Familia Enterobacteriaceae

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Família Enterobacteriaceae 
Introdução
Características Bioquímicas:
	*Fermentação da Glicose 
	*Ausência da citocromo oxidase 
	*Redução de nitrato a nitrito
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Cadeia respiratória simplificada das bactérias oxidase positivas e negativas 
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 Detecção da enzima Citocromo–oxidase 
Cultura- 24 horas de incubação 
Reativo = Cloridrato de tetrametil para-fenilenodiamina 
 Referência http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Reação positiva 
Reação negativa 
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Reação de Redução de Nitratos a Nitritos 
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Reação de Redução de Nitratos a Nitritos 
Continuação 
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Reação de Redução de Nitratos a Nitritos 
Reação positiva 
Reação positiva depois da reação com o zinco 
 Referência http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
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Características bioquímicas diferenciais de membros da família Enterobacteriaceae
*Fermentação da Lactose 
*Determinação da lisina descarboxilase 
*Determinação da ornitina descarboxilase 
*Determinação da arginina di-hidrolase 
*Utilização de citrato como fonte de carbono
*Produção de Urease 
*Produção do H2S
*Produção de Indol
*Reação do vermelho de metila 
*Reação de Voges-Proskauer= Produção do acetil metil carbinol 
*Motilidade 
*Atividade da ortonitrofenil-galactosidase
*Produção de fenilalanina desaminase 
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Penetração da lactose na célula bacteriana 
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Reação positiva para a lactose 
Microrganismos semeados em meio Mac Conkey 
Referência http://www.mc.maricopa.edu/~johnson/labtools/Dbiochem/3mac.jpg
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As descarboxilases
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As descarboxilases e o sistema arginina dihidrolase
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As descarboxilases e o sistema arginina dihidrolase
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As descarboxilases
* Cultura do microrganismo – 18- 24 horas 
* Meio contendo o aminoácido: Lisina, ornitina ou arginina 
* Indicador Púrpura do Bromocresol
* Fonte de carbono = Glicose
* Incubação num ambiente de anaerobiose 
Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
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Provas bioquímicas de identificação
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Provas bioquímicas de identificação bacteriana 
 Meio de citrato de Simmons 
Meio Ureia de Chistensem
Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
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Produção do Indol 
Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
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Atividade da orto-nitrofenil-beta-D-galactopiranosidase 
http://biology.clc.uc.edu/fankhauser/Labs/Cell_Biology/Lactase_pH_Optimum/pH_Optimum.htm
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FERMENTAÇÃO DA GLICOSE 
GLICOSE 
ÁCIDO PIRÚVICO 
ACETIL METIL CARBINOL 
BUTILENOGLICOL
COMPOSTOS
 DIACETILADOS 
COMPLEXO VERMELHO 
Prova Voges-Proskauer
Positiva 
FERMENTAÇÃO 
ÁCIDO-MISTA
REAÇÃO
 POSITIVA PARA O 
VERMELHO DE METILA 
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Reação de Voges-Proskauer 
Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
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Diferentes produtos de reações de desaminação 
Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
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Prova para verificação de motilidade
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TSI Triple Sugar Iron 
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Reação de diferentes gêneros bacterianos no meio TSI
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Referencia : http://users.stlcc.edu/kkiser/biochem.html
Meio de Lisina Ferro Ágar - LIA
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Familia Enterobacteriaceae 
Tribo I : ESCHERICHIEAE
	Genero: Escherichia 
		Shigella- Grupos A,B,C
		Shigella sonnei
Tribo II: EDWARDSIELLEAE
	Genero : Edwardisiella
Tribo III: SALMONELLEAE
	Genero: Salmonella
Tribo IV: CITROBACTEREAE
	Generos: Citrobacter
		Citrobacter freundii
		Citrobacter koseri
Tribo V: KLEBSIELLEAE
	Generos: Klebsiella
	 	 Enterobacter
		 Hafnia, Pantoae, Serratia 
Tribo V: PROTEAE
	Genero: Proteus 
		Morganella
		Providencia 
Tribo VI: YERSINEAE 
	Genero: Yersinia 
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Reações-Chave que devem ser lembradas para a identificação de membros da família Enterobacteriaceae 
 
Reação positiva para sulfeto de Hidrogênio 
	Edwardisiella tarda
	Espécies de Salmonella
	Citrobacter feundii
	Proteus vulgaris
	Proteus mirabilis 
Reação positiva de Voges Proskauer 
	Espécies de Klebisiella
	Espécies de Enterobacter
	Espécies de Hafnia 
	Espécies de Pantoae 
	Espécies de Serratia 
Reação positiva para a desaminação da fenilalanina
	Espécies de Proteus 
	Espécies de Providencia 
	Espécies de Morganella 
Reação positiva para a motilidade 
	Espécies de Shigella
	Espécie de Yersinia 
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Tribo Edwardsielleae
Gênero Edwardisiella 
Espécie tipo Edwardsiella tarda 
Cultura de três biotipos de E. tarda 
Edwardsiella tarda- Isolado de animais de sangue frio: reptéis,peixes de aquário etc.
