RESUMO P1 MICROBIOLOGIA

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INTRODUÇÃO:
O estudo da microbiologia começa há aprox. 3,5 bilhões de anos, com as primeiras formas de vida, constante alterações. Antony Van leewenhoek descobriu os microrganismos com o microscópio de 200, 300x. Havia a teoria da geração espontânea, a teoria da esterilização(Pasteur), Agar-agar (Koch), placas de Petri(Petri) e coloração de células(Erlich).Whitaker propôs a classificação dos microrganismos em 5 reinos. Divisão por tipo de célula(procariota x eucariota), nutrição(absorção x fotossíntese x ingestão) e organização celular(pluricelular x unicelular). Carl Woese propôs a divisão em subunidades. Teoria de biogênese veio após a teoria da abiogênese ter sido descartada por Pasteur, essa teoria propõe que os seres vivos originam de outros seres vivos.
Microrganismos auxiliam na produção de vitaminas, produzem substancias inibidoras para o crescimento de outros microrganismos, ocupam receptores na superfície das células. A microbiologia ainda atua na área industrial(farmacêutica, fermentos, bebida alcoólica e probióticos), indústria alimentícia(vigilância sanitária), ambiental (qualidade da água, ar e solo; controle biológico,ecologia microbiana, fixação de N2 e bactérias fotossintetizantes), microbiologia da guerra(o bioterrorismo) e ainda a microbiologia médica(doenças infectocontagiosas, diagnóstico, vacinas e tratamentos).
MORFOLOGIA BACTERIANA:
	 Elemento
	Procarionte 
	Eucarionte
	Grupos pertencentes
	Bactérias, algas verde-azuis
	Algas,fungos,protozoários,vegetais e animais
	Tamanho da célula
	0,2-2,0 um
	10-100um
	Núcleo
	Membrana nuclear e nucleo ausente
	Limitado por membrana celular e presença de nucléolo
	Organelas envolvidas por membrana
	Não tem
	Lisossomos, complexo de golgi, retículo endoplasmático, mitocôndria e cloroplastos
	Flagelo
	Simples, consiste em dois proteínas construídas em blocos
	Complexo, com diversos microtúbulos
	Parede celular
	Quando existe é quimicamente complexa(parede bacteriana: peptídeo-glicano)
	É quimicamente simples
	Membrana citoplasmática
	Não contém carboidratos e esteróis
	Contém carboidratos e esteróis que servem como receptores
	
Colônias lisas: brilhantes e viscosas, salino-estaveis, turvação homogênea em caldo,possuem antígenos de superfície específicos e são resistente a fagocitose, virulentas. Formam boas vacinas.
Colônias rugosas: rugosas, opacas e friáveis, salino-sensíveis, precipitam em caldo, aglutinam com tripaflavina, não possuem antígenos específicos de superfície, espontaneamente fagocitáveis, avirulentas e são maus agentes imunizantes.
Tipos morfológicos de bactérias:
Diplococos(2), tétrades(4),sarcina(8),estreptococos(fileira de cocos), estafilococos(muitos agrupados), bacilos(cadeias longas), bastonetes(fininhos e bastões), espiroqueta(em espiral), vibrião(em forma de vírgula), espirilo(curvadinhas).
Parede celular: 
Função: Responsável pela forma da célula,protege a membrana citoplasmática de alterações no ambiente externo.
Composição: Pepetideo glicano(mureína) + polipeptídeos, porção dissacarídea e monossacarídea.
Bactéria gram-negativa: Camada fina de peptideoglicano, uma zona periplasmática e uma camada formada por lipopolissacarídeos, lipídeos e proteínas. Forma uma barreira protetora que impede a exposição das bactérias às enzimas hidrolíticas e substâncias tóxicas , como bile.
Bactéria gram-positiva: Camada espessa de peptideoglicano, entremeado por ácido teóico (Importantes Antígenos celulares tornando possível a identificação sorológica .)e mureína.
Membrana citoplasmática:
Função: Funciona como barreira seletiva, digestão de nutrientes e produção de energia.Composta de camada dupla de fosfolipídeos e proteínas, com enzimas relacionadas à síntese de alguns compostos. Ainda pode ter um mesossomo(que é um enovelamento) que está ligado com a divisão celular e transporte do material genético.
Citoplasma: Composto por 80% de água, proteínas, caroidratos,lipídeos, íons inorgânicos. As principais estruturas são os ribossomos(locais de síntese proteica), DNA e inclusões.
