Curva de Calibração da Cafeína

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE FEIRA DE SANTANA 
ENGENHARIA DE ALIMENTOS 
ANÁLISE FÍSICO-QUÍMICA DE ALIMENTOS 
 
 
 
 
IVANA CARVALHO LEITE 
ROQUELI GABRIELA DO NASCIMENTO DE OLIVEIRA 
VALTÉRIA CERQUEIRA DOS SANTOS 
 
 
 
 
 
 
 
 AULA PRÁTICA CURVA DE CALIBRAÇÃO DA CAFEÍNA 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Feira de Santana – BA 
 2019 
DIAGRAMA CAUSA-EFEITO 
 
 
Fonte: As autoras. 
 
 
CÁLCULOS 
Dados iniciais: 
- Construir uma curva de calibração com seis pontos a partir da concentração 
0,2 até a concentração de 1,2 mg/100mL. 
- Foi possível observar uma variação de 0,2 para cada concentração. Dessa 
forma, os seguintes valores de concentração foram admitidos: 0,2, 0,4, 0,6, 0,8, 
1,0, 1,2 mg/100mL. 
- Como se sabe, a massa molar da cafeína é dada em g/mol, logo, se faz 
necessário à conversão da concentração para gramas. Resultando em: 
C’1 = 0,002 g 
C’2 = 0,004 g 
C’3 = 0,006 g 
C’4 = 0,008 g 
C’5= 0,010 g 
C’6 = 0,012 g 
Em seguida, foi realizado o cálculo para encontrar a massa de cafeína e 
preparo da solução Mãe (ou solução estoque). 
𝐶 =
𝑚
𝑀𝑀.𝑉
 , sendo: 
MMcafeína = 194,19 g/mol 
V = 0,1L 
C = 0,012 g 
0,012 =
𝑚
194,19 . 0,1
 
𝒎 = 𝟎, 𝟐𝟑 𝒈 
Assim foram utilizadas 0,23g para preparar a solução estoque, sendo essa 
quantidade, diluída em 0,1 L de água. 
Depois do preparo da solução estoque foram feitos cálculos para preparar as 
soluções de trabalho, através da fórmula abaixo: 
𝐶𝑉 = 𝐶′𝑉′ 
 
1) C’ = 0,002g 
0,012. 𝑉 = 0,002 . 10 → 𝑉 = 1,7 𝑚𝐿 = 1700 µ𝐿 
 
2) C’ = 0,004g 
0,012. 𝑉 = 0,004 . 10 → 𝑉 = 3,3 𝑚𝐿 = 3300 µ𝐿 
 
3) C’ = 0,006g 
0,012. 𝑉 = 0,006 . 10 → 𝑉 = 5 𝑚𝐿 = 5000 µ𝐿 
 
4) C’ = 0,008g 
0,012. 𝑉 = 0,008 . 10 → 𝑉 = 6,7 𝑚𝐿 = 6700 µ𝐿 
 
5) C’ = 0,010g 
0,012. 𝑉 = 0,010 . 10 → 𝑉 = 8,3 𝑚𝐿 = 8300 µ𝐿 
6) C’ = 0,012g 
0,012. 𝑉 = 0,012 . 10 → 𝑉 = 10 𝑚𝐿 = 10000 µ𝐿 
 
De posse das soluções de trabalho, foram feitas as leituras em 
espectrofotômetro obtendo-se os seguintes valores: 
Tabela 1: Função de resposta das duas variáveis testadas. 
Concentração (g) Absorbância 
0,002 0,039 
0,004 0,08 
0,006 0,11 
0,008 0,16 
0,010 0,21 
0,012 0,30 
Fonte: As autoras. 
 
Com esses dados foi possível plotar a curva de calibração da cafeína, como 
segue abaixo. 
 
CURVA DE CALIBRAÇÃO DA CAFEíNA 
Gráfico 1: Curva de absorbância versus concentração da cafeína 
 
Fonte: As autoras. 
 
y = 24,929x - 0,0247 
R² = 0,9662 
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,014
A
b
so
rb
ân
ci
a
 
C' (mg/100mL) 
Série1
Linear (Série1)
Linear (Série1)
A curva obtida representa uma relação gráfica entre os valores de 
concentração da cafeína e absorbância. 
A espectrofotometria é fundamentada nas leis de Lambert-Beer. Elas são 
tratadas simultaneamente, processo no qual a quantidade de luz absorvida ou 
transmitida por uma determinada solução depende da concentração do soluto e 
da espessura da solução (MENDES et al.,2009). 
De acordo com MENDES et al., (2009), a lei de Lambert-Beer pode ser 
expressa matematicamente por uma relação logarítmica. Com isso é 
necessário aplicar o método de linearização com o intuído de obter uma 
equação de forma linear a qual expressa se concentração da solução é linear 
crescente. 
Para a análise da cafeína foi obtido a seguinte equação da reta: 
A = 24,929x - 0,0247 
A equação encontrada por método direto demonstra linearidade crescente 
embora existam pontos que não se ajustam bem à reta obtida. Tal fato 
demonstra que nesse ponto não houve absorbância de forma significante a 
ponto de a concentração ser considerada de forma usual. 
Outro fator importante é o fator R². O fator R² é um parâmetro extremamente 
importante quando se está lidando com dados estatísticos. Também chamado 
de Coeficiente de Determinação, o fator R² nos mostra o quanto que a sua 
regressão se aproxima do valor ideal (COLUCCI, 2013). Quanto mais próximo 
de 1(um), maior será o grau de confiabilidade do método. 
O valor de R² obtido foi de 0,9662. Considerando que esse valor poderia ser 
mais próximo a 1(um), e que possíveis interferências durante as análises 
tenham provocado alterações nos resultados é valido considerar que para se 
ter uma análise com resultados confiáveis e próximos a idealidade, é 
necessário que os métodos sejam aplicados de forma a evitar erros, a matéria- 
prima não deve conter interferentes, os equipamentos devem está devidamente 
calibrados e com manutenção em dias, como também, o analista deve 
conhecer a fundo o método de análise utilizado. 
 
REFERÊNCIAS 
MENDES, M.F.A., BENFATO, M.S., SCHULLE, A.K. et al., 
Espectrofotometria. Conceito da lei de Lambert-Beer. Disponível em: 
<http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/conceito.html>. Acesso em: 20 Ago. 2019. 
COLUCCI, L. R. Linhas de tendências e equações de curvas no Excel 
2010. Disponível em:<https://office.cursosguru.com.br/novidades/linhas-de-
tendencias-e-equacoes-de-curvas-no-excel-2010/>. Acesso em: 20 Ago. 2019.