2 sistemas abo

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ANA LÚCIA GIRELLO 
E - M A I L : B I O L I N E @ G L O B O . C O M 
S I T E : W W W . B Y O L I N E . C O M . B R 
HEMOTERAPIA 
Era Científica (1900) 
Afinal, porque AINDA o Sistema ABO é 
 considerado o mais importante 
 na prática 
transfusional 
Ele é o CAMPEÃO DE AUDIÊNCIA das reações 
transfusionais fatais! 
Sistema ABO 
ISBT 001 
 
SISTEMA ABO 
 
�  Transfusão incompatível 
ABO: 
¡  Reação transfusional grave: 
÷  hemólise intra-vascular 
¡  Pode levar à óbito 
÷  10-20 minutos após iniciada 
transfusão 
÷  ~100 ml de sangue transfundido 
•  ISSIT,P.D., 2000. 
6 
PAUSA PARA ENTENDERMOS ISTO! 
Hemólise mediada por anticorpos 
O QUE É SISTEMA COMPLEMENTO? 
 
�  Descoberto há muitos anos, por Charles Bordet (1895), que observou 
lise bacteriana quando em contato com soro imune fresco; esta mesma 
lise deixava de ocorrer quando este soro era inativado a 56oC. 
�  O sistema complemento (SC) consiste de uma série de proteínas cuja 
maioria encontra-se no plasma sangüíneo na forma inativa. 
�  Além das proteínas plasmáticas, o sistema de complemento inclui 
diversos receptores membranários em células do sistema imunitário, 
que reconhecem frações específicas do complemento. 
�  Outras proteínas membranárias com funções reguladoras (DAF, MIRL) 
previnem o ataque do complemento contra células autólogas. 
O QUE É SISTEMA COMPLEMENTO? 
 
�  As proteínas do Complemento desempenham importantes 
funções no processo inflamatório e “complementam” a 
ação dos anticorpos na destruição de uma célula-alvo- daí 
seu nome. 
�  As frações plasmáticas são produzidas no fígado e por 
macrófagos/ monócitos. 
�  As proteínas reguladoras ligadas à membrana celular são 
sintetizadas nas células sobre as quais estão expressas. 
 
�  Citólise 
�  Opsonização 
�  Ativação da inflamação 
�  Solubilização dos complexos imunes 
O QUE É SISTEMA COMPLEMENTO? 
FUNÇÕES BIOLÓGICAS 
 
FUNÇÕES BIOLÓGICAS 
OPSONIZAÇÃO 
INFLAMAÇÃO 
CITÓLISE 
Importante na 
medicina 
transfusional 
VIAS 
DE 
ATIVAÇÃO 
DO 
COMPLEMENTO 
...é bemmmmm fácil!!!! 
CALMA, vou tentar ser boazinha….
Hemólise mediada por anticorpos 
FISIOPATOLOGIA DA HEMÓLISE 
Extra e intravascular 
Extravascular Intravascular 
O Sistema Complemento 
 e a destruição celular 
Igs e a capacidade de Ativação do Complemento 
IgG e ativação de C 
C5 convertase 
C3 convertase 
Inibição da cascata 
IgM e ativação do C 
C5 convertase 
C3 convertase 
Muitas moléculas 
de C3 são 
formadas 
Fatores inibidores 
não são suficientes 
MAC (CAM)-Complexo de Ataque à Membrana 
Entendeu? 
Bioline Consultoria 
 
SISTEMA ABO 
 
� Sistema de histocompatibilidade 
¡ presentes em tecidos e fluidos 
¡ linfócitos e plaquetas. 
� Não são detectados em granulócitos. 
Bioline Consultoria 
E então, plaquetas tem antígenos ABO? 
29 
Membrana Citoplasmática 
 
•  57% Proteínas (Glicoproteínas HPAs, HLA) 
•  35% Lipídeos 
•  8% carboidratos (ABO, Lewis, Ii) 
SISTEMAS ANTIGÊNICOS PLAQUETÁRIOS 
 
30 
SISTEMA ABO EM PLAQUETAS 
•  Distribuição heterogênea: baixa e alta expressão. 
 
 
 
 
 
 
 
 
HPA-1a 
Ctr- 
Anti-A 
Anti-B similar ao anti-A. Br J Haematol 1985: 61, 603-609. 
31 
•  Transfusões ABO não-isogrupo: 
• Curva bifásica da destruição de plaquetas ABO 
incompatíveis: perda de 50 a 90% das transfundidas. 
• Maior taxa de refratariedade 
•  ABO compatível: melhores rendimentos e redução da 
refratariedade. 
 
