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Microrganismos indicadores UNIVERSIDADE CEUMA CURSO DE NUTRIÇÃO MICROBIOLOGIA DOS ALIMENTOS Conceito “Microrganismo indicadores: São grupos ou espécies de microrganismo que quando presentes nos alimentos,podem fornecer sobre a ocorrência de contaminação. INDICADOR DE CONTAMINAÇÃO Microrganismos indicadores Informações sobre: Falhas no processamento; Contaminação pós-processamento; Contaminação ambiental Nível geral de higiene do local de processamento/ armazenamento Informações sobre: Possível contaminação fecal; Possível presença de microrganismos; FRANCO e LANDGRAF, 2008 Critérios devem ser considerados NA DEFINIÇÃO DE UM MICRORGANISMO Rápida e fácil detecção; Facilmente distinguível de outros microrganismo da microbiota do alimento; Não deve estar presente como contaminante natural do alimento; Deve apresentar necessidades e velocidade de crescimento e morte semelhante ás do patógenos. FRANCO e LANDGRAF, 2008 Indicação sobre... Possível contaminação fecal; Provável presença de patógenos; Deterioração potencial do produto; Condições de higiene durante produção, armazenamento, transporte, etc...; Informações sobre falhas no processamento, contaminação pós-processamento, contaminação ambiental, nível geral de higiene do local de processamento /armazenamento. FRANCO e LANDGRAF, 2008 atenção Os microrganismos indicadores em um alimento não representam um perigo direto à saúde!! Importância prática dos indicadores 1.Contaminação fecal: indica que o alimento teve contato com sujidades, material fecal, ou seja: estão em condições insatisfatórias de higiene. Sinaliza* presença de patógenos entéricos. 2.Indicadores Gerais: matéria-prima contaminada, processamento deficiente, sinaliza presença de patógenos ou MO deteriorantes. 3.Outros Indicadores: funções específicas: higiene de manipuladores, higiene de equipamentos. Sinaliza condição inspecionada deficiente. FRANCO e LANDGRAF, 2008 Coliformes Totais Composto por bactérias da família Enterobacteriaceae – Bacilos Gram-negativos e não formadores de esporos ; São capazes de fermentar a lactose com produção de gás, quando incubados com 35-37°C por 48 horas; Escherichia coli, Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella; Apenas a espécie E. coli tem como hábitat primário o trato intestinal humano e animal Os demais podem também ser encontrados nas fezes, porém também estão presentes em outros ambientes (vegetais e solo); FRANCO e LANDGRAF, 2008 Coliformes fecais e escherichia. coli Coliformes totais que apresentam a capacidade de continuar fermentando lactose com produção de gás em 44-45°C - 90% E. coli; Em alimentos frescos – E. coli é o único indicador válido de contaminação; Em alimentos frescos de origem animal – n° de Enterobacteriaceae; Manipulação sem cuidados de higiene e/ou armazenamento inadequado. A presença de coliformes ou Enterobacteriaceae em alimentos processados: Processamento inadequado e/ou recontaminação pós-processamento – matéria-prima, equipamento sujo etc..; Pode permitir multiplicação de micror. patogênicos e toxigênicos. FRANCO e LANDGRAF, 2008 Carne moída contaminada com E. coli enterococos Pertencem ao gênero Enterococcus, com 16 espécies reconhecidas atualmente – E. faecalis e E. faecium; Também são encontrados em outros ambientes fora do trato intestinal; São mais resistentes em relação aos que vivem no solo, vegetais e em alimentos; A sua presença elevada indica práticas sanitárias inadequadas ou exposição do alimento a condições que permitiram a multiplicação de microrg. Indesejáveis. FRANCO e LANDGRAF, 2008 Indicadores gerais de contaminação do alimentos Contagem padrão (CP) São grupos de microrganismos que quando presentes em números elevados nos alimentos, poderão causar a deterioração e/ou a redução da vida de prateleira; Essas contagens fornecem informações gerais sobre as condições durante o processamento do alimento; Contagens de microrg. Que se desenvolvem em placas com meios de culturas não seletivos (ágar padrão para contagem): Contagem em placas de bactérias aeróbias mesófilas; Contagem de bactérias psicrotróficas e termófilas; Contagem de bactérias anaeróbias; Contagem de bolores e leveduras. FRANCO e LANDGRAF, 2008 Contagem padrão Contagem em placas de bactérias aeróbias mesófilas É comumente empregada para indicar a qualidade sanitária dos alimentos; Na ausência do patógeno e sem ter causado alterações nas condições organolépticas do alimento – n° elevados indica que o alimento é insalubre (exceção alimentos fermentados); A deterioração de alimentos pode ser causada pelo