Biotec AV2 aula 3

Prévia do material em texto

Biotecnologia da Reprodução – AV2
16/10 – 3ª Aula
 FIV – Avaliação dos embriões, continuação...
É levado para o laboratório
Feita a maturação, que dura 24horas
Folículos maturados, sendo feito a FIV
*Na FIV se coloca o sptz junto com o ovulo. Sendo considerado o dia 0. É o dia em que as receptoras precisam dar o cio.
Volta para o laboratório (maturação)
Deixa por 48horas e verifica a clivagem
Embrião fica mais 5 dias maturando no laboratório.
No último dia é feito uma avaliação desses embriões.
*Clivagem – Verificar os embriões que começaram a partir (separar), tendo assim a taxa de clivagem, em quantos oócitos eu enseminei e quantos começaram a partir. Dando uma ideia de qualidade de sêmen. Se tem pouco oócito que começou a partir, significa que o sêmen não é bom. 
Na fase de avaliação serão avaliados:
Desenvolvimento – tem 3 estágios (Jovem, médio, maduro). 
Jovem= Mórula – MO 
Médio= Blastocisto - BL
Maduro = Blastocisto expandido - BX
Qualidade – tem 4 tipos
Sendo uma classificação por qualidade. EX: Mórula 1, Mórula 2, Mórula 3, Mórula 4.
Qualidade 1 – o ovo esta brilhoso, no centro.
Qualidade 2 – começa a ir para canto do ovo, começa a perder brilho.
Qualidade 3 – está no canto do ovo, já possui células se desgarrando
Qualidade 4 – está em qualquer lugar com bastante células soltas.	
Escolher o que vai ser colocado na receptora, dando a preferência de qualidade do melhor para o pior. As chances da qualidade 4 dar certo é menos de 10%.
A qualidade do embrião vai dar diferença no aproveitamento. É necessário saber escolher as receptoras e os embriões adequados. Se não tem condições de congelar embriões, deve ser gasto os embriões sempre do melhor para o pior, sendo em qualidade, respeitando o desenvolvimento. 
O dia 0, é o dia em que a doadora deu o cio, sendo sempre ligado o cio da receptora com a doadora.
Seleção da Receptora:
Se tem uma receptora que deu cio no mesmo dia da doadora, qual a importância disso?
A importância é no reconhecimento materno fetal, onde o embrião informa através de sinais hormonais que não é um intruso, para não ser morto pelo organismo da vaca. A vaca ovulando de um ovário, ela aguarda a resposta do embrião do mesmo lado do ovário que ovulou. 
Daí a importância para saber o dia exato em que o animal esta ovulando, onde quanto mais próximo do dia você chegar, da doadora com a receptora, mais chances tem de o embrião ser percebido pela receptora que irá receber o embrião da doadora. Uma receptora atrasada, não vai perceber os sinais do embrião.
Quando a receptora deu cio no mesmo dia da doadora, é aconselhável colocar um Blastocisto.
Quando a receptora deu cio 1 dia depois (atrasada) da doadora, é aconselhável colocar uma Mórula (embrião mais jovem).
Quando a receptora deu cio 1 dia antes (adiantada) da doadora, é aconselhável colocar um Blastocisto Expandido (embrião mais maduro).
É importante anotar na receptora, o lado em que ela ovulou, pois quando for colocar o embrião, deve ser inseminado do lado em que ocorreu a ovulação. Melhorando a chance do organismo reconhecer o embrião (ouvir o embrião falar).
Outra importância da receptora, é saber o tamanho do corpo lúteo (produz a Progesterona) que garante a permanência do embrião na gestação. Um corpo lúteo maior, produz mais Progesterona, logo a vaca tem mais chance de manter um embrião e sua gestação. Ter mais de 14mm.
