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RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 TEMA DE AULA: ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR OBJETIVOS DA PRÁTICA: • Realizar a hidrólise química e enzimática do amido. A amilase salivar trata-se de uma hidrolase cuja função é degradar os carboidratos. Esta é predominantemente produzida pelas glândulas parótidas e pâncreas. O amido começa a ser digerido na boca por ação da enzima α-amilase salivar (ptialina), que hidrolisa as ligações α(1→4) das cadeias do amido, dando origem à glicose, maltose e oligossacarídeos. A α-amilase salivar, em condições específicas de pH 6.8 e temperatura 37 ºC, catalisa a hidrólise das ligações da cadeia glicosídea do polissacarídeo amido. A hidrólise do amido é considerada parcial, enquanto os produtos resultantes formam uma mistura de moléculas de glicose, maltose e dextrina limite. Esta hidrólise do amido evidencia-se na presença de iodo. A velocidade das reações enzimáticas são influenciadas pela temperatura. Elas são diretamente proporcionais, ou seja, a velocidade aumenta com o aumento da temperatura, mas isso dura até que um máximo seja atingido. Este máximo demonstra a temperatura ótima para a ação enzimática; à medida que a temperatura aumenta, ocorre a desnaturação proteica, diminuindo a velocidade da reação. A variação do pH pode afetar o caráter iônico dos grupos carboxila e amina presentes na estrutura dos aminoácidos, resultando na mudança conformacional da molécula, diminuindo a ligação do substrato com o sítio ativo da enzima. QT D DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS QT D REAGENTES E SOLUÇÕES Solução de lugol 2 pipeta de vidro de 1mL Solução de amido a 1% 1 Tubos de ensaio Solução de HCl 1:2 Solução salina a 0,95% QT D MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO QT D EQUIPAMENTOS POR GRUPO Solução de saliva: secretar 1ml de saliva em um tubo de ensaio adicionar 9ml de água e misturar. Estante para tubos de ensaio Pêra de borracha Papel Toalha Descarte para pipetas Frasco com água destilada Banho-Maria Termômetro RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 Cronômetro Pinça MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO Procedimento da Hidrolise Química: • Rotular um erlenmeyer para a análise ácida (amido+HCl) • Adicionar com auxílio de uma proveta 30ml da solução de amido a 1% • Acrescentar 3ml de HCl 1:2 • Rotular três tubos de ensaio em AA1, AA2 e AA3, cada um deles contendo 5ml de água destilada. • No tubo de ensaio rotulado em AA1, em tempo 0’pipetar uma alíquota de 5ml do erlenmeyer e deixar em banho de gelo. • No tubo de ensaio rotulado em AA2 pipetar uma alíquota de 5ml do erlenmeyer, levar para o banho de água fervente em tempo 10’ e depois levar para o banho de gelo. • No tubo de ensaio rotulado em AA3 pipetar uma alíquota de 5ml do erlenmeyer, levar para o banho de água fervente em tempo 20’ e depois levar para o banho de gelo. • Retirar os tubos de banho de gelo • Quando todos os tubos estiverem em temperatura ambiente adicionar 10 gotas de sol. em cada tubo. Procedimento da Hidrolise enzimática: • Rotular um erlenmeyer para a análise enzimática (amido+sol. saliva) • Adicionar com auxílio de uma proveta 30ml da solução de amido a 1% - Acrescentar 1ml de sol. de saliva a 1% • Rotular três tubos de ensaio em AE1, AE2 e AE3, cada um deles contendo 5ml de água destilada. • No tubo de ensaio rotulado em AE1, em tempo 0’pipetar uma alíquota de 5ml do erlenmeyer e deixar em banho de gelo. • No tubo de ensaio rotulado em AE2 pipetar uma alíquota de 5ml do erlenmeyer, deixar em temperatura ambiente pelo tempo 10’ e depois levar para o banho de gelo. • No tubo de ensaio rotulado em AE3 pipetar uma alíquota de 5ml do erlenmeyer, deixar em temperatura ambiente