Testes bioquimicos BGN Aula 15 (1)

Prévia do material em texto

Provas Bioquímicas para Identificação 
de Bacilos Gram-Negativos
Prof. Ms. Tércio Lemos de Morais
Email: Terciotms@uni9.pro.br
Plaqueamento seletivo 
• É a etapa de isolamento bacteriano a partir
do espécime clínico:
• Meios seletivo-indicadores como o Agar EMB
(azul de metil inibe BGP).
• As bactérias Gram negativas (LAC+)
apresentam colônias rosa-avermelhadas.
• As não fermentadoras (LAC-) formam
colônias transparentes.
Ágar EMB: AGAR EOSINA AZUL DE METILENO 
Confirmação Bioquímica 
• É um conjunto de provas bioquímicas necessárias para a identificação
das colônias suspeitas.
São meios de cultura sólidos
ou líquidos distribuídos em
tubo de ensaios ou em
diferentes modalidades de kits
Provas Bioquímicas 
• Os testes mais utilizados na rotina dos laboratórios de
microbiologia:
• Meio EPM – Escola Paulista Medicina = Fornece quatro reações
bioquímicas:
• Produção de gás - Avalia a produção de gás CO2 a partir da glicose;
• Produção de H2S - Avalia a produção de H2S (Sulfureto de hidrogênio) a
partir de compostos sulfurados inorgânicos.
• Hidrolise da ureia – Avalia a habilidade de um microrganismo utilizar a ureia
e formando amônia.
• Desaminação do triptofano: Aparecimento de cor verde-garrafa na superfície
do meio.
Provas Bioquímicas 
• Meio MILi – Motilidade, Lisina e Indol
• Motilidade - O teste visa verificar se a bactéria é móvel ou imóvel. Logo pode
ajudar na diferenciação de alguns gêneros como por exemplo Enterobacter
(usualmente +) e Klebsiella (-).
• Descarboxilação de lisina: Este teste visa determinar a capacidade de
descarboxilar a lisina, por ação da enzima lisina descarboxilase.
• Produção de indol: Este teste tem como princípio determinar a habilidade de
um microrganismo em produzir indol a partir da molécula de triptofano.
• Pode ajudar na diferenciação de alguns gêneros de bactérias como, por exemplo: E. coli
(usualmente +) do grupo Klebsiella-Enterobacter (-).
INDOL Motilidade
Provas Bioquímicas
• Citrato de Simons:
• Este teste visa determinar se um microrganismo é capaz de utilizar citrato
como uma única fonte de carbono para o seu metabolismo, resultando em
uma alcalinidade no meio.
• As bactérias citrato positivas crescem usando sais de amônia como fonte de
nitrogênio, liberando amônia e consequentemente deixando o meio alcalino.
O indicador de pH é o azul de bromotimol, que em meio ácido fica amarelo e
em meio básico, azul.
Procedimento
• Tocar a colônia com agulha bacteriológica e semear os 3 meios na
seguinte ordem: Citrato, EMP e MILi. Para inocular o :
• meio de citrato deslizar a agulha pelo centro estriando toda a superfície
inclinanda.
• No meio EPM introduzir a agulha até o fundo do tubo e ao retirá-la semear a
superfície do meio enquanto
• O meio MILi deve ser semeado por picada central que deve atingir o fundo do
tubo.
SISTEMA NUMÉRICO PARA ENTEROKIT B
• As 9 reações bioquímicas do Enterokit B foram agrupadas em 3
conjuntos de provas. O resultado de cada um destes conjuntos
produz um algarismo, de modo que o resultado dos 3 conjuntos
produz um número de 3 dígitos, que identifica uma espécie
bacteriana.
SISTEMA NUMÉRICO PARA ENTEROKIT B
SISTEMA NUMÉRICO PARA ENTEROKIT B
FIM