Aula Prática 6

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Aula Prática 6: Determinação de BRIX e Fermentação Alcoólica
Determinação de Grau Brix
Uma das variáveis agroindustriais mais facilmente determinadas em laboratório ou mesmo em campo, é o Brix. Quando se trata de cana madura existe estreita relação entre essa porcentagem e o conteúdo de sacarose na solução. A cana é considerada madura com Brix mínimo de 18° entre outros fatores. Por consenso, admite-se o Brix como sendo a porcentagem de sólidos solúveis contidos em uma solução açucarada, ou seja:
1° BRIX corresponde a 1 g de sólidos dissolvidos em 100 g de solução à 20°C
Sendo a sacarose um dos sólidos do caldo (80-90%), o aumento do seu conteúdo acaba por resultar em aumento do Brix do caldo. Portanto, em soluções com alto teor de açúcares, como por exemplo o melaço, o valor do °Brix é uma medida aproximada do teor de açúcares presentes no meio.
A medida do Brix pode ser feita através de refratômetro ou pelo Sacarímetro de Brix. A escala do Sacarímetro de Brix varia de 0 a 90º Brix com divisões de 0,1 / 0,2 / 0,5 e 1ºBrix.
Objetivo: Determinar o teor de sólidos dissolvidos no caldo de cana, através da medida em refratômetro, então preparar uma solução de 14º Brix com o caldo de cana; utilizando o Diagrama de Cobenze
Exemplo para o Diagrama de Cobenze.
Brix desejado para o mosto (M) 14º. Caldo inicial (a) 17,3ºBrix e (b) água
 
(a) Caldo 17,3º Brix  (a) 14 - 0 = 14 g de caldo
 
 (M) 14o Brix (desejado) 
(b) Água 0o Brix (b) 17,3 - 14 = 3,3 g de água
Densidade do caldo = 1,06 g/mL Densidade da água = 1g/mL
 
d = m/v, então v = m/d 
v = 14/1,06 = 13,2 mL de caldo 
v = 3,3/1 = 3,3 mL de água
Quantidade de mosto = Volume de caldo + Volume de água 
Quantidade de mosto = 13,2mL + 3,3mL = 16,5mL
Se em 16,5 mL de mosto temos 13,2 mL de caldo, em 500 mL temos x: 
16,5 mL ----------- 13,2 
 500 mL ----------- x
x = 400 mL de caldo, portanto 100 mL de água
Fermentação alcoólica
Material por equipe
	Material
	Equipamento
	Reagente
	1 proveta de 500 mL
2 Becher de 50 ou 1000 mL 
Bastão de vidro
Garrafa PET
Mangueira para saída de gás
2 Tubos de centrífuga (20mL)
Papel filtro
2 Tubos de ensaio
Cubetas
	Balança analítica
Refratômetro
Alcoômetro
Densímetro
Espectro UV/vis
Sistema de filtração à vácuo
Banho
	Fermento biológico
Caldo de cana de açúcar
Açúcar
Objetivo: Produzir etanol utilizando caldo de cana como matéria prima e observar as fases da fermentação alcoólica.
Fermentação:
Aula 1:
Pesar o fermento biológico prensado em béquer para ter um total de 5g/L de fermento no caldo de fermentação inicial.
Medir o Brix do caldo e diluir ou concentrar com açúcar para que fique com aproximadamente 14º Brix; anotar o valor do Brix utilizado pela equipe. 
Pesar uma garrafa PET vazia; transferir 500 mL de caldo de cana com 14ºBrix para a garrafa PET, e pesar (a diferença de peso é o peso do caldo);
Acrescentar o fermento biológico previamente pesado promover a homogeneização, e retirar uma amostra de 20 mL (Amostra 1); então adaptar à tampa da garrafa uma saída com mangueira e colocar em um béquer com água
Colocar o sistema em banho à 30ºC.
Deixar que a fermentação ocorra. Observar a saída de CO2.
Aula 2:
Após a fermentação, homogeneizar o sistema abrir e retirar uma amostra de 20mL (Amostra 2).
Filtrar o caldo (filtração à vácuo);
Colocar o filtrado em uma proveta e determinar a concentração alcoólica em graus Gay Lussac (%álcool v/v). (por exemplo: 15º GL: 15mL de álcool em 100mL de solução)
Determinação analítica:
As amostras 1 e 2 serão centrifugadas e com o sobrenadante deve-se analisar o Brix (um grau Brix é 1g de sólidos dissolvidos em 100g do meio). Determinação do substrato consumido.
Com o precipitado adicionar 20mL de água homogeneizar e ler no espectrofotômetro à 570nm (o branco é água); usar a curva de calibração da aula 3. Determinação da biomassa formada.
Com o caldo filtrado determinar a quantidade de álcool obtido. Determinação de produto obtido.