CROMATOGRAFIA 1

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CROMATOGRAFIA
Profª Daniele Reineri
Apesar do estudo de Tswett e de outros anteriores que
poderiam ser considerados precursores do uso dessa técnica, a
cromatografia foi praticamente ignorada até a década de 30,
quando foi redescoberta (Kunh e Lederer). A partir daí,
diversos trabalhos na área possibilitaram seu aperfeiçoamento
e, em conjunto com os avanços tecnológicos, levaram-na a um
HISTÓRICO
e, em conjunto com os avanços tecnológicos, levaram-na a um
elevado grau de sofisticação, resultando no seu grande
potencial de aplicação em várias áreas.
Década de 40 – pratos teóricos / impulso CG
Década de 60 – CLAE ou HPLC
CONCEITOS
CROMATOGRAMA
CROMATÓGRAFO
Classificação das Técnicas 
cromatográficas
Fundamentos cromatográficos
Fundamentos de cromatografia
Troca Iônica
Fundamentos de cromatografia
Adsorção: o composto 
fica retido pela maior
afinidade
Exclusão: separação
De tamanhos específicos
Partição: Diferença de 
Solubilidade dos compostos
na FM e FE
Fundamentos de cromatografia
Fundamentos de cromatografia
Fundamentos de cromatografia
DIAGNÓSTICA: Determina o número de
componentes e indica quais são sem
necessariamente isolá-los;
PREPARATIVA: Envolve a separação dosPREPARATIVA: Envolve a separação dos
componentes da mistura, de tal modo que as
quantidades podem ser isoladas e quantificadas
(camada de adsorvente mais grossa)
QUANTITATIVA: Determina quanto esta presente
de cada componente.
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
-Aplicação: Compostos hidrossolúveis, ácidos 
orgânicos e íons metálicos;
-Princípio: partição
- Quantidade de amostra: 10-3 a 10-6g- Quantidade de amostra: 10 a 10 g
-FM: Sistema de solventes
- FE: água retida na celulose
- Análise qualitativa: Rf (fator de retenção)
- Desvantagem: reprodutibilidade
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
Como Aplicar a amostra
Ponto de Partida
Linha de Chegada
Capilaridade
Cuba Cromatográfica
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
CROMATOGRAFIA EM PAPEL - CP
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
A cromatografia em camada delgada (CCD) é uma
técnica de adsorção líquido–sólido. Nesse caso, a
separação dos componentes da mistura ocorre em
função da migração diferencial sobre uma camada
delgada de adsorvente, fixo numa superfície plana, delgada de adsorvente, fixo numa superfície plana, 
por meio de uma fase móvel (um líquido ou misturas 
de líquidos).
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
ligações
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
POLARIDADE DA FASE MÓVEL
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
1 - PREPARAÇÃO DAS PLACAS
1- Preparo por espalhamento
2- Preparo por imersão (solvente volátil)
3- Placas pré-fabricadas (Merk)3- Placas pré-fabricadas (Merk)
- Caras
- Camadas mais uniformes e homogêneas
- Melhores resultados
O maior problema no preparo da suspensão é a 
obtenção de uma viscosidade adequada para o 
espalhamento. 
Pouco viscosa: camada muito fina
Muito viscosa: camada espessa e não uniforme
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA 
DELGADA - CCD
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE 
ALTA EFICIÊNCIA – CCDAE - HPTLC
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE 
ALTA EFICIÊNCIA – CCDAE - HPTLC
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE 
ALTA EFICIÊNCIA – CCDAE - HPTLC
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE 
ALTA EFICIÊNCIA – CCDAE - HPTLC
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE 
ALTA EFICIÊNCIA – CCDAE - HPTLC
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE 
ALTA EFICIÊNCIA – CCDAE - HPTLC
APLICAÇÃO
Na área de farmácia:
-Complexidade dos componentes (análises
qualitativas). Ex: aminoácidos em vegetais, soro
sanguíneo, urina, etc.
qualitativas). Ex: aminoácidos em vegetais, soro
sanguíneo, urina, etc.
-A medicina legal estuda casos de envenenamento,
identificação de estimulantes ingeridos por
atletas.
-Reação de degradação de um produto natural
extraído de uma planta.
CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA DE 
ALTA EFICIÊNCIA – CCDAE - HPTLC
APLICAÇÕES
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
PRINCIPAL DIFERENÇA
Tamanho das partículas:
CCD: 5 a 40 µm
COLUNA: 63 A 200 µm
ADSORVENTESADSORVENTES
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA
CROMATOGRAFIA EM COLUNA