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@leticiarbarbosa Tecnologia e Inspeção de Leite e Derivados Fatores que afetam o desenvolvimento microbiano em alimentos Introdução - todos os alimentos possuem uma microbiota natural extremamente variável; - mais concentrada na região superficial; - é possível encontrar também nas áreas mais internas; - bactérias, bolores e leveduras: microrganismos de maior destaque; - agentes potenciais de deterioração; - eventuais patógenos do homem; - nas etapas para obter produtos processados, os alimentos estarão sujeitos à contaminação por diferentes microrganismos provenientes da manipulação inadequada; - contaminação: contato com equipamentos, superfícies e utensílios não sanificados de forma correta, atmosfera ambiental; - a definição dos grupos de microrganismos que predominam no alimento e o desenvolvimento irá depender de fatores intrínsecos (características inerentes a esse alimento) e fatores extrínsecos (condições ambientais prevalentes); - as bactérias são microrganismos que mais prevalecem nos alimentos pois, diferente dos outros microrganismos, elas conseguem realizar sua multiplicação em muito pouco tempo (a cada 20 minutos, há geração de bactérias). Além disso, as bactérias utilizam uma diversidade de substratos muito grande e possuem ampla variação de comportamento frente a fatores ambientais. Velocidade de crescimento microbiano - existem situações em que as características intrínsecas e extrínsecas inibem ou impedem o desenvolvimento bacteriano, sem afetar com a mesma intensidade as leveduras e bolores. Fatores que controlam o desenvolvimento microbiano nos alimentos - alimento: possui uma riqueza de nutrientes, constituindo um substrato ideal para os microrganismos, causando deterioração do alimento, infecção ou intoxicação alimentar; - formas de controle: controle higiênico e sanitário, processos físicos (calor, dessecação, desidratação), atuar nos fatores que irão influenciar no desenvolvimento; - por que alguns microrganismos crescem mais rapidamente em determinado tipo de alimento? Por que alguns alimentos se conservam por um longo tempo? Isso tem a ver com a capacidade de sobrevivência ou multiplicação (fatores intrínsecos e extrínsecos). Alimento (intrínsecos): - pH (acidez); - atividade de água (aw); - potencial de óxido-redução (Eh); - composição química (nutrientes); - fatores antimicrobianos; - estrutura biológica. Ambiente (extrínsecos): - temperatura; - umidade; - composição química da atmosfera (gases). Fatores intrínsecos pH: - potencial hidrogeniônico ou de hidrogênio; @leticiarbarbosa - concentração de íons de hidrogênio (H+) livres; - 0 a 14; - acidez, neutralidade, alcalinidade; - a maioria dos microrganismos crescem melhor em pH próximo da neutralidade (6,5 a 7,5); - os microrganismos apresentam valores de pH mínimo, ótimo e máximo para sua multiplicação; - > [ ] de H+ < pH > acidez do alimento; Faixa de crescimento Valores de pH de alguns alimentos Efeito do pH no crescimento microbiano - alimentos pH > 4,5: alimentos mais sujeitos ao crescimento microbiano (bactérias); - alimentos pH entre 4,0 e 4,5: crescimento de bolores e leveduras, poucas bactérias (lácticas e espécies de Bacillus); - alimentos pH < 4,0: crescimento de bolores e leveduras; - maior tolerância a valores baixos de pH: bolores > leveduras > bactérias; - microrganismos patogênicos apresentam uma faixa mais estreita de pH; - quanto mais ácido o meio, menor o crescimento de microrganismos; - efeitos dos ácidos nos microrganismos: maior gasto de energia para manter pH intracelular, desnaturação de proteínas, menor velocidade de crescimento. Atividade de água (aw): - medida da água disponível “livre” para o crescimento microbiano; - microrganismos necessitam de água livre para suas atividades metabólicas; - quanto maior a atividade de água, maior a presença de microrganismos; - varia de 0 a 1; - cada alimento tem seu valor específico; - redução de atividade de água no alimento: adição de soluto, remoção da água, desidratação, congelamento; - microrganismos apresentam: aw mínima, aw ótima, aw máxima; - 0,60: valor limite de aw para multiplicação de qualquer organismo. Grupo Aw Bactérias deterioradoras 0,9 Leveduras deterioradoras 0,88 Bolores 0,8 Bactérias halófitas (se desenvolvem em meio com alta [ ] de sal) 0,75 Bolores xerofílicos (se desenvolvem mais em ambientes secos) 0,65 Leveduras osmofílicas (se desenvolvem em ambientes de alta pressão osmótica) 0,61 @leticiarbarbosa Potencial de óxido-redução (Eh): - facilidade com que determinado substrato ganha ou perde