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Organização do Núcleo Eucarioto Possui carioteca, nucléolo e cromatina. Carioteca É a membrana nuclear (envolve o núcleo). É formada por duas membranas lipoproteicas. Existem ribossomos aderidos a membrana externa. O complexo do poro possibilita o intercâmbio o intercâmbio entre o núcleo e o citoplasma (transporte de substâncias/ moléculas/partículas pelos poros) Após a divisão celular, a carioteca é reorganizada por meio do retículo endoplasmático (ela some no início da divisão celular). Nucléolo É constituído de proteínas e RNA ribossômico. É responsável pela produção de ribossomos. Ao final da divisão celular surge um novo nucléolo, cuja origem depende de um segmento de Dna localizado numa região existente em certos cromossomos, a zona sat (satélite). Cromatina Representa o material genético contido no núcleo. É o Dna de forma “bagunçada”/difusa. Constituída por proteínas conjugadas (nucleoproteínas). Eucromatina – região descondensada da cromatina (reta) /região ativa para a síntese proteica. Heterocromatina – região condensada (enrolada por histonas)/ inativa para a síntese proteica. Replicação, Transcrição e Tradução Replicação É a duplicação do DNA. Pode ser de três tipos : Semiconservativa – a dupla-hélice de cada molécula filha de Dna contém um filamento da molécula “mãe” e um filamento recém sintetizado. Conservativa – uma das duas duplas-hélices é formada apenas pela molécula “mãe” e a outra apenas de filamentos recém sintetizados. Dispersiva – cada fita das duas moléculas filhas é formada tanto por filamentos da mãe como filamentos recém sintetizados. Origens de Replicação Acontece em sequências específicas do DNA, onde são ligadas proteínas específicas que quando acionadas permitem o início da replicação. Acontece de forma bidirecional. Apenas parte do DNA é desenrolado para que aconteça a replicação (bolha de replicação) O DNA é sintetizado no sentido 5’ > 3’. Fita contínua – líder. Fita descontínua – atrasada. DNA polimerase Dna polimerase I – remove os primers. Dna polimerase II – repara o Dna. Dna polimerase III – realiza a replicação/ sintetiza a nova fita de Dna a partir da fita usada como molde. Estágios da Replicação Iniciação, alongamento e término : é preciso um conjunto de enzimas para que sejam realizadas essas etapas. Enzima Helicase desenrola o Dna. Enzima SSB mantém as fitas de Dna separadas. Enzima Topoisomerase alivia a tensão causada pela separação das fitas. Enzima Primase sintetiza o primer de Rna (revisa). Enzima Polimerase III é a enzima que realiza a replicação. Enzima Polimerase I remove os primers e preenche espaços. Resumindo o processo... Desenovelamento do Dna (retirada das histonas) > helicase quebra as pontes de hidrogênio > topoisomerase tira a tensão > polimerase III inicia o alongamento (na fita descontínua, começa a partir do primer adicionado pela primase) > síntese da fita contínua e da fita descontínua > (na fita líder apenas 1 primer, já na fita descontínua + de 1 primer) > primase age várias vezes a cada fragmento de Okazaki > polimerase I remove os primers e sintetiza Dna para preencher os espaços > ligase liga os fragmentos de Okazaki e os fragmentos de Dna. Quando chega ao telômero a replicação termina. Transcrição A cópia de um molde de Dna para sintetizar Rna/ são usados apenas fragmentos do Dna. É realizada pela enzima RNA Polimerase. Subunidade sigma – responsável por reconhecer a região promotora (ela percorre o Dna juntamente com a Rna polimerase à procura do promotor, sem precisar desenrolar a dupla hélice e nem se ligar em lugares incorretos). Regiões consenso/promotoras – determina o ponto de início as transcrição. Rna polimerase I – sintetiza Rna ribossômico. Rna polimerase II – sintetiza Rna mensageiro. Rna polimerase III – sintetiza Rna transportador. O que será transcrito é um gene/ o gene possui duas regiões: Gênicas – éxons (porção codificadora) Não Gênicas – íntrons (porção não codificadora) A fita usada para a transcrição de um Rna vai depender da direção e da localização do promotor. A fita usada como molde sempre vai ser a fita na direção 3’ > 5’ Fita codificadora : 5’ – ATGCCAGTA – 3’ Fita molde : 3’ – TACGGTCAT – 5’ RNA: 5’ – AUGCCAGUA – 3’ A Rna polimerase utiliza a 3’ > 5’ do Dna como molde, produzindo uma fita de Rna na direção 5’ > 3’. A fita molde do Dna é antiparalela e complementar à fita codificadora. O Rna sintetizado possui, portanto, a mesma direção que a fita codificadora e U no lugar de T. A Rna polimerase vai adicionando os nucleotídeos na direção 5’ > 3’. (Ao adicionar um nucleotídeo trifosfato é liberado um profosfato, ele é usado como energia para que ocorra a transcrição. Início – reconhecimento de sequências específicas de Dna (regiões consenso). Alongamento – incorporação de ribonucleotídeos. Terminação – reconhecimento de sequências no Dna para interrupção da síntese de Rna. Pré mRna – processamento : para que o pré mRna vire um mRna maduro são necessárias 3 coisas após a transcrição: Adição do Quepe 5’ – no começo do transcrito para proteger o Rna da degradação e é necessário para auxiliar na tradução. Cauda Poli-A – depois de transcrito o pré Rna vai transcrever uma sequência sinal para a poliadenilação/ uma endonuclease vai cortar o restante do transcrito bem próximo ao final da poliadenilação/ ajuda na tradução. Splicing – retirada dos íntrons e ligação dos éxons/ realizado pelo complexo spliceossomo. Tradução As proteínas desenvolvem importantes funções no organismo. Código genético – relação entre a sequência de bases no Dna e os aminoácidos. De todos os códons do código genético, 61 determinam aminoácidos e 3 são de parada. Início – AUG – metionina (nem todas as proteínas) Parada – UAA/ UAG/ UGA O código é degenerado – cada aminoácido pode ter + de 1 códon. Usa o mesmo gene para sintetizar diferentes proteínas. O Rna transportador carrega uma trinca de bases que vai reconhecer a trinca de base do mRna. Trinca do mRna – códon. Trinca do tRna - anticódon. Especificidade – um códon de um aminoácido sempre codifica esse aminoácido. Universalidade – é conservado em todas as espécies. Degeneração – um aminoácido pode ser codificado por mais de um códon. Contínuo – sempre lido de 3 em 3 bases. Iniciação – reconhecimento das extremidades Quepe 5’ e cauda poli- A Elongação – a cada três bases do mRna (códon) é adicionado um aminoácido na proteína. A sequência de bases é definida pelo gene/ acontece nos ribossomos. Resumindo o processo... Subunidade do ribossomo se liga ao mRna > o tRna transporta o aminoácido > início em AUG (metionina) > o anticódon trás a trinca UAC que se liga a ele > pareamento > início da tradução > chega o anticódon do lado para mais um pareamento > 1° aminoácido se solta e se liga a proteína por ligação peptídica (isso acontece sucessivamente) > tRna do 1° aminoácido vai embora > o processo continua até que chega no ribossomo um códon de parada > tradução termina.
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