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Fatores extrínsecos e intrínsecos que afetam a multiplicação de microrganismos nos alimentos Profa. Clelia Picinin “A curiosidade é mais importante do que o conhecimento.” Albert Einstein » Por que alguns microrganismos crescem mais rapidamente em determinado tipo de alimento? » Por que alguns alimentos se conservam por um longo tempo? ? Alterações benéficas Capacidade de sobrevivência ou multiplicação dos microrganismos (MO) depende de diversos fatores Fatores que influenciam no desenvolvimento microbiano Fatores intrínsecos – relacionados com os alimentos: Atividade da água (Aa), acidez (pH), potencial de óxido-redução (Eh), composição química, presença de antimicrobianos naturais, interações entre microrganismos presentes. Fatores extrínsecos – relacionados com o ambiente. Umidade, temperatura e composição de gases na atmosfera que envolve o alimento. Fatores de stress microbiano pH temperatura p02 (Eh) aditivos nutrientes Aa ou Aw Fatores intrínsecos: pH É a medida de acidez ou alcalinidade em um alimento; Conceito: pH = Log negativo da concentração hidrogeniônica ou protônica. “Concentração de íons hidrogênio”; A maioria dos microrganismos multiplica melhor em pH próximo da neutralidade (6,5 a 7,5); Os microrganismos apresentam valores de pH, mínimo, ótimo e máximo para multiplicação. Microrganismos patogênicos apresentam um faixa de pH ótimo mais estreita pH de multiplicação microbiana Valores de pH para multiplicação de microrganismos Microrganismo pH mínimo pH ótimo pH máximo Bactérias 4,5 6,5-7,5 9,0 Bolores 1,5-3,5 4,5-6,8 8-11 Leveduras 1,5-3,5 4,0-6,5 8,0-8,5 Tolerância a valores baixos de pH bolores > leveduras > bactérias Faixa de pH de alguns alimentos Obs.: a carne de animais estressados (pH mais alto) deteriora-se mais rapidamente do que a carne obtida de animais descansados (menor pH). Potencial hidrogeniônico (pH) pH 4,6 é um marco abaixo do qual não há crescimento do Clostridium botulinum Classificação dos alimentos quanto ao pH Classificação dos alimentos quanto ao pH Classificação dos microrganismos quanto ao crescimento em diferentes valores de pH Neutrófilos: pH 6-8; Acidófilos: pH abaixo de 6 (fungos e bactérias); Alcalófilos: pH acima de 8 (bactérias). Efeito do pH nos microrganismos Acredita-se que o pH adverso afeta principalmente a respiração dos MO, por ação em suas enzimas e no transporte de nutrientes para a célula microbiana: Consequência: aumento da fase lag; Eles produzem compostos para contrabalancear: Ex . pH (4,0) aminoácido-descarboxilase ativadas Fatores intrínsecos: potencial de óxido-redução (Eh) Os processos de oxidação e redução estão relacionados com troca de elétrons entre as substâncias químicas; O potencial de óxido-redução pode ser definido como a capacidade de certos substratos em ganhar ou perder elétrons. O elemento que perde um elétron denominado oxidado e o que ganha, reduzido. Quanto mais oxidada maior o Eh (mais positivo) Quanto mais reduzida menor o Eh (mais negativo) A diferença de potencial pode ser medida com instrumentos apropriados em volts (v) ou milivolts (mV). Transferência de elétrons de um composto para outro gera diferença de potencial (mV) Microrganismo Eh de crescimento em mV Aeróbios + 350 a + 500 Anaeróbios + 30 a – 250 (melhor – 150) - na ausência de O2 toleram substrato com Eh elevado (+ 370) - na presença de O2 este limite cai para + 100 Anaeróbios Facultativos + 100 a + 350 Utilização do oxigênio pelos microrganismos Bolores, leveduras e muitas bactérias (Pseudomonas, B. cereus) +350 a +500mV Leveduras fermentadoras, enterobactéria, estafilococos +100 a +300mV C. botulinum, bactérias deteriorantes, C. perfringens <-150mV lactobacilos Potencial de óxido-redução de alguns alimentos O O2 atmosférico é um excelente oxidante e pode criar um Eh positivo em alimentos. Fatores intrínsecos: composição química (nutrientes) Nutrientes necessários para a multiplicação microbiana: Água; fonte de energia (carbono)- açúcar, álcool, aminoácido, amido, celulose, gordura; fonte de nitrogênio- aminoácidos, peptídeos, proteínas; sais minerais- sódio, potássio,cálcio, magnésio, ferro, cobre, manganês, fósforo, zinco, enxofre, cobalto e molibdênio; Vitaminas- complexo B, biotina, ácido pantotênico; OBS.: Gram+ não sintetizam vitaminas Gram–, bolores e leveduras sintetizam MO Mais exigentes: Gram+ > Gram- > leveduras > bolores Fatores intrínsecos: componentes antimicrobianos ANTIMICROBIANOS NATURAIS Alicina e Garlicina Aldeído cinâmico e Eugenol Eugenol Timol e Isotimol Alicina ANTIMICROBIANOS