SISTEMA ABO EM PLAQUETAS 
Herança Genética: co-dominância 
Leis de Mendel (1ª e 2ª leis) 
Gregor Johann Mendel 
Monge Austríaco, botânico e meteorologista 
1822-1884 
 
Genética e herança 
Sistema ABO: interação de vários genes 
co-dominantes! 
•  ABO 
•  FUT 1 (H) 
•  FUT 2 (Se) 
•  FUT 3 (Lewis) 
33 
Genes 
 Ag 
O 
 
B 
 
A 
 
O 
B 
A 
Genética do Sistema ABO 
Biossíntese dos antígenos ABO 
SISTEMA ABO 
 ISBT 001 
� Antígenos : 
�  A 
�  B 
�  H 
� Antígenos (ISBT): 
¡  A (ABO 1) 
¡  B (ABO 2) 
¡  AB (ABO 3) 
¡  A1 (ABO 4) 
�  Genes: 
�  A 
�  B 
�  O 
36 
§ Genes associados: 
§ FUT 1 (H) – fucose GV 
§ FUT2 (Se) – fucose solúvel 
Bioquímica e Biossíntese 
Bioline Consultoria 
� Antígenos são produtos secundários dos genes 
¡  construídos por atividade de enzimas glicosiltransferases 
÷ produtos primários 
¡  adicionam açúcares a uma substância precursora comum . 
 
Bioquímica e Biossíntese 
 Eritroblastos 
•  Enzimas produzidas: 
•  Gene H: 
•  Fucosil transferase 
•  gene A: 
•  3-alfa- N-acetilgalactosaminiltransferase 
•  gene B: 
•  3-alfa-galactosiltransferase 
•  gene O: 
•  enzima afuncional = não adiciona açúcar 
38 
Antígenos ABO 
 
Glicose 
 
Galactosamina 
N-acetil 
Glucosamina 
Cadeia precursora 
Galactose 
oligossacarídeos 
Glicoproteínas e glicoesfingolipides 
Antígenos ABO 
Fucose 
Galactose 
N-acetil-
Galactosamina 
700.00 a 
1300.000 
sítios/hemácia 
Bioquímica e Biossíntese 
nos Eritroblastos 
Genes ABO 
Açúcares 
Enzimas A e B 
 
Gal 
 
Gene H 
H 
 
B 
 
Estrutura 
Precursora 
GV 
 
A 
 
 
A 
 
 
B 
 
Estrutura 
Precursora 
GV H 
Bombay 
Genes A Genes B Genes A e B Genes O 
Genes ABO 
Enzima A Enzima B Enzima O 
Enzima H 
Fuc 
Enzimas A e B 
N-acetil-gal 
Fenótipo Bombay clássico(Oh) 
•  Gene H homo/heterozigose ⇒ antígeno H 
(base p/ ABO) 
•  Ausência H : genótipo hh 
•  Descoberto em 1952 
•  Perda total da atividade das transferases 
ABH nos g.v. e nas secreções 
•  An t i -H : impo r tan te c l i n i camen te , 
incompatibilidade entre indivíduos O. 
42 
Frequencia dos fenótipos ABO e RhD 
Bioline Consultoria 
Anticorpos ABO 
s-s 
s-
s 
s-s 
s s- 
s-s 
IgM 
J 
Porque os anticorpos ABO são 
produzidos mesmo sem exposição ao 
antígeno correspondente? 
Anticorpos ABO 
�  Formação dos acs a part ir do 
nascimento 
¡  Naturais e regulares 
�  A ç ú c a r e s s ã o s u b s t â n c i a s 
relativamente simples e encontrados 
facilmente na natureza: 
÷  Enterobactérias (E. coli, Shigella shigae) do 
trato gastrintestinal 
÷  Alimentos, poeira, pólen, etc. 
Anticorpos ABO 
 