Caracteristicas bioquímicas 
 * Produtora de sulfeto de hidrogênio
 * Não fermenta a lactose 
 * Distingue-se da Salmonella por ser indol positivo
Patogenicidade – Infecções do trato gastrintestinal, abscesso e feridas associadas a traumas ou acidentes em ambientes aquáticos 
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Tribo Citrobactereae
 É Composto pelo gênero Citrobacter e 11 espécies.
 Espécies associadas as infecções são: 
Citrobacter feundii- mais comum das espécies – Isoladas de todos os sítios corpóreos, exceto fezes.
Citrobacter koseri- Fezes, abscessos cerebrais, Trato urinário e respiratório, meningite 
 Características Bioquímicas: 
Diferenciação entre Citrobacter feundii e outras citrobactérias é a produção de sulfeto de hidrogênio.
Principais diferenças entre Citrobacter e Salmonella são: 
* Ausência da lisina descarboxilase e hidrólise do ONPG 
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Tribo Klebsielleae
* Inclui 5 gêneros : 
	Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Pantoae
Gênero Klebsiella 
Descrito pela 1ª vez por – Edwin Klebs 
Carl Friedlander- Pneumonia 
Espécie tipo deste gênero K. pneunoniae 
Habitat- Natureza, trato gastrintestinal de humanos e animais
*Características morfológicas: 
 Colônias grandes e mucoides 
 Fermentam a lactose = difusão do pigmento e produção de ácidos. 
Klebsiella pneumoniae 
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Cuidado! Nem todas as cepas de Klebsiella são mucoides. 
Características bioquímica do gênero Klebsiella 
	* São imóveis;
	* ausência para a ornitina descarboxilase- Exceto para a K. ornithinolytica ;
	* Indol negativas 
	* LDC positiva,
	* Hidrolisam lentamente a uréia.
Klebsiella pneumoniae
 * 1 a 6 % dos seres humanos normais possuem nas vias aéreas superiores e no trato gastrintestinal.
* Pacientes imuno comprometidos, diabetes, doença pulmonar crônica, alcoolismo --------- Pneumonia 
 * 0,5 a 5% Pneumonias primárias são devido a Klebsiella pneumoniae que é caracterizada por uma necrose extensa, hemorragia, escarro espesso, mucoide e de coloração vermelha 
Infecções extra-pulmonares 
 Meningites, enterites, infecções urinárias e septicemias
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Outras espécies: K. oxytoca , K. ozaenae, K. rhrinoscleromatis
 K. oxytoca 
	* Patologia semelhante a K pneumoniae 
	* Menos frequente 
	* São naturalmente resistente à ampicilina e carbenicilina 
 K. ozaenae
	 * Rinite atrófica, 
	 * Infecções purulentas das membranas da mucosa nasal 
	* fezes, sangue 
K. rhrinoscleromatis
	* Infecção da mucosa respiratória( orofaringe , do nariz, e dos seios paranasais) 
Klebsiella planticola
	* Perfil semelhante as outras klebsielas, exceto para o indol que pode ser variável conforme a cepa e assimilação de metahidroxibenzoato e etanolamina.
	* Na França 8,3% das klebsielas isoladas de infecções nosocomiais ;
	* No Japão 18,5% isoladas de fezes, urina, vias respiratórias, sangue e cateteres. 
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Klebsiella Ornithinolytica 
	*Descrita em 1989 
	* Era um grupo dentro K. oxytoca que descarboxilam a ornitina 
	* Elas são LDC,ODC e indol positivas, características semelhantes ao Enterobacter 
	* Isoladas da garganta, escarro, urina, sangue, pus e fezes e principalmente de alimentos. 
Klebsiella -------- Plasmídio que codifica beta-lactamase de amplo espectro EBLS. 
