RELATORIO BIOQ. DETERMIANACAO DE ACUCARES REDUTORES TOTAIS

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Data: 24/08/2016
Bioquímica Fundamental e Experimental 21106NI_1
ALUNOS: Drielli Bubniak, Jéssica Muchinski, Maria Carolina, Michele Lau e Rubéns.
DETERMINAÇÃO DE AÇUCARES REDUTORES TOTAIS
1. OBJETIVO
Montar uma curva padrão utilizando concentração de glicose e encontrar a
absorbância utilizando o método de leitura de espectro em 5400nm.
2. METODOLOGIA
Os monossacarídios (açúcares) podem ser oxidados por agentesoxidantes
relativamente suaves, tais como os íons férrico (Fe3+) ou cúprico (Cu2+).O carbono do
grupo carbonila é oxidado a carboxila. A glicose e outros açúcarescapazes de reduzir os
íons férrico ou cúprico são chamados de açúcares redutores.
Açucares redutores apresentam extremidade da cadeia carbônica comcarbonos
não impedidos para reagirem, conhecidos como carbonos anoméricos, istoé, carbonos
que não estão envolvidos em ligações glicosídicas, como por exemplo amaltose e a
galactose. A sacarose é um açucar não redutor, mas a glicose e afrutose, produtos da
degradação da sacarose, são redutores.
O fundamento do método de análise de açucares redutores da técnica realizada
em aula está na reação de oxidação-redução do açúcar com o íon cúprico.A sacarose é
um dissacarídeo composto pelos monossacarídeos da glicose e da frutose. Os açúcares
redutores possuem grupos aldeídos e cetonaslivres na cadeia e são chamados redutores
por atuarem como agentes redutores,isto é, que sofrem oxidação.
A sacarose pode sofrer hidrólise ácida e ser convertida em frutose eglicose, esta
mistura de monossacarídeos provenientes do dissacarídeo pode ser chamada de açúcar
invertido. Como pode ser visualizado na reação a seguir:
C12H22O11(sacarose) + H2O (água) = C6H12O6(glicose) + C6H12O6(frutose).
O termo invertido decorre de uma característica física da sacarose, quese altera
durante o processo de hidrólise: originalmente, um raio de luz polarizadaque incide sobre
a sacarose é desviado para a direita, ou seja, a sacarose é umamolécula dextrógira 
(D, +). 
Após o processamento de inversão, a glicose (D, +) e afrutose (L, -) resultantes
têm a propriedade conjunta de desviarem a luz para aesquerda; ou seja, o açúcar
invertido é levógiro.Na decoposição da sacarose, a fructose (pentose) e glicose (hexose)
são formadas, e essas oses em meio alcalino e sob aquecimento tornam-se fortemente
redutoras.
3. MATERIAIS E MÉTODOS
3.1 Materiais e reagentes:
10 tubos de ensaio;
Água destilada;
Pera;
Pipetas;
Banho Maria;
H2O destilada;
Solução Glicose 1g/L;
Espectrofotometro.
3.2 Métodos:
Curva padrão:
TUBOS DE ENSAIO 1 2 3 4 5 6
Amostra
Solução Glicose 1 g/L 0 0,5 1 1,5 2 1
H2O Destilada 2 1,5 1 0,5 0 1
Concentração de Glicose g/L 0 0,25 0,5 0,75 1 ?
Reação de DNS
Adicionar 1 ml de reagente DNS em cada um dos tubos;
Colocar para ferver os tubos em banho-maria a 100º por 5 minutos;
Após isso, resfriar os tubos em água corrente na torneira;
Adicionar 5 ml de H2O destilada em cada um dos tubos e fazer leitura em espectro em
5400 nm e anotar a absorbância para cada concentração de glicose.
4. RESULTADOS:
Concentração x Absorbância
TUBOS DE
ENSAIO
1 2 3 4 5
Absorbância 0,0 0,0386 0,729 1,207 1,424
Concentração 0,0 0,25 0,5 0,75 1
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
1,6
CURVA PADRÃO
5. DISCUSSÃO
Sabemos que a coloração laranja inicial do DNS pode absorver uma pequena
quantidade do espectro de luz a 540nm, por isso é necessário o uso de um tubo branco
para zerar o espectrofotômetro, garantindo que a leitura das amostras irá desprezar toda
luz absorvida por resíduos de DNS que não reagiu. Apenas com a construção de uma
curva padrão é possível associar a absorbância lida com concentrações, o mais
recomendado é que as absorbâncias das amostras estejam dentro da reta traçada pelos
padrões utilizados. 
6.CONCLUSÃO
Concluímos que podemos utilizar o espectro para encontrar a presença de grupos
redutores em açúcares e que os valores experimentais que se obtivemos neste
experimento estão dentro dos intervalos dos padrões.