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Universidade Federal Rural de Pernambuco Disciplina: Bioquímica Vegetal Professor: Levy Paes Barreto Agronomia – DEPA Bruno Krichna Santos Relatório da determinação de amido da Batata Doce Recife, 2018 Introdução O amido é pouco solúvel e de elevado peso molecular, é considerado um polímero natural, pois ele é um polissacarídeo de reserva das plantas superiores, ou seja, é um carboidrato formado pela união sucessiva de várias moléculas de α-glicose. Na realidade, ele é formado por dois polissacarídeos, amilose e amilopectina, que são constituídos de moléculas de α-glicose, mas são ligeiramente diferentes. Além disso, o amido é considerado um polímero de condensação, pois na sua formação ocorre a condensação das moléculas de α-glicose com eliminação da água. Metodologia Pesar 3,0095g da amostra, transferir para um béquer de 125mL e adicionar cerca de 50mL de água destilada; Agitar por 30 minutos em mesa agitadora orbita e em seguida filtrar lavando o resíduo com 250mL de água destilada; Transferir o resíduo para um erlenmeyer de 500mL, adicionar 200mL de água destilada e em seguida 20mL de HCl 8M; Adaptar ao erlenmeyer, um condensador de refluxo e colocar para aquecer por três horas, sob ebulição suave; Após as três horas de aquecimento, deixar esfriar e com o auxílio de NAOH 2,5M e de um papel indicador de PH, elevar o pH do meio para quase neutro; Adicionar 4mL de acetato neutro de chumbo (54,3ºBrix), homogeneizar e em seguida adicionar 6mL da mistura fosfato-oxalato; Transferir o conteúdo do erlenmeyer para um balão volumétrico de 500mL e completar; Filtrar e com o filtrado encher uma bureta de 50mL. Em seguida, zerar a bureta para posterior titulação da solução de Soxhlet; Para preparar a solução de Soxhlet, pipetar para um erlenmeyer 20mL da solução A e 20mL da solução B. Usar pipetas volumétricas nesta operação; Agitar suavemente a solução de Soxhlet referida no item anterior e, em seguida, com o uso de uma pipeta volumétrica, transferir 2 porções de 10mL, para erlenmeyers individuais, com capacidade para 250mL; Em um dos erlenmeyers contendo 10mL da solução de Soxhlet, adicionar a frio, 15mL do filtrado referido no item e colocar para aquecer em fogareiro elétrico; Marcar 60 segundos após o início da fervura, e então adicionar 3 gotas do indicador azul de metileno e continuar a titulação gota a gota, sem remover o erlenmeyer da fonte de aquecimento. O final da titulação é reconhecido pela mudança de cor azul para vermelho tijolo; Se após adicionar o indicador (item anterior), verificar que já ocorreu a mudança de cor, torna-se necessário fazer uma diluição do filtrado. Como sugestão, pipetar 35mL do filtrado para um balão volumétrico de 100mL, completar o volume com água destilada; Novamente encher e zerar a bureta com o filtrado (diluído se for o caso) e em seguida pegar um erlenmeyer contendo 10mL da solução de Soxhlet e adicionar a frio, o volume do filtrado correspondente ao que foi gasto na titulação, menos 2mL; Colocar o erlenmeyer para aquecer e, 2 minutos após o início da fervura, adicionar 3 gotas de azul de metileno e completar a titulação sem remover o erlenmeyer da fonte de aquecimento. A titulação não deve gastar mais que 1 minuto após a adição do indicador; Anotar o volume gasto na titulação e calcular a percentagem de amido na amostra analisada. Resultado Quantidade de Glicose na amostra; 29ml do filtrado -------- 50,0mg de glicose na amostra ml do filtrado --- X X= 862,0689655172 mg de glicose = 0,8620689655g Porcentagem de Glicose na amostra; 3,0095g amostra pré-seca ------- 100% 0,8620689655g de glicose ------- x X= 28,6449% de glicose Porcentagem de Amido na amostra; x = 28,6449% de glicose x 0,9 26,78% de amido Diluição da amostra; 500Ml ------ 3,0095g 35ml --------- x X = 0,2107g 29ml ------- 50mg de glicose 100ml ------ x X = 0,1724137931g Percentagem de glicose na amostra; 0,2107g ------------- 100% 0,1724137931g --- y Y= 81,83% de glicose Porcentagem de amido na amostra X = 81,83% de glicose x 0,9 73,647% de amido % Massa Seca %Amido 95,09 25,78 100 x X = 27,11% de Amido Referencias Livro Análise Química e Bioquímica em plantas, BARRETO, Levy Paes e NETO, Egídio Bezerra.
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