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CONTROLE MICROBIANO CONTROLE DA POPULAÇÃO MICROBIANA 1. Introdução 2. Ações dos Agentes de Controle Microbiano 3. Condições que Influenciam o Controle Microbiano 4. Métodos Físicos de Controle Microbiano 5. Métodos Químicos de Controle Microbiano CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO 1. Introdução Esterilização: É a destruição de todas as formas de vida microbiana - incluindo endósporos. - Aquecimento (Esterilização comercial): tratamento mais comum para matar micro-organismos (endósporos) Ex. Clostridium botulinum nos enlatados. Desinfecção: Destruição de micro-organismos nocisos (patógenos vegetativos). Antissepsia: Destruição dos patógenos vegetativos em tecidos vivos. Degerminação: Remoção local dos micróbios de uma área limitada. Sanitização: Tratamento para reduzir as contagens microbianas nos utensílios alimentares até níveis seguros. Taxa de Morte “As populações bacterianas quando aquecidas ou tratadas com substâncias químicas antimicrobianas, normalmente morrem em uma taxa constante.” Alteração da permeabilidade de membrana Lesão aos lipídeos e proteínas da membrana. Danos às proteínas e aos ácidos nucléicos. Deformidade na estrutura da proteína e perda de função. Lesão aos ácidos nucléicos provoca a interrupção da replicação, de funções metabólicas normais. Ações dos Agentes de Controle Microbiano Calor Ponto de morte térmica (PMT): menor temperatura em que todos os micro-organismos em uma suspensão líquida específica são mortos em 10 minutos. Tempo de morte térmica (TMT): tempo mínimo para todas as bactérias em uma cultura líquida sejam mortas, em uma dada temperatura. Tempo de redução decimal (TRD ou valor D): tempo (min) em que 90% de uma população bacteriana em uma dada temperatura são mortas. Métodos Físicos de Controle Microbiano Calor úmido Fervura ou fluxo de vapor Ação: Desnaturação das proteínas. Elimina patógenos bacterianos vegetativos e fungos e muitos vírus - 10 minutos. Menos efetivo para endósporos. Utilizado na esterilização de utensílios domésticos. Vapor sobre pressão: Autoclaves (mais confiáveis) Mata células vegetativas e endósporos - 15 min, 15 psi, 121ºC. Utilizado para meios microbiológicos, soluções, utensílios, curativos, equipamentos hospitalares. Pasteurização Ação: Desnaturação de proteínas. Tratamento de calor utilizado no leite para matar os patógenos e quase todos os não patogênicos (72ºC/15seg): Pasteurização de alta temperatura e curto tempo (HTST, de high-temperature, short-time). É utilizado no leite e derivados, sorvetes, e cervejas. Teste da fosfatase: determinar se os produtos foram pasteurizados - se o produto sofreu pasteurização, a fosfatase fica inativada. • Tratamentos de temperatura ultraelevada (UHT, de ultra-high temperature) - Pode ser armazenado sem refrigeração por vários meses. - 140oC/ 4 seg - Liquido empacotado em uma embalagem hermética e pré esterilizada. Calor seco mata por efeitos de oxidação Chama direta Incineração Utilizados em alças de inoculação Ar quente Forno ou estufa (170ºC/2-3h) vidros vazios, instrumentos, agulhas e seringas de vidro. Filtração Separar as bactérias do líquido de suspensão. Passagem de um líquido ou gás por uma membrana que aprisiona os micro-organismos. É utilizado para esterilizar líquidos como toxinas, vacinas, enzimas e soluções antibióticas que são destruídos pelo calor. Salas com filtros de partículas de ar de alta eficiência (HEPA, de high- efficiency particulate air) – menores que 0,3um. Frio Refrigeração Redução das reações químicas e possíveis alterações nas proteínas. Efeito bacteriostático. Utilizado para a conservação dos alimentos, drogas e culturas. Congelamento Lento - nocivo Conservar culturas microbianas, com congelamento rápido a -50 e -95ºC. Liofilização/Dessecamento Micro-organismos não podem crescer ou se reproduzir, mas permanecem viáveis por