Microcopia eletrônica

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Microscopia Eletrônica 
Prof. José Lino Neto – UFV
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Microscópio de Luz
- Cortes -
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Microscópio de Luz
- superfície -
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Microscópio de Luz - ML
Microscópio Eletrônico de Transmissão - MET
Microscópio Eletrônico de Varredura - MEV
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ML: 
  1.000x
  0,2 µm
MET: 
  500.000x 
  0,0002 µm
MEV: 
  10 a 150.000x
  0,02 µm 
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MET
MEV
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Epitélio da mucosa intestinal
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



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 Filamento
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 Filamento
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 Canhão de elétrons
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 Canhão de elétrons
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Lentes magnéticas
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Lentes magnéticas
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 Câmara
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Câmara e porta-amostra
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Porta amostra - stubs
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Formação da imagem
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 Análise da imagem
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Preparo do material
Fixação
Desidratação
Secagem ao ponto crítico
Montagem nos suportes - Stubs
Sputter coat
MEV
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Protocolo
1-   Fixar em solução de glutaraldeído e/ou paraformaldeído em tampão 	 	cacodilato de sódio (ou fosfato) a 0,1M (animal) ou 0,05M (vegetal) em pH 7,2. 	Tempo: 2 a 24 hs.
2-    Lavar por 1-2 hs em vários banhos do tampão;
3-    Pós-fixar em tetróxido de ósmio por 1 h ao abrigo da luz; 
4-    Lavar em 2 banhos de 15 min em tampão caco, ou água destilada;
5-    Desidratar as peças, mantendo-as submergidas, em serie crescente de 	 	etanol ou acetona (50%  70%  80%  95%  100%). Cada etapa 	 	deve ser feita em dois banhos de 15 min cada; 
6-    Ponto crítico;
7-    Montar as peças secas nos stubs; 
8-    Sputter coat para proceder a cobertura com ouro. 
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Ponto-crítico
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Sputter coat
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“slide show”
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“slide show”
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“slide show”
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“slide show”
Organelas celulares
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“slide show”
Dinoflagelados
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“slide show”
Cultura de células
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“slide show”
Superfície foliar de Corymbia citriodora
Espinha de ouriço
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“slide show”
Espermatozóides de hamster
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“slide show”
Ammoplanops moenkopi (Sphecidae Pemphredoninae)
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“slide show”
Dryudella montana (Sphecidae: Astatinae)
Eucerceris superba (Sphecidae Philanthinae)
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“slide show”
Epitélio traqueal
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“slide show”
Pata de lagarta
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“slide show”
Antena de Lepidoptera
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“slide show”
Esporo de um fungo
Detalhe da para de um inseto
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“slide show”
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Fig. 1
Objetiva = 40x
Optovar = 3,5x
Ampliação = 15x
Fig. 2
Objetiva = 20x
Optovar = 3,5x
Ampliação = 15x
Fig. 2
Objetiva = 100x
Optovar = 3,5x
Ampliação = 15x