Helicobacter pylori Bacterias de interesse medico ( Especialização)

Prévia do material em texto

Principais estudos 
Barry J. Marshall e J. Robin Warren desde 1981 
Importância histórica do microrganismo: 
Agente etiológico de úlcera gástrica ou 
duodenal 
Adenocarcinoma gástrico 
 
Distribuição na população 
Países em desenvolvimento: colonização precoce e alta 
incidência 
 taxa de câncer elevada 
 
Países desenvolvidos: colonização tardia e incidência mais 
baixa 
 taxa de úlcera elevada 
http://www.tumblr.com/tagged/helicobacter%20pylori 
 Úlcera gástrica: causada por estresse e 
tratada com anti-ácidos e dieta rigorosa. 
 O tratamento não previa a recorrência. 
 
 
 
 
 
O patógeno não respeitava os Postulados de Koch: 
 
1. O patógeno deve ser detectável em hospedeiros 
infectados em todos os estágios da doença. Não deve ser 
encontrado em sadios 
 
2. Deve ser isolado do doente e cultivado em cultura pura. 
 
3. Quando susceptíveis, animais saudáveis que forem 
infectados com o patógeno em cultura pura devem 
desenvolver os sintomas específicos. 
 
4. O Patógeno deve ser reisolado do animal infectado e este 
corresponder ao inoculado em cultura pura. 
 
 
 Pessoas colonizadas pela bactéria não tinham a 
doença. 
 Falta de um modelo animal 
 Modelo humano? Como tratar depois? 
 Quem seria o louco? 
 
 Preparou uma suspensão bacteriana turva e 
bebeu. 
 Efeitos: poucas horas depois...aumento do 
estômago. 
 1 semana depois...náuseas, fome e cansaço. 
 Fim da 2a semana...inflamação na mucosa 
gástrica e a bactéria detectada na mucosa. 
 Recuperação...espontânea 
 Resultado... 
 
 A crítica não se sensibilizou com o experimento: Ele era 
muito jovem e vinha de um hospital com pouca 
reputação acadêmica. 
 Em 1991 o CDC declarou existir uma ligação entre 
H.pylori e a úlcera gástrica. 
 Em1994 o Instituto Nacional de Saúde (EUA) declarou 
que a maioria das úlceras gástricas recorrentes eram 
causadas por H.pylori. 
 Em 2005... 
 
Prof. Marco Miguel - UFRJ - IPPMG - 
DMM - LMA 
 Gênero: 19 espécies 
 Bacilos espirais ou curvos 
 0,3 – 0,1µm de largura 
 1,5-10µm comprimento 
 Gram negativos 
 Não esporulados 
http://www.tumblr.com/tagged/helicobacter%20pylori 
 Móveis com flagelos com bainha 
 Apenas H. pullorum e H. rodentium não 
possuem bainha 
 
http://fineartamerica.com/featured/2-helicobacter-pylori-bacteria-ab-dowsett.html 
Metabolismo 
 Respiratório obrigatório 
 Microaerófilo 
 Fastidioso 
 Fonte de C: glicose, aa, ács. Orgânicos 
 Produzem a maioria dos aa e vitaminas 
necessários 
 pH intracelular: 7,0-7,3 
http://www.tumblr.com/tagged/helicobacter%20pylori 
Genética 
Foi o primeiro microrganismos a ter seu 
genoma seqüenciado. 
“Problemas” comerciais trouxeram novas 
situações. 
 
Prof. Marco Miguel - UFRJ - IPPMG - 
DMM - LMA http://www.tumblr.com/tagged/helicobacter%20pylori 
 Reservatórios 
 Entérico: Trato intestinal baixo, I. delgado, 
colon, reto, trato hepatobiliar de mamíferos e 
pássaros. 
Outros: ramster, cães, 
Existe a transmissão de animais para humanos 
em algumas espécies. 
 
http://www.tumblr.com/tagged/helicobacter%20pylori 
http://www.infoescola.com/sistema-digestivo/estomago/ 
 Furão, Camundongos 
 Porcos da índia gnotobióticos 
 Cão Beagle ou Gerbil da mongólia 
Prof. Marco Miguel - UFRJ - IPPMG - 
DMM - LMA 
 Alta eficiência na motilidade 
 Forma curva 
 Mucinase 
 Bainha do flagelo 
 Produção da enzima urease 
 Citotoxinas 
 Adesinas 
 Lipopolisacarídio (LPS) 
 http://www.tumblr.com/tagged/helicobacter%20pylori 
 Parentes? 
 Água e alimentos contaminados? 
 Fuga do suco gástrico 
e proteção sob a Mucina 
◦ Motilidade 
◦ Flagelo com bainha 
◦ Produção de urease 
 
 
 
 Localização da urease: intracelular 
 Importação da uréia ou efeito pela lise da 
bactéria 
 
 Tem ação inflamatória na mucosa gástrica 
 Determinam a produção de Acs anti-urease 
Urease 
 Eficiência da motilidade 
 Em pacientes infectados a 
bactéria fica principalmente na 
camada de mucina e não 
intimamente aderida 
 A bactéria produz adesinas, que 
se ligam a açúcares sulfatados 
da mucina 
 Infiltração de PMNs e linfócitos T e B na 
submucosa. 
 Ferramentas: 
 Citotoxina Vacuolante (VacA) 
 Citotoxina Associada ao gene A (CagA) 
 Injetada nas células hospedeiras causa desregulação do 
crescimento celular 
 Proteína ativadora de neutrófilos (NAP) 
 
 
 
 Produz adesinas que aderem a células epiteliais 
(Bab A) 
 Estas intimamente aderidas são responsáveis pela 
resposta inflamatória na úlcera. 
 BAb A é encontrada em apenas algumas estirpes. 
 Acredita-se que a inflamação favoreça a bactéria 
 Destrói células que liberam nutrientes 
 A dieta do hospedeiro também pode ajudar. 
 