crescimento de microrg. que levariam a alterações organolépticas – (> 106UFC/g); FRANCO e LANDGRAF, 2008 UFC?!! Contador DE BACTÉRIAS/FUNGOS Contagem em placas de bactérias aeróbias mesófilas Motivos para seu uso, inclui: A contagem elevada em alimentos perecíveis é indicativa do uso de matéria-prima contaminada ou processamento insatisfatório; Todas as bactérias patogênicas de origem alimentar são mesófilas – elevada contagem crescendo à mesma temp. do corpo humano – Condições para sua multiplicação; Contagem de bactérias psicrotróficas e termófilas Avaliam o grau de deterioração de alimentos refrigerados; Nesse grupo podem ser incluídos os seguintes gêneros: Pseudomonas, Alcaligenes, Flavobacterium, Micrococcus E outros; Contagem de bactérias psicrotróficas e termófilas ou daqueles submetidos a tratamento térmico; Sendo os principais representantes pertencendo aos gêneros: Bacillus e Clostridium; Incluindo as espécies deterioradoras (Bacillus coagulans, Clostridium thermosaccharolyticum); Quanto espécies patogênicas (Clostridium botulinum, Clostridium perfringens). JAY, 2005 Contagem de bolores e leveduras O crescimento é mais lento do que o de bactérias em alimentos de baixa acidez e alta atividade de água – Dificilmente será responsável pela deterioração deste alimento; Em alimentos ácidos e de baixa Aa seu crescimento é maior – Provoca deterioração com grande prejuízo econômico frutas frescas, vegetais e cereais; JAY, 2005 Contagem de bolores e leveduras A sua presença é um perigo à saúde pública devido à produção de micotoxinas pelos bolores: Toxicidade aguda, crônica, mutagênica e teratogênica; Aflatoxinas, acratoxina A; Baixas contagens de bolores e leveduras são normais em alimentos frescos e congelados – não é significativo; JAY, 2005 JAY, 2005 Contagem de bolores e leveduras Medidas por manipuladores de alimentos suscetíveis a essa contaminação, na tentativa de reduzir ou eliminá-la devem tomar: Boas práticas de higiene – redução da carga de esporos; Os alimentos devem chegar o mais rápido possível ao consumidor; O armazenamento de alimentos congelados deve ser a temp abaixo de -12°C; Eliminar ou reduzir o contato com o ar através de embalagens; Adicionar ácidos ou conservantes químicos (benzoatos ou sorbatos) – retarda o crescimento fúngico; JAY, 2005 Outros indicadores Estafilococos: A presença de S. aureus é um indicativo de perigo potencial à saúde pública (Enterotoxina estafilocócica); sanificação questionável, em virtude da manipulação do alimento; Clostrídios: São formadores de esporos; Espécies importantes em toxinfecções de origem alimentar ( Clostridium perfringens e C. botulinum); Contagem de esporos termófilos: Indicadora da eficiência de sanificação de certos vegetais; Contagem de bolores em equipamentos (Geotrichum candidum): Indicadora de sanificação de operações de processamento de alimentos. JAY, 2005 O QUE ESTOU OBTENDO NA PRÁTICA AO CONTROLAR OS INDICADORES??? Possível presença de patógenos; A vida útil do produto; Raio x de um processo; Qualidade da matéria prima; Higiene dos manipuladores; Higiene da planta de processo... etc. Coliformes totais.... Como avaliar sua presença? Todos são Gram negativos Não formadores de esporos Anaeróbios facultativo Resistentes a muitos agentes surfactantes Fermentam lactoseproduzindo ácido e gás em 48h a 35 – 37°C; Para sua determinação: Teste Presuntivo: permite o enriquecimento seletivo dos coliformes. Crescimento com produção de gás no tubo de Durhan; (“Meio lactosado”) Teste Confirmativo: meio apresenta sais biliares que inibem o crescimento de microrganismos Gram positivos; A lactose é utilizada como substrato para produção de gás pelos coliformes; Crescimento com produção de gás no tubo de Durhan + (“Meio verde brilhante”) Coliformes FECAIS.... Como avaliar sua presença? Fermentam a lactose com produção de gás em 24 – 48h a 44° - 45°C; E. Coli é a mais conhecida e a mais facilmente diferenciada dos membros não fecais; Para sua determinação: O teste positivo para coliformes totais (caldo verde brilhante); Devem ser semeado em meio de cultura específico para a bactérias E. coli, que é caldo E. coli; Levar para banho-maria por 24h – 48h a uma temperatura de 44°-45°C. JAY, 2005 Teste para Coliformes Fecais 33 Contagem em placas e diluição seriada RESULTADOS Obrigado!!! referências FRANCO, B. D. G. M.; LANDGRAF, M. Microbiologia dos alimentos. São Paulo: Atheneu, 2008. JAY, J. M. Microbiologia de alimentos. 6 ed. Porto Alegre: Artmed, 2005. SANTOS, R. C. et al. Microbiologia de alimentos- Qualidade e segurança na produção e consumo. Viçosa: UFV, 2003.