� Realização de prova reversa: 
¡  Não realizar em RN ! 
÷ Somente a partir de 03-06 meses de idade teremos 
pequenas quantidades acs formados 
÷ Produção máxima entre 05- 10 anos 
¡  Após 65 anos título acs diminuem 
÷ difícil identificação 
Anticorpos ABO 
 48 
�  Naturais e regulares: clinicamente significantes 
�  Reagem preferencialmente a T.A, mas são de grande amplitude 
térmica 
¡  IgM e IgG 
�  Ativam complemento a 37oC 
¡  Hemólise intravascular: reações hemolíticas pós-transfusionais graves , geralmente 
fatais . 
¡  Depende da quantidade de sangue transfundido e do título de anticorpos no 
receptor 
�  DHPN, geralmente de leve intensidade. 
DHPN p/ anticorpos ABO 
49 
�  Raramente severa 
�  Acs anti-AB - mães grupo O: 
¡  Geralmente IgG, títulos altos, alta avidez 
¡  Reagem c/ g.v. dos tipos A e B 
¡  Atravessam barreira placentária mais frequentemente 
¡  Ligam-se aos ags nos tecidos/fluidos e depois às 
hemácias! 
÷  (Issit,P.D.,1999). 
Porque? 
Genética Molecular 
GENÉTICA ABO E H 
Localização do gene H 
Cromossomo 19 
19q 13.3 
• Localizado na posição 19q13.3 (locus FUT1) 
•  Apresenta 4 exons 
• O éxon 4 codifica proteina de 365 aa 
•  a(1,2) fucosiltransferase 
• antígeno H 
Caracterização do gene ABO 
9q 34.1-2 
•  Genes ABO: cromossomo 9: 
 
•  DNA de 18-20 kb 
 
•  Cook, 1978 
 
Genética Molecular 
Bioline Consultoria 
� O alelo A1 (A101) é considerado com o 
gene selvagem, e tomado como base de 
comparação aos demais alelos ABO. 
� Os principais alelos ABO são: 
¡ A1, B1, O1. 
Bioline Consultoria 
Genética Molecular 
Bioline Consultoria 
� Polimorfismos ABO: 
¡são causados por mutações na 
sequência de nucleotídeos no DNA. 
 
 
 
Subgrupos ABO 
Subgrupos ABO 
 58 
�  Subgrupos são produtos de genes alelos 
variantes ou mutantes, e a maioria apresenta 
significativa redução no número de sítios 
antigênicos expressos nas hemácias, embora 
sejam formados do mesmo açúcar. 
Bioline Consultoria 
O QUE ISTO QUER DIZER? 
Lembre-se de epítopos: 
 
 
 
O QUE ISTO QUER DIZER? 
 
Lembre-se de epítopos: 
 
Um epítopo 
Muitos epítopos 
 mesma especificidade 
Polissacarídeos 
Ex. ABO 
Muitos epítopos 
diferentes especificidades 
Haptenos 
Ex. drogas 
Proteínas 
Ex: Rh 
Subgrupos ABO 
61 
�  Importante: o açúcar imunodominante nos 
subgrupos é idêntico aos originais. 
� Transfusionalmente não é importante 
distinguir-se subgrupos, mas sim 
detectá-los. (Molisson, 1992) 
DETALHE IMPORTANTE 
Ags ABO nos recém-nascidos 
62 
 
�  Embora os antígenos ABO já estejam expressos desde 
5a. semana de vida intra uterina, o RN apresenta 
somente 1/3 dos sítios antigênicos totais de A / B. 
�  Expressão será máxima aos 2-4 anos de vida. 
� Tipagem RN: 
� Não liberar resultado como subgrupos ! 
�  (Molisson, 1992) 
 
Subgrupos A 
63 
� Subgrupos A: 
¡  Aproximadamente 80% indivíduos A/AB são 
A1; 
¡  19% A2, 
¡  1% outros subgrupos 
÷ (A3, Aint, Ael, Am, Ax, Ay,etc) 
•  (Molisson, 1992). 
Alguns indivíduos que são subgrupos de A podem formar anti-A1. 
(1-2% de individuos A2 e 25% de A2B) 
Bioline Consultoria 
O alelo A1 difere do alelo A2 devido a substituição de uma única 
base (similar nos subgrupos de B) 
Subgrupos A 
Cursos Sem Distância Bioline 
Subgrupos de AB 
- Subgrupos de AB são classificados em 9 subtipos: 
- AxB, A1Bx, AmB, A1Bm, AelB, A1Bel, 
- cis A2B3, cis A2B, cis A1B3 
 
-  A tabela sumariza a sequência de nucleotídeos nos subgrupos: 
C
adeia H
4 
A
d 
Como explicar o surgimento ocasional do 
anti-A1 em subgrupos de A? 
RN 
A TOTAL 
(A1) 
e 
Subgrupos 
Subgrupos ABO 
Bioline Consultoria 
� Fenótipo A1 # A2: 
¡  Transferase A2 (diferente qualitativamente das A1) não 
consegue ligar carboidratos nas cadeias H ramificadas 
÷ diferença quantitativa 
 
