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Controle de microorganismos Isadora Viana Costa Juliana Santos Simão Karem Lorena Gonçalves Almeida Keerollen Cristyne da Silva Oliveira Larissa de Sousa Melo Mariana Kaline Sousa Fernandes Terminologia do controle microbiano Esterilização Desinfecção Existem modificações da desinfecção e da anti-sepia. Degerminação Sanitização Taxa de morte microbiana Fatores que influenciam a efetividade dos tratamentos: Número de micróbios; Influências ambientais; Tempo de Exposição; Característica microbianas; Alteração na Permeabilidade da Membrana A membrana plasmática de um microorganismo tem a função de regular a passagem de nutrientes para dentro da célula e a eliminação de dejetos da mesma; A lesão por agentes microbianos pode causar o vazamento do conteúdo celular interferindo no crescimento da célula; Dano às proteínas e aos Ácidos Nucléicos As enzimas das bactérias, que são principalmente proteínas, são vitais para todas as atividades celulares; Essa forma é mantida por ligações químicas que unem as porções adjacentes da cadeia de aminoácidos onde ela se dobra sobre si mesma; O rompimento resulta em desnaturação da proteína; A lesão aos ácidos nucléicos pelo calor, radiação ou substâncias químicas é frequentemente letal para a célula, sendo assim, não se replica mais, nem realiza as funções metabólicas. Métodos Físicos De Controle Microbiano Calor - O calor é frequentemente usado para eliminar os microrganismos. O calor úmido mata os microrganismos pela desnaturação das enzimas. O ponto de morte térmica ( PMT) é a menor temperatura em que todos os micróbios em uma cultura liquida serão mortos em 10 minutos. O tempo de morte térmica (TMT) é a duração de tempo necessária para matar todas as bactérias em uma cultura liquida em uma dada temperatura. O tempo de redução decimal (TRD) é a duração de tempo necessária para que 90% de uma população bacteriana seja morta em uma dada temperatura. Esterilização Pelo Calor: Calor Úmido Fervura Autoclave Desnaturação das proteínas Mata fungos e células bacterianas, vegetativas patogênicas e quase todos os vírus em dez min; Menos efetivo para endosporos Método muito efetivo de esterilização; Em cerca de quinze psi de pressão (121°C), todas as células vegetativas e seus endosporos são mortos. Esterilização Pelo Calor: Pasteurização É um processo de desnaturação das proteínas. Tratamento com calor para o leite (72°C por cerca de 15 seg) que mata todos os patógenos e a maioria dos não-patógenos. Tempo do Processo de Pasteurização Esterilização Pelo Calor: Calor Seco Chama Direta: Incineração: c. Esterilização com ar quente: Queima os contaminantes até se tornarem cinzas Processo de oxidação. Requer temperatura de 170°C por duas horas Esterilização por Filtração É a passagem de um líquido ou gás através de um material semelhante a uma tela, com poros pequenos o suficiente para reter os microrganismo Esterilização por Baixas Temperaturas Refrigeração: Congelamento profundo: Liofilização: Redução das reações químicas e possíveis alterações nas proteínas Conserva culturas microbianas que são congeladas rapidamente a -50 e 90°C Conservação prolongada de cultura microbiana; A água é removida por alto vácuo em baixa temperatura Métodos físicos de controle microbiano Alta Pressão - A alta pressão desnatura as proteínas nas células vegetais. Endósporos - São relevantemente resistentes a alta pressão. Utilização Sucos de frutas conservados a base de alta pressão têm sido comercializados no Japão e nos Estados Unidos. Vantagem é que o modelo de conservação mantêm o sabor , coloração e os valores nutricionais dos produtos. Dessecação Os microrganismos não podem crescer ou se reproduzir. A resistência da célula vegetativas ao ressecamento varia com a espécie. Métodos Físicos De Controle Microbiano Pressão Osmótica Os microrganismos em alta concentração de sais e açúcares sofrem plasmólise Métodos Físicos De Controle Microbiano Os bolores e as leveduras são mais capazes que as bactérias de crescerem em materiais com baixa humidade ou alta pressão osmótica. As frutas e os grãos são deteriorados por fungos ao invés de bactérias. Radiação: os efeitos sobre as células dependem de seu comprimento de onda, intensidade e duração Ionizante Destruição do DNA Não disseminado na esterilização de rotina Usado para esterilizar produtos farmacêuticos e suprimentos médicos e dentários Não-Ionizante Lesão ao DNA Radiação não muito penetrante Usado para controle de ambientes fechados com lâmpada ultra violeta (germicida) Métodos Químicos do Controle Microbiano Os agentes químicos são apresentados em grupos que tenham em comum, ou as funções químicas, ou elementos químicos, ou mecanismo de ação. Também são usados em tecidos vivos (anti-sépticos) ou em objetos inanimados (desinfetantes) Os esterilizantes matam todos o Microorganismos; Os Desinfetantes reduzem a carga Microbiana; A anti-sepsia também é um processo de desinfecção, destruindo ou inibindo microorganismos ou tecidos