Em meios aquosos a bactéria é capaz de se locomover, por uma estrutura chamada flagelo, composto por flagelina, que é uma proteína elástica, que se fixa entre a memmbrana citoplasmática e o citoplasma, tem função de propulsão.
Os pili(fimbrias) são pequenas projeções proteicas que circundam a bactéria que tem função de fixar a bactéria em algumas superfícies.
Inclusões são substâncias colocadas para dentro do citoplasma sem uma forma definida, podem servir como reserva de nutrientes ou sem função aparente. Podm ser gorduras, glicogênio, amido,ribulose e vacúolos de gás.
Cápsula são compostas de polissacarídeos, tem função de proteção, armazenamento de nutrientes e substâncias de excreção.
Plasmídeos são pequenos fios de DNA, que se diferenciam na forma, criam a resistência da bactéria à muitas coisas como drogas, metais pesados e antibióticos, atuam na síntese de toxinas e antibióticos, atua no metabolismo de determinados compostos e etc.
Endosporo é a forma de resistência dos gêneros Clostridium e Bacillus. Quando elas se encontram em um ambiente com pouco nutriente ou com alguma substância que poderiam matar a forma vegetativa, elas esporulam ao contato com o ar. Esse endoesporo pode ser hidratado nas condições favoráveis, originando a parede celular e etc.
MORFOLOGIA DOS FUNGOS FILAMENTOSOS E UNICELULARES
O fungo tem ditribuição cosmopolita, material orgânico, água, temperatura e disseminação fácil. 
Lado bom: micorrizas , biomassa, controle biológico, são os maiores decompositores do planeta, biotransformadores(queijo, vinho, cerveja, pão), produtores de antibióticos, enzimas, esteroides e hormônios de crescimento vegetal.
Lado ruim: doenças nos homens e animais, doenças em plantas, micotóxicos, alergias, biodeteriorização.
Estudo dos fungos filamentosos (Pluricelulares):
Tem como característica da colônio ser aveludada, algodonosa ou puluverulenta. Tem reprodução anamorfa. Os filamentos que o formam são chamados de hifa, que correspondem à parte vegetativa do fungo. É a unidade estrutural, fixa o fungo no substrato, assimila nutrientes e gera estrutura. É constituída principalmente por vesículas e mitocôndrias e na zona sub-apical que aparecem as outras organelas. O citoplasma é livre nas hifas cenocíticas(não septadas) e divididas quando septada, essa septação não é rígida, permitindo o fluxo de material no citoplasma.
Tipos de hifa: em espiral, em raquete, rizoide.
Os núcleos das hifas se dividem em septos, cada um com uma informação genética diferente, quando estão dispostos 1 a 1 no septo é chamado apocítico e quando são 2 a 2 é chamado diplocítico. As hifas podem ainda conter os austóreos que penetram na célula para retirar nutrientes.
Micélio: É o conjunto de hifas, micélio vegetativo endobiótico formou-se dentro do meio de cultura e o epibiótico se desenvolvem na superfície do meio. O micélio vegetativo é formado pelas estruturas reprodutivas dos fungos.As estruturas reprodutivas dos fungos são denominadas conídeos ou esporo, similares as hifas, que em condições favoráveis formam as hifas e em seguida os micélios dando origem à colônia. Quando se produz um conídeo pequeno e arredondado, deve-se analisar todo o órgão reprodutivo para determinar sua identificação, caso do penicillium.
Conídiogênese: Ciclo anamorfo, assexuado, de reprodução dos fungos. As células reprodutoras, ou conidiogênicas desenvolvem-se a partir do conidiófaro. A conidiogênese pode ser blástica( Brotamento da hifa que se fragmentará em diversos conídeos) ou tálica(ocorre um abaloamento onde vão se desenvolvendo diversos conídeos.)
Clamidoconídeos são as estruturas de resistência dos fungos, são elementos circulares de parede dupla que contem nutrientes e material genético, são menos resistentes que os esporos bacterianos, e quando se encontram em ambiente favorável voltam a se desenvolver.
Estudo dos fungos unicelulares:
A colônia de fungos unicelulares tem aspecto cremosa, cerebriformee mucosa. São elas as leveduras. E ainda produz pigmentos que colorem o meio de cultura, mais um aspecto a se identificar na classificação correta de um fungo.
A reprodução é anamorfa, há um brotamento ou gemulação na levedura, originando uma pseudo-hifa onde ocorre a fissão originando novas leveduras.
