Aula 1 Amilases 2017.1

Prévia do material em texto

Universidade Estadual de Feira de Santana 
Departamento de Tecnologia 
Curso: Engenharia de Alimentos 
Disciplina: Bioquímica de Alimentos 
Professora: Vanessa Lúcia Carneiro 
 
Aula Prática 1: Atividade de α-amilases bacteriana sobre amido de milho solúvel 
 
 
OBJETIVO 
Verificar a atividade hidrolítica da α-amilase bacteriana sobre solução de amido. 
 
MATERIAL E MÉTODOS 
a) por grupo 
 4 tubos de ensaio 
 grade para tubos 
 2 pipetas de 1 ml 
 
b) geral 
 água destilada 
 enzima alfa-amilase 
 solução de amido 
 1 pipeta de 5 mL 
 solução ácida de iodo diluída 
 1 pipeta de 2 mL 
 banho-maria a 60°C 
 2 pipetas de 1 mL 
 
 Procedimento: 
 
 Transferir 4,5 mL da solução de amido (contendo 0,1% de CaCl2) para tubos de ensaio em duplicata. 
Identificar os tubos como teste (T) e branco (B). 
 Adicionar 0,5 mL de solução enzimática no tubo teste. Adicionar 0,5 mL de água no tubo em branco. 
Agitar, gentilmente, por inversão. 
 Levar os tubos para banho de aquecimento a 60°C. Aguardar 20 minutos. 
 Enquanto isso: transferir para 2 tubos de ensaio 1,5 mL da solução ácida de I2-KI. Identificar os tubos 
(teste e branco). 
 
Depois do tempo de reação: 
 Verificar a redução de viscosidade nas soluções: 
 Transferir 0,5 mL de cada meio reacional para os tubos de ensaio contendo solução ácida de I2-KI: 
 Verificar a diferença na intensidade de coloração azul nos tubos