
 b) Vidraria e instrumental
 
          
 - 6 tubos de ensaio
 - pipetas de 5 mL plásticas ou de vidro
 - conta-gotas
 a.2. Procedimento
 1. Numerar os tubos de ensaio e preparar a seguinte bateria:
 (1) 2 mL da solução de ovoalbumina 2%
 (2) 2 mL da solução de tirosina 1%
 (3) 2 mL da solução de cisteína 1%
 (4) 2 mL da solução de cistina 1%
 (5) 2 mL de água destilada
 (6) 2 mL de amostra
 2. A cada tubo de ensaio,adicionar 3 mL da solução de NaOH
40%;
 3. junte 5 gotas da solução de acetato de chumbo;
 4. ferva por 6 minutos em banho-maria;
 5. observe e anote os resultados.
SUGESTÃO: goteje solução de ácido clorídrico e note o odor característico exalado da solução. Como você explicaria
esses fenômeno?
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