Avaliação da Receptora:
Avaliar se tem corpo lúteo (Progesterona)
Qual o lado que o corpo lúteo se encontra (saber o lado e o tamanho do CL, podendo marcar o animal com tinta na garupa do lado em que esta ovulando e cor diferente para identificar o tamanho do CL. EX: Tinta verde, CL grande. Tinta Vermelha, CL pequeno).
Verificar o dia do cio, se a receptora é 0, +1, -1. 
**Sempre seleciona a receptora primeiro pelo dia em que ela apresentou o cio, para saber a idade do embrião, depois seleciona a receptora pelo tamanho do seu CL.
A qualidade do embrião será sempre de preferência 1 (Qualidade 1).
Exemplo de melhor Receptora:
Uma receptora deu cio +1 (1 dia depois), coloca um embrião Mórula, de qualidade 1, de CL grande, do lado em que ela ovulou.
Transporte do embrião:
Palheta de inseminação com algodão na ponta. 
Transportar o embrião deitado.
*Quando colocar o embrião que está dentro do liquido de cultura, colocar a pipeta dentro do liquido, fora do embrião, aspirar um pouco de liquido, tira do liquido e aspira um pouco de ar, depois você vai aspirar com o embrião. Aspira ar novamente e meio sem embrião novamente, formando uma proteção envolta do embrião. O embrião ficará no meio, evitando que ele caia. 
Marcar na palheta o tipo de material que você tem. O nome da mãe, pai, tipo do embrião e a qualidade.
Quando for congelar, coloca uma tampa de cor diferente, anotando o tipo de meio utilizado no congelamento (Etilenoglicol, Glicerol- precisa lavar o ovulo).
Inseminação do embrião na receptora:
A receptora deve estar na fase do cio de 6 – 8 dias, sendo o Diestro. 
Hormônio que age é a Progesterona.
Irrigação baixa do útero
Cérvix fechada (colocar o embrião no corno que ovulou)
Embrião deve ser colocado no terço final do corno
Conter o animal e dar uma peridural – 5ml
Lubrificação da pipeta para inseminar
Lavar e secar a vulva antes de inseminar
Colocar camisinha sanitária
Mexer o mínimo possível e suavemente no útero, pois estimula a liberação da prostaglandina, sendo um hormônio que destrói o CL.
A bainha do aplicador tem 2 orifícios laterais, para assim o embrião sair pelo lado
Anota a receptora e coloca um brinco com o nome do pai, da mãe, a data que ovulou e o tipo de embrião usado.
Pode colocar 2 embriões na mesma receptora?
Pode, os dois podem se fixar, podendo colocar um em cada lado ou do mesmo lado do ovário. O problema dos 2 se fixarem, é acontecer a gestação de 2 fetos de sexo diferentes (gemelar), onde o macho interfere na fêmea, deixando –a infértil. Porem com 2 embriões, a chance da receptora engravidar é muito maior. 
Quanto pior a qualidade dos embriões, menor a chance deles se fixarem e continuarem seu ciclo.
Na fase em que o embrião está descendo pela a tuba, ele se alimenta de leite uterino, não sendo espécie especifica, ele só será assim, quando se fixar na parede uterina. 
O embrião de Produção In vitro no laboratório, ele tem pior qualidade do que o produzido dentro do útero da vaca doadora. Colocando esse embrião dentro do útero da receptora, ele estará em ambiente natural, sendo melhor para seu desenvolvimento. 
O conceito da receptora primária é a que vai fazer o desenvolvimento dos embriões de PIV, do dia da clivagem até o dia que seria a transferência do embrião, passando a ter embriões de excelente qualidade que estão em congelamento. Pode ser usada essa receptora primária, ela vai funcionar como uma estufa, quando fizer os 7 dias de idade da PIV, essa receptora é lavada, os embriões são retirados, jogando esses embriões nas receptoras secundárias. 
A receptora primária pode ser qualquer espécie de animal fêmea mamífera, pois o leite uterino nessa fase não é espécie especifica. Ela precisa estar ciclando igual, ficando em média 7 dias.