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Gênero Enterobacter 
* Este gênero possui 16 espécies
 4 não são patogênicas para o homem
	* E. intermedius 
	* E. dissolvens 
	* E. nimipressuralis
	* E. pyrinus
* Mais comuns, participa da microbiota entérica 
	 * E. aerogenes 
	 * E. cloaceae 
 Estas espécies estão associadas a infecções oportunistas das vias urinárias, trato respiratório, feridas, septicemias.
 Perfil semelhante ao das klebsielas exceto a motilidade. 
Enterobacter são móveis . 
Outras espécies de Enterobacter de interesse médico 
 E. sakazaki- Semelhante a Enterobacter cloacae com pigmento amarelo após incubação a 25°C 
* Causa menigite, septicemia ----- Altamente virulenta 
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E. gergoviae 
	* Agente etiológico de infecções urinárias , do trato respiratório.
	* Isolada do sangue, secreções, urina 
	* Bioquimicamente é semelhante a E. aerogenes exceto para as provas de descarboxilação de lisina, ornitina, urease positivas e fermentação de adonitol, inositol, sorbitol negativas.
E. cancerogenus = Enterobacter taylorae
	 * Agente etiológico de infecções urinárias , do trato respiratório, osteomielite
	* Caracteristica macroscópia- No meio Mac Conkey aparece com o centro da colônia púrpura 
	
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Gênero Pantoea 
- Este gênero foi criado 
Espécie tipo – Pantoea agglomerans 
Características bioquímicas importantes 
	* São negativos para todas as descarboxilases diferindo de Enterobacter 
Genero Hafnia
	* Hafnia alvei é a única espécie do gênero 
	* Anteriormente era denominada Enterobacter hafniae 
	* Caracteristicas bioquímicas 
		Não produz ácido a partir de lactose ou sacarose 
	* Patogenicidade 
		Agente etiológico de gastrinterites agudas, abscessos, infecções urinárias 
		Algumas cepas possuem um gene eaeA que codifica uma proteína associada à virulência e a adesão às células epiteliais .
		Foi isolada em associação com E. coli enteropatogênica 
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 Gênero Serratia 
 Espécies de interesse médico 
	Serratia marcescens 
 É um microrganismo oportunista com propriedades invasoras e resistentes a vários antimicrobianos. 
	 Grupo Serratia liquefaciens 
É formada por diversas espécies separadas somente por técnicas de biologia molecular 
Características morfológicas e bioquímicas
Serratia – Possuem três enzimas : lipase, gelatinase, DNase. Esta caracteristica a separa de Hafnia.
Serratia marcescens- Colônias vermelhas
Serratia liquefaciens – fermenta L-arabinose. 
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TRIBO PROTEAE 
 3 gêneros fazem parte desta tribo:
Proteus 
Morganella
Providencia 
 * O gênero Proteus possui 4 espécies
	Proteus vulgaris 
	Proteus mirabilis 
	Proteus penneri
	Proteus myxofaciens
 
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* Diferenças entre o Proteus mirabilis e o Proteus vulgaris
	P. mirabilis – Isolado de infecções urinárias
	Indol – negativo 
	Cefalosporina sensível 
	P. vulgaris - Microrganismo oportunista 
	Indol – positivo 
	Cefalosporina resistente 
Gênero Morganella 
 1978 – Baseado em homologia de DNA foi criado o gênero Morganella 
Espécie tipo : Morganella morganii
Jansen – Separou em 3 grupos e 7 sub-grupos 
	Separou a espécie em 2 sub espécies: 
		M. morganii subs morganii=incapaz de fermentar trealose 
		M morganii subs.sibonii = capazes de fermentar trealose 
* Patogenicidade- Infecções urinárias, feridas, meningites 
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Gênero Providencia 
Este gênero é composto por 5 espécies
Providencia alcalifaciens 
Providencia stuartii
Providencia rettgeri
Providencia rustigianii
Providencia heimbache 
Característica do gênero 
Todas desaminam a fenilalanina e somente a P. rettgerii hidrolisa a uréia 
Todas as espécies podem ser recuperadas das fezes 
Só Providencia alcalifaciens pode ser associada a doenças diarreicas. 
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Tribo Yersineae 
Gênero Yersinia 
Espécies : Yersinia pestis 
	 Yersinia enterocolitica 
	 Yersinia pseudotuberculosis 
Carcterísticas morfológicas e microscópica
	*Meio Mac Conkey – Pequenas colônias 
	* cocobacilos
Caracteristicas no TSI 
	* Coloração amarela a alaranjada em 24 horas de incubação 
	* Não são móveis a 37° C 
	* Y pestis é positiva para motilidade a 27°C