São compostos: MEMBRANA/ PAREDE: POLISSACARÍDEOS (GLICANA E MANANA),PROTEÍNAS e VESTÍGIO DE QUITINA, MEMBRANA CITOPLASMÁTICA (PROTEÍNAS, LIPÍDEO, POLISSACARÍDEO) .CÉLULA EUCARIÓTICA CITOPLASMA, NÚCLEO, RIBOSSOMOS, VACÚOLOS, MITOCÔNDRIAS, ETC...
Fungos perfeitos: fazem o ciclo anamorfo e teleomorfo. Fungos imperfeitos:fazem apenas o anamorfo.
VIROLOGIA:
Os vírus são formados por uma capa proteica, os capsídeos que são formados pelos protômeros que são dobramentos da cadeia polipeptídica. Subunidades de proteína, os capsômeros, são responsáveis pela especificidade viral. Esta envolve ainda uma associação de ácido nucleico e proteína, formando a estrutura chamada de nucleocapsídeo. Alguns vírus ainda apresentam uma membrana solta composta de lipoproteínas chamada de envelope, que deixa o vírus grosseiramente esférico e altamente pleomórfico, são formados por proteínas e lipídeos, promove barreira para nuclease e que sejam rígidos, porém são sensíveis a desinfecção ou danos por soventes lipídicos, devido a sua estrutura lipídea. 
Classificação icosaédrica: Neste vírus o capsídeo se apresenta de forma icosaédrica envolvendo o ácido nucleico, formando um ceme. Agrupamento de 5 ou 6 protômeros. Algumas partículas sem ácido nucleio podem estar presenres em preparações de vírus icosaédricos, que são os capsídeos vazios, mostrando que não há necessidade do ácido nucleico para organização do capsídeo. A partícula completa é chamada Virion, e o ácido nucleico que confere estabilidade deste. Podem apresentar ou não envelope. Ex: Herpesvírus
Classificação helicoidal: Alguns virions formam longos bastões, cujo ácido nucleico é circundado por um capsídeo(onde os protômeros estão ligados um a outro formando uma ponte) cilíndrico de estrutura helicoidal. Ex: mosaico do tabaco. 
Vírus complexos possuem duplo capsídeo, ou simetria helicoidal e icosaédrica juntas. Ex:vírus da raiva
Bacteriófagos são vírus que infectam bactérias. São lítigos ou virulentos e lisogênico ou avirulento.
Replicação viral: Adsorção- é o primeiro passo na infecção,representado pela ligação da partícula viral à receptores específicos da célula/ Penetração- As fibras da cauda mantém o vírus aderido à parede celular, a bainha se contrai, impelindo a parte central do tubo existente na cauda do vírus para dentro da célula e injetando o DNA./ Replicação, acoplamento e lise- Após a introdução do DNA viral na célula ele começa a controlar o metabolismo celular, fabricando ácidos nucleicos virais. Passa-se então ao processo de acoplamento que tem duas etapas: a montagem do capsídeo e sua associação com o ácido nucleico. Dá origens a 200 novos bacteriófagos em 35 minutos e é dividido em 3 etapas. A lise é um processo no qual o acido nucleio viral não usurpa as funções do processo sintético bacteriano mas se torna parte integrante do cromossomo desta.
Adenovírus: icosaédricos, respiratórios com DNA de fita dupla.
Herpesvirus: Tem DNA e replicam no núcleo, tendem a produzir vesículas, possuem envelopes com projeções curtas e são icosaédricos.
Poxvírus: São os maiores vírus animais, contém DNA, proteínas e lipídeos. Contém resistência a inativação por desinfetantes comum, calor, desidratação e frio. Ex: Vírus da varíola
Picornavírus: Pequenos vírus, icosaédricos, RNA fita simples, resistente a solventes lipídicos. Ex: Poliovírus
Mixovírus: São geralmente heterogêneos, RNA, tem a superfície recoberta por espículas. Ex: Infleunza A.
Paramixovírus: Esféricos, RNA, sítio de multiplicação é no citoplasma.
Togavirus: Icosaédrico com envelope lipídico, RNA fita simples. EX: vírus da febre amarela
Reovirus: Icosaédricos, RNA, isolados de fezes e material respiratório de pessoas sadias e infectadas.
Rotavirus: icosaédrico, com 32 capsômeros, presença de duplo capsídeo, não envelopado, RNA fita dupla. Abrange quase todas as espécies de mamíferos causando diarreias em neonatos.
METABOLISMO CELULAR
Catabolismo é a quebra de macromoléculas para obtenção de subunidades de energia.
Anabolismo é a biossíntese de novos compostos. Ambos fazem parte de um ciclo.
