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UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA Departamento de Imunologia, Microbiologia e Parasitologia Alessandra B. Ferreira Machado Organização do genoma bacteriano e variabilidade genética A célula bacteriana Fluxo da informação gênica Genoma Informação genética de uma célula (cromossomo e plasmídeos) Estruturas contendo DNA que transportam fisicamente a informação hereditária, contém os genes Segmentos de DNA que codificam produtos funcionais DNA Nucleotídeos – desoxirribose, fosfato e base nitrogenada Dupla fita - antiparelas Fluxo da informação gênica Replicação do DNA Replicação do DNA Fluxo da informação gênica Transcrição • 3 nucleotídeos (códon) – especifica 1 aminóacido • Códon de iniciação • Códons de terminação • Código genético degenerado Tradução Tradução Tradução Tradução Tradução • Molécula de DNA dupla fita circular (maioria) • Disperso no citoplasma (nucleiode) • 1 cromossomo (maioria) • Todas as informações essenciais para a sobrevivência da célula • Tamanho do cromossomo e o número de genes - variáveis Cromossomo bacteriano Microrganismo Tamanho do cromossomo (Kb) Forma da molécula de DNA Mycoplasma genitalium 580 C Mycoplasma pneumoniae 816 C Staphylococcus aureus 2800 C Clostridium perfringens 3600 C Escherichia coli 4700 C Bacillus cereus 5700 C Pseudomonas cepacia 2500 C Borrelia burgdorferi 900 L Streptomyces 8000 L C, circular; L, linear. Tamanho e forma dos genomas Microrganismo Número de genes Mycoplasma genitalium 470 Mycoplasma tuberculosis 3924 Deinococcus radiodurans 3187 Escherichia coli 4288 Bacillus subtilis 4100 Haemophilus influenzae 1692 Borrelia burgdorferi 1751 Neisseria meningitidis 2158 Treponema pallidum 1040 Número de genes Cromossomo bacteriano e superenovelamento Superenovelamentos – introduzidos por topoisomerases I e II • Moléculas de DNA dupla fita • Circulares (maioria) • Menores que os cromossomos • Bactérias Gram positivas e Gram negativas • Carregam informação genética não essencial a célula, mas podem conferir uma vantagem seletiva, sob determinadas condições. Plasmídeos Carreiam genes que exercem profunda influência no fenótipo da célula Plasmídeo de resistência – ameaça a terapia antimicrobiana Importância biológica dos plasmídeos Mutação: alteração na sequência de bases do DNA sem aquisição de genes de outro microrganismo. Recombinação genética: alteração no genótipo que ocorre pela aquisição de material genético de outro microrganismo. Processo vertical Ocorre durante replicação cromossomo Processo horizontal Ocorre durante transformação, transdução e conjugação Variabilidade genética Mutação • Pode modificar o produto (proteína) codificado pelo gene. • As mutações podem ser: - neutras ou silenciosoas – código genético degenerado - desvantajosas – célula perde uma característica fenotípica de que ela necessita - benéficas – enzima alterada codifica pelo gene mutante possui atividade nova ou intensificada que beneficia a célula • Mutação de substituição de base – uma única base e um ponto na sequência do DNA é substituída por uma base diferente – Mutação de sentido trocado ou sem sentido Mutação Mutação Substituição de base resulta em uma substituição de aminoácidos na proteína sintetizada Mutação de sentido trocado Mutação Códon de parada –impede síntese de proteína funcional completa Mutação sem sentido Mutação Pares de bases são removidos ou inseridos no DNA, altera a fase de leitura da tradução – proteína inativa Mutação da fase de leitura Mutação Espontânea – Ocorre naturalmente sem a adição de um agente mutagênico específico, geralmente decorrente de erros cometidos pela DNA polimerase Induzida – Resultado da exposição do microrganismo a um agente mutagênico que é capaz de introduzir danos ou alterações no DNA. *físico – radiações UV *químico – nitrosoguanidina, óxido nitroso Ácido nitroso altera adenina – pareamento com a citosina em vez de timina Mutação Transformação Conjugação Transdução Incorporação de DNA livre, geralmente decorrente de lise celular Transferência de DNA de uma bactéria para outra que envolve o contato entre as duas células Transferência de material genético mediada por bacteriófago Recombinação genética Transformação Transformação Algumas bactérias são naturalmente transformáveis (competentes). Célula competente – célula receptora em um estado fisiológico capaz de captar o DNA doador. Competência – alterações na parede celular, tornando-a permeável a moléculas grandes de DNA. E. coli – não é naturalmente competente. Tratamento para induzir competência – engenharia genética Transformação Conjugação • Mediada por plasmídeo • Durante conjugação, há transferência do plasmídeo para a célula receptora Conjugação Conjugação Conjugação Transdução generalizada Mediada por bacteriófagos
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