vivos. Princípios da desinfecção efetiva Lembre-se de que a concentração de um desinfetante influencia sua ação; Temos que considerar a natureza do material a ser desinfetado. Avaliando um desinfetante Testes de Uso-diluição: Anéis metálicos são mergulhados em culturas padronizadas das bactérias-teste cultivadas em meio líquido, removidos e secos; As culturas secas são então colocadas em uma solução do desinfetante na concentração recomendada pelo fabricante, por 10 minutos; Após essa exposição, os anéis são transferidos a um meio que permitirá o crescimento de quaisquer bactérias sobreviventes; A efetividade do desinfetante pode então ser determinada pelo número de culturas que se desenvolverem. Avaliando um desinfetante O Método de Disco-Difusão: Um disco de papel filtro é embebido em um produto químico e colocado em uma placa de ágar que foi previamente inoculada e incubada com o organismo-teste; Após a incubação, se o produto químico é eficaz, uma zona clara representando a inibição do crescimento pode ser vista em torno do disco. Agentes Químicos Usados para Controlar o Crescimento Microbiano Fenol Ruptura da membrana plasmática, desnaturação das enzimas Raramente usado, exceto como padrão de comparação Raramente usado como desinfetante ou antisséptico devido à possibilidade de irritação e odor desagradável Compostos Fenólicos Ruptura da membrana plasmática, desnaturação das enzimas Superfícies ambientais, instrumentos, superfícies cutâneas e membranas mucosas São reativos mesmo em presença de material orgânico Bifenóis Provável ruptura da membrana plasmática Sabonete para as mãos e loções hidratantes Ampla utilização, porém mais eficaz contra gram-positivos Biguanidas Ruptura da membrana plasmática Desinfecção da pele, especialmente para escovação cirúrgica Bactericida contra gram-positivos e gram-negativos, atóxico, persistente Halogênicos O Iodo inibe a função das proteínas e é um forte agente oxidante; o cloro forma o agente O Iodo é um antisséptico eficaz disponível como tintura; o gás cloro é usado para desinfetar a água; os compostos de cloro são usados para desinfetar o equipamento de fábricas de laticínios, itens domésticos e vidraria. Álcoois Matam efetivamente as bactérias e fungos, mas não os endosporos e os vírus não-envelopados; O mecanismo de ação do álcool normalmente é a desnaturação das proteínas, mas pode também romper membranas e dissolver lipídeos; Age e evapora rapidamente, sem deixar resíduos; Mais comuns: etanol e isopropanol. Metais Pesados e seus Compostos Vários metais pesados podem ser biocidas ou anti-sépticos, incluindo a prata, o mercúrio e o cobre; Ação oligodinâmica: quantidades extremamente pequenas de metal são liberadase inibem o crescimento das bactérias na placa de Petri; Mercúrio: uso como desinfetante no controle de mofo em tintas, contudo, o uso deve ser limitado devido à sua toxicidade e poder de corrosão. Agentes de Superfície Podem reduzir a tensão de superfície entre as moléculas de um líquido (sabões e detergentes); Sabão: pouco valor anti-séptico, mas tem a importante função de remoção mecânica dos micróbios pela esfregação. Compostos Quarternário de Amônio (Quats) São bactericidas fortes contra as bactérias gram-positivas e um pouco menos ativos contra as bactérias gram-negativas; Também são fungicidas, amebicidas e viricidas; Exemplos: detergentes iônicos, cloreto de benzalcônio e cloreto de cetilpiridínio. Métodos químicos de controle Conservantes químicos de Alimentos - O SO2, O ácido sórbico, o ácido benzóico e o ácido propiônico inibem o metabolismo fúngico e são usados como conservantes de alimentos; - Os sais de nitrato e nitrito impedem a germinação de endosporos de Clostridium botulinum na carne; Antibióticos - A nisina e a natamicina são antibióticos usados para conservar alimentos, especialmente o queijo; Aldeídos - Os aldeídos como Formaldeído e Glutaraldeído exercem seu efeito antimicrobiano tornando as proteínas inativas; - Eles estão entre os mais efetivos desinfetantes químicos; Quimioesterelizantes Gasosos - O óxido de etileno é o gás mais freqüentemente usado para a esterilização; - Ele penetra na maioria dos materiais e mata todos os microorganismos por desnaturação de proteínas; Peroxigênios ( Agentes Oxidantes) - O ozônio, o peróxido e o ácido peracético são usados como agentes microbianos; - Eles exercem seu efeito oxidando as moléculas dentro das células; O controle microbiano é afetado pelo tipo de micróbio A Eficácia dos Antimicrobianos Químicos ContraEndosporoseMicobactérias Agente Químico Endosporos Micobactérias Mercúrio Sem atividade Sem atividade Fenólicos Baixa Boa Bifenol Sem atividade Sem atividade Compostosquarternáriosde amônio Sem atividade Sem atividade Cloro e derivados Leve Leve Iodo Baixa Boa Álcoois Baixa Boa Glutaraldeído Leve Boa Clorexidina Sem atividade Leve REFERÊNCIAS Microbiologia/ Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case; trad. atual. por Roberta Marchiori Martins - 8° edição - Porto alegre: Artmed, 2005 Obrigada!