O Material genético é que determina o metabolismo de um indivíduo, ou seja, existe a expressão proteica, o perfil enzimático do indivíduo e o papel do meio ambiente criando as condições favoráveis. Os microrganismos precisam para o seu crescimento : vias de obtenção de energia, nutrientes e condições ambientais favoráveis( oxigênio, pressão atmosférica, atividade da água, PH e temperatura). As vias de obtenção de energia são a produção de reações redox a energia é carregada por determinados compostos como ATP, acetil-fosfato, acetil co-A, fosfenol piruvato. 
Macronutrientes: proteínas, lipídeos e carboidratos. Micronutrientes: Vitaminas e minerais.
Os processos de obtenção de energia são: fermentação, respiração e fotossíntese. 
Todos os caminhos metabólicos são controlados pela enzima específica. Só faz fermentação quem tem a enzima específica para fazê-la, e é claro que será possível efetivá-la se estiver nas condições ambientais favoráveis. 
Fermentação:Rende pouca energia mas é um processo curto e rápido e independente de O2, um ambiente favorável para a fermentação é um ambiente rico em carboidrato, será rico em energia, já que a fermentação gera 2ATP, quando há muito carboidrato gerará mais ainda ATP. Gera álcool, ácido e gases.
Respiração: Não ocorre nas mitocôndrias e sim na membrana plasmática, PH ácido não é favorável. O processo de respiração origina anion superoxido e hidrogênio protonado. O O2 pode ser neutralizado pelo H+ formando H2O2 que será quebrado por determinada enzima em H2O + O2, o que caracteriza uma bactéria aeróbica, as enzimas são a catalase e peroxidase.
CRESCIMENTO MICROBIANO
Determinação do peso seco: Peso de um material completamente destituido de água.Peso seco de uma folha de um vegetal = peso da folha completamente seca. As culturas ficarão dispostas em tubos de ensaio, para fazer a pesagem , serão filtradas e colocadas na estufa. Faz-se as pesagens intercalando com um determinado tempo na estufa até se atingir um peso constante. Se, em consequentes escolhas de frascos e determinações de peso seco correspondente à esta colônia, verificarmos um aumento de peso, logo, essas bactérias estarão em crescimento pois as massas estão aumentando.
Atividade catalítica: Se relaciona à medida do aumento nas quantidades de determinadas enzimas ou na medida das taxas de um processo metabólico. Se há um aumento da concentração de uma enzima junto ao substrato, logo haverá um aumento microbiano. 
Contagem viável em placas: Usa-se uma alíquota e um frasco de volume conhecido, é colocado em uma câmera que apresenta um quadriculado de dimensões conhecidas. Deste modo é possível contar o numero de células e no final da contagem, realizada mediante focalização do microscópio, será possível calcular o numero de indivíduos por mL de amostra. A desvantagem encontra-se no fato de contar os microrganismos viáveis e os inviáveis e precisa-se de uma grande concentração de microrganismos unicelulares para que os mesmos possam ser representados em alíquotas tão pequenas como as utilizadas no método.
Turbidimetria: Quando microrganismos se encontram em um meio líquido o mesmo se torna turvo proporcionalmente ao número de indivíduos. As práticas empregadas pela bactéria aumentam a passagem de luz, ou seja aumentam a absorvância, que é medida em um espectofotômetro, essa absorvância é medida segundo a escala de Mc Farland.
Curva de crescimento bacteriano:
1-Leg fase: Fase de espera em que os
Microrganismos reconhecem os consti-
tuintes e a composição do meio.
2-Fase de crescimento exponencial
3-Fase estacionária: Nessa fase o nºde 
Bactérias que surgem é = ao que morrem
Já reflete o numero de substancias tóxicas
E a falta de nutrientes.
4-Fase de declíneo:fruto da falta de nutrientes e quantidade de metabólito tóxico
INFLUÊNCIA FÍSICO-QUÍMICA NO CRESCIMENTO MICROBIANO.
Uma mesma substância pode ser germistática, nutriente ou germicida para determinado microrganismo, Principal condição para que uma substância possa ser empregada no controle microbiano – conservação de alimentos ou como agente terapêutico : Relativamente inócua para o homem e tóxica para o microrganismo específico ou microrganismos. Ex: penicilina, HgCl2 e citrina.
As propriedades de um desinfetante ideal são: alta toxicidade para os microrganismos, inócuo para o homem e animais, estabilidade elevada, baixo custo, não ser corrosivo nem manchar, fácil obtenção e uso, não ter odor desagradável. Para ser usado invivo: Toxicidade seletiva, não alergênico, estabilidade , vida longa em prateleira, Custo razoável 
Modo de ação dos agentes: sobre a proteína, sobre a membrana, sobre a parede celular ou sobre os ácidos nucleicos. 