anos. Redução das reações químicas e possíveis alterações de proteínas. Conservação prolongada de culturas microbianas, onde a água é removida por alto vácuo em baixa temperatura. Conservação dos alimentos, drogas e culturas. Pressão osmótica Plasmólise – Alta concentração de sais e açucares. Conservação dos alimentos. Radiação Ionizante: Destrói o DNA por raios gama e feixe de elétrons de alta energia. Esterilizar produtos farmacêuticos e suprimentos médicos e dentários. Não ionizante: Lesão ao DNA por UV. Radiação não muito penetrante. Utilizado para controle de ambiente fechado. Desinfecção Efetiva Métodos de Avaliação – Teste de Uso-Diluição/Método de Disco- Difusão Métodos Químicos Tipos de Desinfetantes Fenol e compostos fenólicos Ruptura da membrana plasmática, desnaturação de proteínas e desativação de enzimas. Raramente usado como desinfetante ou anti-séptico por suas características irritantes e odor desagradável. Pastilhas e sprays para garganta - efeito anestésico local- concentrações >1% - tem efeito antibacteriano significativo. Cresóis – ótimo desinfetante de superfície Biguanidas (clorexidina) Ruptura da membrana plasmática. Amplo espectro de ação, atóxico, persistente. Utilizado na desinfecção da pele e mucosas e especialmente escovação cirúrgica. Halogênios Iodo e cloro separados ou como componentes de compostos orgânicos e inorgânicos. I2 é eficiente contra todos os tipos de bactérias, muitos endosporos, vários fungos e alguns vírus. I2 inibe a função das proteínas e é um forte agente oxidante Cl2 forma o agente oxidante forte (ácido hipocloroso), que altera os componentes celulares. I2 - disponível como tintura e iodoforo Cl2 - gás ou liquido usado para desinfetar água e os compostos de cloro são usados em plantas de processamento de laticínios, utensílios para refeições, itens domésticos e vidraria. Álcoois Desnaturação de proteínas e dissolução dos lipídeos. Bactericida e fungicida, não sendo efetivo contra endósporos ou vírus não envelopados. Álcoois mais usados são o etanol e o isopropanol. Termômetros e outros instrumentos, superficies. Metais pesados e seus compostos Desnaturação das enzimas. Metais pesados (prata e mercúrio) são germicidas ou anti-sépticos. Nitrato de prata pode ser usado para prevenir as infecções oculares gonocócicas; Mercurocromo desinfeta a pele e as mucosas; Sulfato de cobre é um algicida. Agentes de superfície Sabões e detergentes aniônicos Remoção mecânica dos micróbios por escovação. Utilizados para degerminação da pele e remoção de resíduos. Detergentes ácido-aniônicos Incerto; pode envolver a inativação ou ruptura das enzimas. Amplo espectro de atividade; atóxicos, não-corrosivos e de ação rápida. Utilizado na sanitização em indústrias de processamento de laticínios e alimentos. Detergentes catiônicos (compostos de amônio quaternário) Inibição de enzimas, desnaturação das proteínas e ruptura das membranas plasmáticas. Bactericidas, bacteriostáticos, fungicidas e viricidas contra vírus envelopados. Usado como antisséptico para pele, instrumentos e objetos de borracha. Esterilizantes Gasosos Desnaturação das proteínas. Óxido de etileno é o mais comum, excelente esterilizante, especialmente para objetos que seriam danificados pelo calor. Peroxigênios Oxidantes - Ozônio é usado como suplemento para a cloração; Peróxido de hidrogênioé um antisséptico fraco, mas bom desinfetante. Usados em superfícies contaminadas; alguns ferimentos profundos, em que são muito efetivos contra os anaeróbios sensíveis ao oxigênio. Antibióticos Tratamento de doenças; Uso restrito; Uso em alimentos: - nisina: frequentemente adicionada ao queijo para inibir o crescimento de certas bactérias formadoras de endósporos que causam deterioração. - natamicina (pimaricina): antibiótico antifúngico aprovado para uso em alimentos, principalmente para os queijos. -
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