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Microbiologia dos Alimentos Aula 03: Parâmetros intrínsecos e extrínsecos AULA 01: APRESENTAÇÃO DA DISCIPLINA Administração de unidades de alimentação e nutrição Caracterizar o alimento como um meio de cultura; Compreender as características dos alimentos que favorecem o crescimento microbiano; Compreender as características do ambiente que favorece o crescimento microbiano; Correlacionar os parâmetros intrínsecos e extrínsecos através da teoria dos obstáculos Objetivos 2 Parâmetros intrínsecos Particularidades inerentes aos tecidos vegetais ou animais: pH, conteúdo em umidade, potencial de oxirredução, conteúdo em nutrientes, constituintes antimicrobianos e estrutura biológica. Parâmetros intrínsecos e extrínsecos 3 Principais parâmetros intrínsecos pH Atividade de água (aw) Potencial de óxido redução Quantidade de nutrientes Presença de substâncias antimicrobianas Parâmetros intrínsecos 4 Meio ácido/alcalino Estabilidade enzimática de microrganismos Parâmetros intrínsecos - pH Crescimento Metabolismo 5 A maioria dos microrganismos desenvolve-se melhor em valores de pH próximos a 7 (6,6 – 7,5). Bactérias multiplicam-se com maior rapidez em pH 6 a 8; Leveduras entre 4,5 e 6; Bolores ou mofos (fungos filamentosos) entre 3,5 e 4. Exceções: bactérias que produzem grandes quantidades de ácidos como consequência de seu metabolismo produtor de energia. Ex.: lactobacilos e bactérias acéticas (crescimento ótimo em pH entre 5 e 6). Parâmetros intrínsecos - pH A maioria dos alimentos é ligeiramente ácida, uma vez que os produtos alcalinos têm, geralmente, sabor desagradável. Exceção: clara de ovo pH chega a alcançar 9,2. pH ligeiramente ácido das hortaliças ação de bactérias de putrefação branda, com Pseudomonas spp. pH mais ácido das frutas impede o desenvolvimento bacteriano, Leveduras e bolores: agentes deteriorantes mais importantes. Parâmetros intrínsecos - pH Refrigeração Pescados se alteram com maior facilidade que a carne de mamíferos: pH pescados: 6,2 e 6,5; pH músculos dos mamíferos: 5,6 (após rigidez cadavérica). Parâmetros intrínsecos - pH Portanto, a vida comercial da carne é mais duradoura que a do pescado. Acidificar os alimentos é um método de conservação. Ácidos acético e láctico. O pH adverso afeta a célula microbiana: Funcionamento de suas enzimas Transporte de nutrientes no interior da célula. Parâmetros intrínsecos - pH Conteúdo em umidade Um dos procedimentos mais antigos para conservação dos alimentos: secagem ou dissecação. A preservação pela dissecação é uma consequência direta da remoção ou ligação da umidade. Incapacitando o desenvolvimento de Microorganismos. Parâmetros intrínsecos – aw A necessidade de água dos microrganismos é referida como atividade aquosa do ambiente. A aw está associada à umidade relativa do ar (relative humidity = R.H.) expressa pela seguinte fórmula: R.H.=100 x aw Água pura: aw = 1 Água 22% NaCl: aw = 0,86 Solução saturada de NaCl: aw = 0,75. Parâmetros intrínsecos – aw Parâmetros intrínsecos – aw aw da maioria dos vegetais: >0,99. aw Bactérias > aw Fungos. Bactérias Gram-negativas mais exigentes que as Gram-positivas. Bactérias deteriorantes: não se desenvolve abaixo de aw = 0,91. Bolores deteriorantes: podem se desenvolver até aw = 0,8. Bactérias causadoras de toxinfecções alimentares: aw = 0,86. Parâmetros intrínsecos – aw Parâmetros intrínsecos – aw Parâmetros intrínsecos – aw aw< 0,70 impossibilita a multiplicação de microrganismos. Como reduzir aw? Diminuição do volume de água; Adição de compostos hidrossolúveis, sal ou açúcar; Utilizado na conservação de alimentos. Parâmetros intrínsecos – aw Temperatura x Nutrientes A qualquer temperatura, a capacidade de os microrganismos se desenvolverem diminui à medida que diminui a aw. A presença de nutrientes aumenta a aw. Parâmetros intrínsecos – Eh Potencial de oxidorredução É a facilidade com que o substrato pode ganhar (redução) ou perder (oxidação) elétrons. A alteração do valor entre os agentes oxidantes e redutores determina o Eh de uma cultura bacteriana. Parâmetros intrínsecos – Eh Parâmetros intrínsecos – Eh Quando um elemento ou composto perde elétrons, o substrato é dito como oxidado, enquanto um substrato que ganha elétrons torna-se reduzido. O Eh de um alimento é resultado dos pares redox presentes, da proporção do oxidante em relação ao redutor, do pH, da capacidade de equilíbrio, da disponibilidade de oxigênio e da atividade microbiana. Parâmetros intrínsecos – Eh Parâmetros intrínsecos – Eh O crescimento microbiano em um alimento reduz o Eh. Esse efeito pode ser atribuído à associação do esgotamento de oxigênio com a produção de compostos redutores pelos microrganismos. Ex.: Hidrogênio. Microrganismos anaeróbios obrigatórios: potenciais redox baixos ou