Alcool: Desnatura a proteína e solubiliza lipídeos da membrana das células microbianas. Entre 70 e 90% são efetivos contra formas vegetativas de microrganismos.
Fenois e Cresóis: Podem causar sérios danos ao ser humano, como gangrena, lesões hepáticas e necroses dependendo do tipo e tempo de contato. Fenóis alteram a permeabilidade seletiva da membrana, desnaturam e inativam proteínas como enzimas, causando uma perda de substâncias intracelulares, em concentração de 5% matam a forma vegetativa, mas os esporos são muito mais resistentes. 
Clorexidina: Causa ruptura da membrana plasmática, efetiva contra gram + e -, atóxica.
Halogênios(Iodo e Cloro): Oxidam compostos celulares.
Metais pesados(prata, mercúrio e cobre): Desnaturam proteínas e inibem enzimas.
Detergentes: Alteram a permeabilidade da membrana.
Valores de pH para crescimento:
Microrganismos acidófilos : preferem pH por volta de 3,5 ou ácidos, principalmente ácido forte porque se dissociará e não entrará na célula, mas podem se desenvolver em outro pH, mas a condição favorável é essa.
Microrganismos neutrófilos preferem pH por volta de 7,0 ou neutro.
Microrganismos basófilos ou alcalifílicos preferem pH por volta de 9 ou básicos.
A temperatura para desenvolvimento de um microrganismo pode ser mínima, máxima e a ótima. Em organismos psicrófilos eles tem a temperatura ótima abaixo de 20º, mesófilos tem sua temperatura ótima de 20 à 45º e os termófilos acima de 45º.
CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO
Esterelizar: eliminar todas as formas de vida de uma superfície, material ou ambiente(geralmente usa processos físicos).
Desinfetar: Eliminar todas as formas de microrganismos patogênicos de uma determinada superfície morta(geralmente usa-se processos químicos).
Antissepsia: eliminar microrganismos de uma superfície viva(geralmente feitas com substancias químicas).
Assepsia: Conjunto de técnicas necessárias para não deixar que um microrganismo penetre num local que não o contenha.
Nesses processos o calor é fundamental, num laboratório, o bico de Bunsen, local onde serão flambados os metais e vidrarias usadas nas rotinas, tudo deve ser flambado, a fim de eliminar qualquer contaminante aderido ao matrial. Também no calor seco há o forno Pasteur: retangular de paredes duplas isoladas, usado para esterelização de vidrarias vazias e intrumentos de metal. Há um termômetro que mede a temperatura de esterelização 170 a 180, por duas horas. (pasTEur, cento e seTEnta à cento e oiTEnta, cento e vinTE minutos).
Os processos usando o calor úmido são mais eficazes porque o esporo é até certo ponto refratária, absorve um pouco da umidade tornando-se vulnerável aos tratamentos térmicos. Dentre eles estão a autoclave: que possui uma caldeira(externa ou interna), hermeticamente fechada por uma tampa de cobre. No interior cestas metálicas móveis regulam o nível da água e outros mecanismos. A água aquecida em recipiente fechado, onde o vapor fica retido sob pressão, atinge temperaturas elevadas sem ferver, isto diminui a possibilidade de molhar as rolhas de algodão o que poderia levar a contaminação. Para ser efetivo, deve ficar na autoclave a uma temperatura de 120 graus por 20 minutos.
A tindalização: utiliza-se a temperatura em torno de 80º por um tempo de 45 minutos, repetindo esse processo por dois ou três dias consecutivos. Desse modo, elimina-se toda a forma vegetativa por uma “esterelização fracionada” e permite as formas espuroladas a passarem para vegetativas.
Para materiais que não podem ser esterelizados pelo calor, pode-se lançar mão de processos físicos como filtração que é passar um fluido através de um elemento poroso.São indicados para soluções proteicas que coagulam pelo calor e soluções de enzimas e toxinas que se inativam pelo calor. Para esses processos são usadas as velas de Chamberland(porcelana não vitrficada) e e Bekerfeld(filtros de terra), mas ainda são preferidos os filtros de Seits, que são placas filtrantes de amianto prensado, sendo clarificantes ou esterelizantes.
Os processos físicos usando a radiação não são usados para a esterelização de meios de cultura mas geralmente para ambientes do laboratório. São eles raio-x, raio gama e radiação ultravioleta, quando menor o comprimento de onda, maior o poder esterelizante.