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Métodos de estudo em Patologia Profª Drª Rosilma de Oliveira Araujo Melo PATOLOGIA GERAL MKT-MDL-02 Versão 00 Corantes • A coloração das células deve-se sobretudo à combinação dos corantes com as proteínas, dependendo portanto da sua carga elétrica e pH. • Os corantes coraram especificamente uma organela e não outro (corantes seletivos) está relacionado com a diferença de cargas elétricas existente entre as proteínas; • Os corantes tem especificidade para determinada carga elétrica ou pH, permitindo as ligações químicas. MKT-MDL-02 Versão 00 Corantes Corantes básicos ou nucleares Estruturas evidenciadas Azul de metileno Cora o núcleo de azul Vermelho neutro Acumula-se em vacúolos Hematoxilina Cora o núcleo de arroxeado Os corantes básicos coram elementos celulares basófilos. As moléculas ácidas como o DNA e o RNA são basófilas, pois têm afinidade para os corantes básicos. MKT-MDL-02 Versão 00 Corantes • Os corantes ácidos coram elementos celulares acidófilos. O citoplasma tem proteínas básicas ou acidófilas. Corantes ácidos ou citoplasmáticos Estruturas evidenciadas Eosina Citoplasma (rósea) Fucsina ácida Citoplasma OBS: os corantes neutros coram estruturas que não apresentam características nem acidófila nem basófilas. Ex: violeta de genciana MKT-MDL-02 Versão 00 Preparações para microscopia • Microscopia óptica as preparações podem ser temporárias ou definitivas; ✓In vivo • A fresco; • Com uso de corantes vitais: (azul de metileno); MKT-MDL-02 Versão 00 MKT-MDL-02 Versão 00 ✓Post morten: permite o preparo do material para ser fatiado em cortes. ❖Fixado por: • Congelação (células criopreservadas): conserva algumas atividades enzimáticas; • Impregnação em parafina; Preparações para microscopia Método Imediato • Consiste em examinar as células vivas com todos os seus componentes funcionando plenamente. Podem ser estudadas de forma isolada ou agrupadas. MKT-MDL-02 Versão 00 Corantes vitais • São corantes que não matam a célula e sua função é evidenciar as estruturas que se encontram transparentes. • Estão em concentrações muito baixas (0,01%), a fim de diminuir a toxicidade nas células. MKT-MDL-02 Versão 00 Método Imediato MKT-MDL-02 Versão 00 Método Imediato IMEDIATO A FRESCO: DIRETO (PARAMECIO) MKT-MDL-02 Versão 00 Método Imediato IMEDIATO A FRESCO: INDIRETO (Elodea Canadensis (Cloroplastos) MKT-MDL-02 Versão 00 Método Imediato INTRAVITAL se observada as Bactérias da mucosa oral Corante: Azul de Metileno SUPRAVITAL: quando observada a Célula epitelial da mucosa oral Corante: Azul de Metileno MKT-MDL-02 Versão 00 Método mediato de coloração • Método no qual se obtém um preparo permanente, onde as células ficam preservadas, coradas e fixadas para melhor durabilidade de seus componentes. Esse método tem a vantagem de uma longa duração, porém limita-se por promover a morte da célula. • Mediato: ✓Simples (Panótico rápido); ✓ Longo (preparo permanente) MKT-MDL-02 Versão 00 • Técnica do Panótico Rápido • Etapas: • Punção • Estiraço sanguíneo MKT-MDL-02 Versão 00 MKT-MDL-02 Versão 00 • Técnica do Panótico Rápido ou de Pappenheim • Etapas: ✓Fixar; ❖Panótico 1: solução de triarilmetano a 0,1% (fixador de esfregaço); ❖Panótico 2:solução de xantenos a 0,1% (cora as células ácidas); ❖Panótico 3: solução de tiazidas a 0,1% (cora as células basicas); ✓Lavar com água destilada • Link do vídeo sobre coloração Panótica rápida em hematologia • https://www.youtube.com/watch?v=EaXDhX5u7AI MKT-MDL-02 Versão 00 Método mediato longo MKT-MDL-02 Versão 00 • Link do vídeo sobre preparação de lâminas em histologia e histopatologia https://www.youtube.com/watch?v=RlyTg64AT9 E&t=237s MKT-MDL-02 Versão 00 Imuno-histoquímica • É o método que utiliza anticorpos como reagentes específicos para detecção de antígenos presentes em células ou tecidos. • Um antígeno em células ou tecidos pode ser reconhecido por sua ligação ao anticorpo seguida da aplicação de um sistema de detecção (imunofluorescente ou imunoenzimático); • É muito específica na categorização de tumores indiferenciados. MKT-MDL-02 Versão 00 Imuno-histoquímica MKT-MDL-02 Versão 00 MKT-MDL-02 Versão 00 MKT-MDL-02 Versão 00 BIBLIOGRAFIA • Básica: • BRASILEIRO FILHO, Geraldo; BOGLIOLO, Luigi. Bogliolo Patologia Geral. 8. ed.ED. Guanabara Koogan 2011. • FARIA, José Lopes de. Patologia Geral. 4. ed.ED. Guanabara Koogan 2010. • MONTENEGRO, Mário R.; FRANCO, Marcelo. Patologia: Processos gerais. 5 ed.ED. Atheneu Rio 2010 MKT-MDL-02 Versão 00 rosilma23@hotmail.com MKT-MDL-02 Versão 00
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