NATURAIS Lactoferrina, Lisozima, Conglutinina, Caseína Ácidos Graxos livres Lactoperoxidase Lisozima (clara de ovo) Conalbumina Ovomucóide Ovomucina Citrol-K Conservador de origem natural Elaborado a partir de extrato de semilha e polpa de grapefruit Tem ampla ação antimicrobiana: - bactérias gram-positivas; - bactérias gram-negativas; - fungos; - leveduras entre outros. Aplicações: Verduras e Hortaliças Derivados de Frutas Produtos Lácteos Carnes e Embutidos Citricidin 2000 Conservador natural de ampla aplicação Elaborado a partir de extrato de semilha e polpa de grapefruit. Tem grande poder bactericida e fungicida, atuando contra Bacillus sp., Staphylococcus sp., Streptococcus spp., Brucella sp., Escherichia coli, Klebsiella sp., Salmonella sp., Shigella sp., Candida sp., Aspergillus sp, Penicillium spp., Rhizopus sp., etc. Sucos e Néctares Carnes e Embutidos Conservas Produtos Naturais Produtos do mar Lácteos Aplicações: Fatores intrínsecos: componentes microbianos- estrutura biológica A cobertura natural de alguns alimentos constitui excelente barreira física contra a entrada dos microrganismos. • Casca de frutas; • Casca de nozes; • Casca de ovo; • Película que envolve as sementes; • Envoltórios; •Membranas; •Cera. Fatores intrínsecos: Interações entre microrganismos A multiplicação de um microrganismo pode gerar: Produtos tóxicos para outros microrganismos - água oxigenada do Streptococcus inibe Pseudomonas, Bacillus e Proteus. Produtos benéficos para outros microrganismos - tiamina e triptofano de Pseudomonas favorecem S. aureus. Fatores que controlam o desenvolvimento microbiano Fatores intrínsecos – relacionados com os alimentos: Atividade da água (Aa), acidez (pH), potencial de óxido-redução (Eh), composição química, presença de antimicrobianos naturais, interações entre microrganismos presentes. Fatores extrínsecos – relacionados com o ambiente. Umidade, temperatura e composição de gases na atmosfera que envolve o alimento. Fatores extrínsecos: Temperatura O crescimento microbiano ocorre entre - 10o e 105o C Temperatura – fator extrínseco Microrganismo ºC (T ótima de cresc.) Termófilos (Bacillus e Clostridium) 55 a 75 Mesófilos (bactérias patogênicas, alguns bolores e leveduras, deterioradoras) 30 a 45 Psicrotrófilos (Pseudomonas, Acinetobacter, Flavobacterium, Micrococcus) 25 a 30 Psicrófilos (Pseudomonas, Acinetobacter, Flavobacterium, Micrococcus) 12 a 15 Fatores extrínsecos: Temperatura Psicotróficos- 20 a 30°C - Exemplos: Pseudomonas, Alcaligenes, Flavobacterium, Micrococcus, os mais importantes em alimentos refrigerados Mesófilos- 30 a 40°C - A maioria das espécies - Maior parte dos patógenos; Termófilos- 45 a 65°C Exemplo: algumas espécies de Bacillus e Clostridium *Bolores - faixa ampla de temperatura - crescem em temperatura de refrigeração (Psicrófilos- 0 a 20°C) *Leveduras - crescem na temperatura de psicrotróficos e mesófilos. Fatores extrínsecos: umidade relativa do ambiente (UR) O alimento sempre tende a equilibrar sua umidade com a do ambiente; Há uma correlação estreita entre Aa de um alimento e a UR. A relação UR/Aa deve ser levada em conta para garantir o controle do desenvolvimento microbiano e prolongamento do tempo de armazenagem. % Fatores extrínsecos: composição gasosa do ambiente Dela decorrem os tipos de microrganismos que poderão predominar no alimento. MODIFICAÇÕES NA COMPOSIÇÃO GASOSA Uso de atmosferas controladas o 10% CO2 inibidor competitivo do etileno. Retarda o apodrecimento de frutas causado por fungos. Bom efeito na conservação de carnes. o Etileno atua como fator de amadurecimento em frutas. o Ozônio fonte oxidante. Não deve ser usado em alimentos com lipídios. o Vácuo bom efeito na conservação de carnes. Exemplo prático - O porque da importância de se conhecer os fatores... Alimento embalado a vácuo, conservado a temperatura ambiente, com pH perto do neutro, Aw=0,98.......quem pode alterar? Exemplo prático- O porque da importância de se conhecer os fatores... Alimento embalado a vácuo, conservado a temperatura ambiente, com pH perto do neutro, Aw=0,98.......quem pode alterar? R.: Bactérias mesófilas anaeróbias e anaeróbias facultativas. Perigo identificado... e por esse conhecimento vai se identificando os perigos biológicos de um alimento.... Referências JAY, J. M. Microbiologia de alimentos. 6 ed. Porto Alegre: Artmed, 2005. MASSAGUER, P. R. Microbiologia dos processos alimentares. São Paulo: Varela, 2005. FRANCO, B. D. G de M.; LANDGRAF, M. Microbiologia dos alimentos. São Paulo: Atheneu, 2008.
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