 
 Baixa toxicidade e efeito pirogênico 
 Contém moléculas de carboidratos idênticas 
às encontradas na superfície do epitélio 
gástrico (Ag Lewis x e y) 
 Havendo resposta imune os Acs podem atuar 
contra o epitélio do hospedeiro. 
 Pacientes infectados têm Acs que reagem 
com Ags do tecido da mucosa gástrica 
Baseado na detecção da urease e seus produtos 
 Teste da Urease pré-formada 
 
 
 
 
Prof. Marco Miguel - UFRJ - IPPMG - 
DMM - LMA 
Teste respiratório: Uréia marcada com 13C, 14C 
 
Ureia marcada 
Detecção do microrganismo 
 Cultura (padrão ouro) 
 Importância: 
◦ CO2 (5-10%) 
◦ O2 (5-10%) 
◦ Nitrogênio (90-80%) 
◦ 37º C 
◦ Elevada umidade 
◦ 5-7 dias 
◦ Meios ricos com sangue ou soro 
◦ (BHI, Brucella, Colúmbia, Skirrow) 
 Detecção de anticorpos anti-H.pylori 
 Detecção de anticorpos anti-urease 
 Amplificação do DNA (PCR) 
 
 
 
 Cultivo de biópsias gástricas e duodenais; 
 Transporte rápido em (3 horas); 
 As amostras devem ser mantidas úmidas ( 
solução fisiológica isotônica estéril); 
 A amostra deve ser macerada; 
 As placas são semeadas em ambientes 
úmidos a 37º C; 
 Microaerofilia; 
 Crescimento de 3-5 dias. 
Usar meio base para sua preparação: Mueller Hinton ou ágar Columbia. 
Após a esterilização, deixa-se esfriar até mais ou menos 45-50ºC para 
então ser adicionado cerca de 5-8% de sangue desfibrinado de carneiro 
(preferencialmente). Verter em placas de petri. Após a preparação o 
meio de cultura possui cor vermelha característica. 
 Pequenas, acinzentadas,translúcidas, e 
fracamente β-hemolíticas; 
 O Gram mostra bactérias pálidas, curvas; 
 Gram-negativas; 
 Característica de asa de gaivota ou U. 
http://biomedicinaemicro.blogspot.com.br/p/meios-de-cultura.html; http://www.helicobacterspain.com/imagenes/placa.htm 
http://www.tumblr.com/tagged/helicobacter%20pylori 
 Provas positivas: 
 Catalase. 
 Oxidase. 
 Catalase (+); 
 Nitrato(-); 
 Sulfeto de hidrogênio em ágar tríplice-
açucar- ferro(-); 
 Urease(+); 
 Acetato de indoxila(-); 
 Hipurato(-) 
 Crescimento: 
 25ºC (-) 
 37º C (+) 
 42º C (C) 
 MACCONKEY (-) 
 TMAO (óxido de trimetilamina) (-) 
 Glicina 1%: (V) 
 Ácido nalidíxico: (R) 
 Cefalotina: (S) 
 Principais antimicrobianos: 
 Metronidazol, (nitroimidazol), Claritromicina 
(macrolídeo) 
 Inclui também um antiácido: inibidor da 
bomba de próton ou antagonista de H2 
 (omeprazol) 
 Diferentes esquemas de tratamento 
 Vantagens 
 
Classes de drogas usadas no tratamento de H. pylori 
 
Classe da droga 
Nomeda droga 
Antibioticos Amoxicilina, Claritromicina, Metronidazol 
(Flagil), Tetraciclina 
Bloqueadores de H2 Cimetidina (Tagamet), Famotidina (Pepcid), 
Nizatidina, Ranitidina (Zantac) 
Inibidores da bomba de proton (PPIs) Esomeprazol, Lansoprazol (Prevacid), 
Omeprazol , Patoprazol, Rabeprazol 
Agente citoprotetor Bismuto, sucralfato 
Combinação de produtos Helidac, Prevpac 
Prof. Marco Miguel - UFRJ - IPPMG - 
DMM - LMA 
Esquema de tratamento de H. pylori 
 Preventiva e terapêutica 
 Bons resultados em modelo animal 
 Problemas com o uso em humanos 
◦ Precisa de várias doses; Proteção incompleta 
◦ Rota de imunização: oral, retal, intranasal 
◦ Diversidade genética do microrganismo 
◦ Reação cruzada com estruturas do corpo… 
...é realmente seguro erradicar o microrganismo? 
Um dogma que cai... 
Um Prêmio Nobel 
H. pylori: Um microrganismo “diferente” 
Erradicar ou não? 
Problemas genômicos... 
•1ª venda de seqüenciamento 
•1º duplamente seqüenciado 
Flagelo e LPS incomuns 
KONEMAN, E.W.; ALLEN, S.D.; JANDA, W.M.; 
SCHRECKENBERGER, P.C.; WINN, 
W.C. Color Atlas and Textbook of Diagnostic 
Microbiologic. 5th. Ed. Philadelphia: 
Lippincott, 1997, 1395p. 
 MURRAY, P.R.; BARON, E.J.; JORGENSEN, J.H.; 
PFALLER, M.A.; YOLKEN, R.H. 
Manual of clinical microbiology. 8th ed. 
Washington, DC: ASM-Press, 2003. vol 1, 
1212 p.