C
adeia H
4 
A
d 
Antígenos ABO - Subgrupos A 
RN 
A TOTAL 
(A1) 
e 
Subgrupos 
Transferases 
subgrupos 
H livres 
Detecção de subgrupos A 
� Utilizar lectinas (??) 
¡  anti-A1 (Dolichos biflorus) 
¡  anti-H (Ulex europeaus) 
Bioline Consultoria 
Fenótipo Anti-A1 Anti-H 
A 1 + 0 
A 2 0 + 
Subgrupos A 
� Lectina Anti-A1 : 
¡  reage somente com 
cadeia ramificada do 
antígeno A1. 
¡  P o r i s s o p o d e m o s 
u t i l i z á - l a n a 
d i f e r e n c i a ç ã o d e 
subgrupos! 
 Bioline Consultoria 
Antígenos ABO - Subgrupos de A 
A TOTAL 
(A1) 
C
adeia H
4 
A
d 
RN e 
Subgrupos 
Lectina anti-A1 
 
 
 
 
 
FENÓTIPOS 
 
 
 ANTISOROS (ANTI-) 
 
 
 ANTICORPOS NATURAIS 
 
ANTÍGENOS 
SALIVARES 
(SECRETORES) 
 
FIXAÇÃO- 
ELUIÇÃO 
C/ ANTI-A 
 
 
A 
 
 
 
 
B 
 
 
 
AB 
 
 
 
H 
 
 
 
Regulares 
 
 
Irregulares 
 
 
 
 
 
A1 
 
 
4+ 
 
0 
 
4+ 
 
0 
 
anti-B 
 
0 
 
A,H 
 
- 
 
A2 
 
 
3-4+ 
 
0 
 
3-4+ 
 
3-4+ 
 
anti-B 
 
anti-A1 (1 - 8%) 
 
A,H 
 
- 
 
 
 
A3 
 
 
(±±) 
 
0 
 
(±±) 
 
4+ 
 
anti-B 
 
anti-A1 
(possível) 
 
A,H 
 
- 
 
Ax 
 
 
0-1+ 
 
0 
 
1-2+ 
 
4+ 
 
anti-B 
 
Anti-A1 
(frequente) 
 
H 
 
- 
 
Aend 
 
 
(±) 
 
0 
 
(±) 
 
4+ 
 
anti-B 
 
anti-A1 
(possível) 
 
H 
 
- 
 
Am 
 
 
0 
 
0 
 
0 
 
4+ 
 
anti-B 
 
0 
 
A,H 
 
Positiva 
(Forte) 
 
Ay 
 
 
0 
 
0 
 
0 
 
4+ 
 
anti-B 
 
0 
 
A,H 
 
Positiva (Fraca) 
 
Ael 0 0 0 4+ anti-B anti-A1 (constante) 
H Positiva 
(Intermediária) 
 
 
 
 
 CARACTERÍSTICAS SOROLÓGICAS DOS FENÓTIPOS "A" 
 
Variantes de B 
Bioline Consultoria 
�  Subgrupos B são muito raros 
¡  B3, Bx, Bm, Bel, Bweak 
�  Caracterizam-se por fraca aglutinação das 
hemácias com soros anti-B e/ou anti-AB. 
Variantes de O 
Bioline Consultoria 
�  São vários os alelos já descritos que produzem 
enzimas O diferentes da O1. 
�  • Vale lembrar que sorologicamente nenhuma 
alteração é visível. 
¡  Portanto, estes subgrupos de O permanecem sendo 
detectados apenas por técnicas moleculares. 
 
�  Conheça a base molecular de todos os alelos 
variantes ABO: 
�  Você poderá encontrar a descrição de 180* 
alelos dos genes ABO !!!! 
�  *atualizado em JULHO DE 2015. 
�  http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/gv/mhc/xslcgi.cgi?cmd=bgmut/
systems_info&system=abo 
Subgrupos ABO 
Subgrupos ABO 
77 
� Sorologicamente: 
¡  fraca expressão antigênica na 
fenotipagem com soros anti-
A, anti-B, anti-AB* 
¡  e/ou discrepâncias entre 
prova direta e reversa 
ABO. 
E quem 
não faz 
prova 
reversa? 
Dúvidas?