elétrons; - quanto mais oxidada uma substância, mais positivo será seu potencial elétrico; - substrato perde elétrons: oxidado; - substrato ganha elétrons: reduzido; - oxigênio é o fator que mais contribui para o potencial redox de um alimento; - microrganismos variam no grau de sensibilidade ao potencial redox do meio de multiplicação e podem, de acordo com o Eh requerido, ser divididos em grupos; - aeróbios: exigem Eh positivo para crescer, ou seja, obtenção de energia através de nutrientes (presença de oxigênio obrigatória). São eles bolores, Pseudomonas, Actinobacter, Moraxella, Micrococcus, algumas espécies de Bacillus e leveduras oxidativas; - anaeróbios: requerem Eh negativo para crescer (ausência de oxigênio). O oxigênio chega a ser tóxico para a célula, pois gera produtos que são letais ao microrganismo. O gênero Clostridium compreende o gênero anaeróbio; - aeróbios facultativos: se multiplicam em Eh positivo e negativo, sendo representados pelas leveduras fermentativas, enterobactérias e Bacillus; - microaerófilos: se multiplicam melhor em Eh baixo. As bactérias lácticas se encontram neste grupo. Potencial de óxido-redução (Eh) dos alimentos - verifica-se, portanto, que este é um fator de importância a ser utilizado na preservação de alimentos e que determina também quais tipos de microrganismos irão de desenvolver em determinados alimentos; - por exemplo, pode-se utilizar embalagens impermeáveis ao oxigênio, o uso de vácuo, entre outras, para se controlar os microrganismos. Composição química: - nutrientes necessários para a multiplicação microbiana: água, fonte de energia (carbono), fonte de hidrogênio, vitaminas, sais minerais, energia, nitrogênio, vitaminas, minerais; - microrganismos mais exigentes quanto aos nutrientes: Gram-positivas, Gram-negativas, leveduras, bolores. Constituintes antimicrobianos (naturais): - substâncias que apresentam a capacidade de retardar ou impedir a multiplicação microbiana. Substâncias produzidas por microrganismos - substâncias adicionadas ao alimento: ácidos, nitratos e nitritos, dióxido de enxofre e sulfitos, nisina. Alimento Eh (mV) Frutas frescas e vegetais 300 a 400 Carnes em grandes pedaços -200 Carne moída 200 Queijos -20 a -200 Substância Alimento Eugenol Cravo, canela Alicina Alho Aldeído cinâmico Canela Timol e isotimol Orégano Lisozima Clara de ovo Lactoferrina Leite Sistema lactoferrina - lactoperoxidase - tiocianato e H2O2 Leite Substância Microrganismo Ácido propiônico Bactéria propiônica Ácido lático Bactéria lática Álcool Levedura Antibiótico Bolores Bacteriocinas Especialmente bactérias Gram- positivas Água oxigenada Estreptococos e lactobacilos @leticiarbarbosa Estruturabiológica: - estrutura física que os protege da entrada e crescimento de microrganismos, incluindo os patogênicos; - casca de frutas, casca de nozes, casca de ovo, película que envolve sementes. Fatores extrínsecos Temperatura: - psicotróficos: Alcaligenes, Micrococcus; - mesófilos: a maioria das espécies. Maior parte dos patógenos; - termófilos: algumas espécies de Bacillus e Clostridium; - bolores: faixa ampla de temperatura. Crescem melhor em temperatura de refrigeração; - leveduras: crescem na temperatura de psicotróficos e mesófilos. Umidade relativa do meio: - influencia diretamente a atividade de água do alimento; - se um alimento com baixa atividade de água está armazenado num ambiente com alta umidade relativa, a aw deste alimento aumenta, permitindo a multiplicação de microrganismos; - combinação entre umidade relativa e temperatura; - quanto maior a temperatura de armazenagem, menor a umidade relativa, e vice- versa. Composição gasosa: - o dióxido de carbono (CO2), o ozônio (O3) e o oxigênio (O2) são gases diretamente tóxicos para alguns microrganismos; - a oxidação gerada pelo ozônio e pelo oxigênio são altamente tóxicas para bactérias anaeróbias e podem ter um efeito inibidor nos aeróbios dependendo da sua concentração; - por sua vez, o dióxido de carbono é eficaz a microrganismos aeróbios, podendo, em altas concentrações, inibir outros microrganismos; - presença de O2: aeróbios, facultativos; - ausência de O2: anaeróbios, facultativos; - atmosfera modificada: substituição parcial ou total do O2 por outros gases. CO2 retarda a deterioração de frutas e carnes. Teoria dos obstáculos Se conseguir controlar todos os fatores acima citados, chega-se a conservação do alimento. Microrganismo T ótimo (oC) T máximo (oC) T mínimo (oC) Psicotróficos 20 – 30 35 0 – 5 Mesófilos 30 – 40 5 – 25 40 – 50 Termófilos 45 – 65 60 – 90 35 – 45
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