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Papanicolau 
Coloração
Faculdade Santa Maria Disciplina Citopatologia
Profa. Alexsandra Laurindo
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Fixação
Fixador- mantém a forma e a estrutura dos elementos constituintes das amostras para estudo citológico. Evita o dessecamento (deforma as células e altera as afinidades tintoriais)
- O fixador recomendado para preparações citológicas é 
o etanol absoluto ou etanol a 95% devido à sua eficiência, baixo custo e ausência de toxicidade.
- Fixadores tipo spray - o álcool usado nestes fixadores não é o etanol, mas sim um de seus substitutos.
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Fixação com álcool
O mais utilizado é o etanol a 95%
Fixação imediata 
Tempo de fixação: 15 a 30 minutos
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Fixação com aerossol
Consiste em álcool isopropílico (fixador) e o polietilenoglicol (filtro protetor)
Risco de enxotar as células da lâmina, de lesá-las ou de provocar artefatos de imagens difíceis de interpretação.
Deve ser imediata após a coleta, durante alguns segundos
 Distância de aproximadamente 20cm entre o spray e a lâmina. 
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Coloração de Papanicolau
Em 1942 George Papanicolau (1883-1962) desenvolveu sua coloração.
 Em 1943 et al., publicaram trabalho com apresentação de células malignas em exames de mulheres sem sintomatologia.
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Bateria de coloração de PapanicolaOu Modificada (simplificada)
1- Fixador com carbowaz – remover com álcool 50% ou mais concentrado, durante 2 horas 
2- Água rápida – 2 min
3- Hematoxilina – 30s a 1 min
4- Água corrente até a água da cuba ficar límpida
5- Álcool absoluto – 2 min (2x)
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6- Orange G6 – 5 mergulhos
7- Álcool absoluto – 2 min (2x)
8- EA 50 – 4 min
9- Xilol – 5 min ( ou solução de xilol + alcool)
Bateria de coloração de Papanicolaou Modificada (simplificada)
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Corantes
Hematoxilina de Harris (aquoso) – núcleo e bactérias
Orange G6 (OG6) (alcoólico) – citoplasma, hemácias e queratinização
EA de Gill’s (alcoólico) - citoplasma
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Xilol
Torna as células translúcidas
Participam da etapa de clareamento ou diafanização 
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Resultados da coloração de Papanicolau
Núcleo – azul/cinza/preto
Citoplasma (não queratinizado) – verde/azulado
Citoplasma (queratinizado) – rosa/laranja
Hemácias – laranja/rosa
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Montagem
O meio de montagem é a substância que funciona como um vínculo permanente entre a lamínula e a lâmina.
Deve ser mixível com o agente clarificante
- Bálsamo do Canadá ou Entelan 
- Verniz vitral
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Leitura das lâminas
 A varredura deve ser sistemática
 Vertical ou horizontal. A vertical permite determinar melhor as zonas já examinadas
 A verredura deve ser feita com a objetiva de 10.
 As células e/ou zonas atípicas ou duvidosas são submetidas a exame mais minucioso com a objetiva de 40.
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Leitura das lâminas
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As secreções obtidas contém:
Células descamadas das mucosas vaginais e cervicais
Muco
Leucócitos e macrófagos 
Detritos celulares necróticos em vias de eliminação. 
Mais raramente, células endometriais, tubárias e ovarianas
Bactérias, fungos, vírus e parasitas.
Esfregaço citológico
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