negativos. Parâmetros intrínsecos – Eh Aeróbios obrigatórios: elevado Eh predominam na superfície do alimento exposta ao ar ou nas zonas onde o ar possa ser utilizado com facilidade. Ex.: Pseudomonas fluorescens ou outros bacilos Gram-negativos oxidativos produzem líquido viscoso e odores desagradáveis na superfície da carne. Parâmetros intrínsecos – Conteúdo em nutrientes Conteúdo em nutrientes Com o objetivo de se desenvolver, normalmente, microrganismos de importância para os alimentos necessitam de água, fontes de energia, Nitrogênio, vitaminas e fatores de crescimento relacionados, além de minerais. Macronutrientes são representados por proteínas, carboidratos e outras moléculas que contêm carbono, hidrogênio e oxigênio. Por outro lado. Micronutrientes (ou traços de elementos) são integrados por manganês, zinco e níquel Parâmetros intrínsecos – Conteúdo em nutrientes As exigências dos microrganismos em nutrientes determinam seus respectivos nichos na rede de alimentos dos ecossistemas maiores. Os nutrientes são transportados para o interior dos micro-organismos por dois tipos de processos: os que exigem gasto de energia e os que ocorrem passivamente. Nível de exigência: Bactérias Gram-positivas > Bactérias Gram-negativas > Leveduras > Bolores. Parâmetros intrínsecos – Conteúdo em nutrientes As exigências dos microrganismos em nutrientes determinam seus respectivos nichos na rede de alimentos dos ecossistemas maiores. Os nutrientes são transportados para o interior dos micro-organismos por dois tipos de processos: os que exigem gasto de energia e os que ocorrem passivamente. Nível de exigência: bactérias Gram-positivas > bactérias Gram-negativas > leveduras > bolores. Parâmetros intrínsecos – Conteúdo em nutrientes As principais fontes de energia para os micro-organismos são os açúcares, os álcoois e os aminoácidos. Alguns micro-organismos requerem pequenas quantidades de vitamina B. Facilmente encontrada na maior parte dos alimentos. As frutas tendem a apresentar um teor de vitamina B menor do que as carnes, o que, ao lado de baixo pH e Eh positivo, favorece a deterioração causada pelos bolores, mais frequentes do que pelas bactérias. Parâmetros intrínsecos – Constituintes antimicrobianos A estabilidade de alguns alimentos, diante do possível ataque por microrganismos, deve-se à presença de substâncias naturais que apresentam atividade antimicrobiana. Ex.: óleos essenciais, como eugenol (cravo-da-índia), alicina (alho), aldeído cinâmico e eugenol (canela), alil isotiocianato (mostarda), eugenol e timol (salvia), carvacrol (isotimol) e timol (orégano). Parâmetros intrínsecos – Constituintes antimicrobianos Leite de vaca: lactoferrina, conglutinina e lactoperoxidase. A própria caseína do leite e alguns ácidos graxos livres têm desempenhado ação antimicrobiana sob determinadas condições. Ovos: lisozima, assim como o leite, e essa enzima associada à conalbumina aumenta o tempo de conservação dos ovos frescos. Derivados doácido hidroxicinâmico, encontrados no chá, no melado e em outras fontes vegetais, desempenham importante papel antimicrobiano e exercem certo grau de atividade antifúngica. Principais parâmetros extrínsecos Temperatura Concentração de gases Umidade relativa Interação entre outros microrganismos Parâmetros extrínsecos 30 Parâmetros extrínsecos - Temperatura 31 Parâmetros extrínsecos 32 Parâmetros extrínsecos 33 Parâmetros extrínsecos 34 Parâmetros extrínsecos – Concentração de gases A atmosfera determina o tipo de microrganismo que se desenvolverá. 35 Parâmetros extrínsecos – Concentração de gases 36 A umidade do alimento relaciona-se com a quantidade de água nele existente. Alimentos conservados em Umidade relativa alta tendem a absorver umidade do ambiente. Alimentos conservados em Umidade relativa baixa tendem a perder água. Parâmetros extrínsecos – Umidade relativa 37 Capacidade que um microrganismo tem de interferir na sobrevivência de outro. Modificação de pH. Competição por nutrientes. Parâmetros extrínsecos – Interação entre outros microrganismos 38 Teoria dos obstáculos de Leistner (Hurdle Theory) Baseado no estudo das interações entre fatores intrínsecos e extrínsecos. Baseia-se na utilização simultânea de mais de uma forma de controle microbiano, de forma a dificultar o desenvolvimento dos microrganismos. Parâmetros intrínsecos e extrínsecos 39 Parâmetros intrínsecos e extrínsecos 40 Teoria dos obstáculos de Leistner (Hurdle Theory) Minimizar possíveis DTAs e/ou Surtos alimentares. Parâmetros intrínsecos e extrínsecos 41 SILVA, N.; JUNQUEIRA, V. C. A.; SILVEIRA, F. A. S.; TANIWAKI, M. H.; GOMES, R. A. R.; OKAZAKI, M. M. Manual de Métodos de Análise Microbiológica de Alimentos e Água. 5. São Paulo: Bluncher, 2017. Capítulo 3. Bibliografia 42
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