pelo tempo 20’ e depois levar para o banho de gelo. • Retirar os tubos de banho de gelo • Quando todos os tubos estiverem em temperatura ambiente adicionar 10 gotas de sol. De lugol em cada tubo. Resultado esperado: Desaparecimento gradativo da cor azul do lugol, indicando a quebra do amido. Conclui-se a importância da padronização de uma solução para verificar a sua concentração, visto que, esta pode-se alterar e prejudicar experimentos executados com a mesma. Também pode-se concluir que, a partir desse experimento é possível calcular a concentração de soluções ácidas e básicas, neste caso do ácido clorídrico e carbonato de sódio utilizando o método da titulação. RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 TEMA DE AULA: REAÇÃO DE SELIWANOFF (REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES) OBJETIVOS DA PRÁTICA: • Identificar a presença de cetoses presentes nas soluções pela reação de Seliwanoff. • Este teste permite diferenciar aldoses de cetoses que, sob ação de ácidos fortes, são transformadas em derivados de furfural que se condensam com o resorcinol, presente no reativo de seliwanoff formando um produto vermelho de composição incerta. • A reação com cetoses é rápida e mais intensa pela maior facilidade de formação do derivado furfural. Logo, a frutose e o mel de abelha, por conter frutose reagem positivamente. Q TD DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS Q TD REAGENTES E SOLUÇÕES 1 pipetas de vidro de 5mL Reagente de Seliwanoff 4 pipeta de vidro de 1mL Ácido Clorídrico concentrado 3 Tubos de ensaio Solução de Glicose 1% Solução de Frutose 1% Q TD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO Q TD EQUIPAMENTOS POR GRUPO Mel de abelha Estante para tubos de ensaio Pêra de borracha Papel Toalha Descarte para pipetas Frasco com água destilada Banho-Maria MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 • Identificar os tubos de ensaio como Glicose (Tubo 1), Frutose ou mel de abelha (Tubo 2) e água (Tubo 3). • Pipetar para o primeiro tubo 1mL de glicose, ao segundo 1mL de frutose ou mel de abelha e ao terceiro 1mL de água destilada, que vai servir como um controle negativo, com pipetas de 1mL. • Adicionar em todos os tubos de ensaio 1,5mL de ácido clorídrico • Adicionar 0,5mL de reativo de Seliwanoff*. • Agitar cuidadosamente. Deixar em banho-maria fervente até completar a reação. Resultados esperados: • Tubo 1 (Glicose): Não há mudança do reativo indicando resultado negativo. • Tubo 2 (Frutose): Ocorre a formação de uma solução vermelha indicando resultado positivo. • Tubo 3 (Água): Não há mudança do reativo, indicando resultado negativo. De acordo com o teste do Seliwanoff, foi possivel verificar que a água destilada e a glicose não sofreram alterações. A fruse e a sacarose sofreram alterações na coloração e no teste, com medida de tempo a reação ocorreu mais rapidamente na frutose e mais demoradamente na sacarose. Um dissacarideo formado por uma Cetose e uma aldose. RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS OBJETIVOS DA PRÁTICA:• Provocar a desnaturação de proteínas em presença de ácidos fortes. Q TD DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS Q TD REAGENTES E SOLUÇÕES 1 pipeta de vidro de 5mL Solução de Ácido tricloroacético 20% 1 pipeta de vidro de 1mL Solução de ovoalbumina 10% 1 Tubos de ensaio Solução de Acetato de chumbo a 10% Q TD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO Q TD EQUIPAMENTOS POR GRUPO Estante para tubos de ensaio Pêra de borracha Papel Toalha Descarte para pipetas Frasco com água destilada MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO Procedimento: Pipetar para um tubo de ensaio 2 mL da solução de ovoalbumina. Acrescentar 1 mL da solução de ácido tricloroacético. Resultado esperado: RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 Tubo1: resultado positivo com a formação de uma solução. Procedimentos: Pipetar para um tubo de ensaio 2 mL da solução de ovoalbumina. Acrescentar 5 gotas de solução de acetato de chumbo. Observar a reação. Resultados esperados: Tubo1: resultado positivo com a formação de uma solução leitosa com precipitados brancos leitosa com precipitados brancos. RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 TEMA DE AULA: PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS OBJETIVOS DA PRÁTICA: • Correlacionar a concentração de sais neutros com a solubilidades das proteínas. Q TD DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS Q TD REAGENTES E SOLUÇÕES 1 pipeta de vidro de 5mL Solução de concentrada de sulfato de amônio (NH4)2SO4 1 pipeta de vidro de 1mL Solução de ovoalbumina 10% 1 Tubos de ensaio Q TD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO Q TD EQUIPAMENTOS POR GRUPO Estante para tubos de ensaio Pêra de borracha Papel Toalha Descarte para pipetas Frasco com água destilada MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO Procedimento: • Pipetar para um tubo de ensaio (A) 2 mL da solução de ovoalbumina. • Adicionar, pelas paredes, 2mL da solução concentrada de (NH4)2 SO4 • Pipetar para um tubo de ensaio (B) 2 mL da solução de ovoalbumina. • Adicionar, pelas paredes, 2mL da solução concentrada de (NH4)2 SO4 e 2mL de água destilada. Resultado esperado: • Tubo A: resultado positivo com a formação de uma solução leitosa com precipitados brancos • Tubo B: Sem alteração RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 TEMA DE AULA: REAÇÃO DE BENEDICT (IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES) OBJETIVOS DA PRÁTICA: • Caracterizar a presença de açucares redutores através da reação de Benedict em soluções de carboidrato. • Nas estruturas cíclicas dos monossacarídeos os átomos de carbono anoméricos (C1 nas aldoses e C2 nas cetoses) são susceptíveis de oxidação por vários agentes oxidantes contendo íons cúpricos (Cu2+) devido a presença de grupos aldeídos ou cetonas livres ou potencialmente livres. • Na reação de Benedict os íons cúpricos são reduzidos pela carbolina dos carboidratos a íons cuprosos formando óxido cuproso que tem cor vermelho tijolo. Q TD DESCRIÇÃO DAS VIDRARIAS Q TD REAGENTES E SOLUÇÕES 1 pipetas de vidro de 5mL Reagente de Benedict 3 pipeta de vidro de 1mL Solução de Sacarose 1% 3 Tubos de ensaio Solução de Glicose 1% Q TD MATÉRIA-PRIMA/INSUMO OU ANALITO Q TD EQUIPAMENTOS POR GRUPO Estante para tubos de ensaio Pêra de borracha Papel Toalha Descarte para pipetas Frasco com água destilada Banho-Maria RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA AULA 1 NOME: Leidineson de Jesus Castro Miranda MATRÍCULA: 04092635 CURSO: Biomedicina POLO: Unama Br Ananindeua PROFESSSOR Bruno Gonçalves Pinheiro DATA 10/08/2021 MÉTODO EXPERIMENTAL/PROCEDIMENTO Procedimento: • Identificar os tubos de ensaio como Glicose (Tubo 1), Sacarose (Tubo 2) e Água (Tubo 3). • Pipetar, com auxílio da pipeta de 5mL, para os três tubos de ensaio 5mL do reativo de Benedict. • Acrescentar ao primeiro tubo 5mL de glicose, ao segundo 5mL de sacarose e ao terceiro 5mL de água destilada, que vai servir como um controle negativo, com pipetas de 5mL. • Agitar até completa homogeneização. Deixar em banho-maria fervente por cinco minutos. • Observar a reação. Resultado esperado: • Tubo 1 (Glicose): A presença de um precipitado vermelho tijolo ou solução amarelo esverdeada indica a redução do cobre, possibilitando um resultado positivo. • Tubo 2 (Sacarose): Não há mudança do reativo, a cor permanece azul, indicando resultado negativo. • Tubo 3 (Água): Não há mudança do reativo, a cor permanece azul, indicando resultado negativo.
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