Identificação Bacteriana BGN

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Identificação Bacteriana
Bacilos Gram negativos:
Morfologia de colônia pode ser sugestiva.
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Para bacilos Gram negativos isolados em placas é importante a visualização de prova de lactose.
Presente em meios de rotina como CLED e MacConkey. 
CLED  Cystine Lactose Electrolyte Deficient Agar Bromothymol 
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E. Coli lactose positiva e negativa:
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Meio MacConkey:
Seletivo.
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Proteus sp:
Swarming em ágar sangue (espraiamento).
CLED deficiente em eletrólitos para contagem de UFC/mL.
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Serratia marcescens
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Klebsiella sp
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Identificação de espécie:
Provas bioquímicas.
Provas sorológicas.
Biologia molecular.
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Provas bioquímicas rotina:
Bacilos Gram negativos
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Enterobacteriaceae demonstram as seguintes características:
 Fermentação da glicose.
 Citocromo oxidase negativa.
 Redução de nitrato a nitrito.
 Crescimento em meio MacConkey
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Triagem inicial
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Fermentação glicose:
Meio O.F. de Hugh e Leifson
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MEIO DE OF BASAL DE HUGH & LEIFSON
	Composição:
Caseína enzimática hidrolisada: 2 g/L
Cloreto de sódio: 5 g/L
Fosfato dipotássico: 0,3 g/L
pH final a 25oC: 6,8 + 0,2 g/L
Azul bromotimol: 0,08 g/L
Ágar: 2 g/L
Acrescentar na formulação solução com carboidrato que se deseja testar o metabolismo (oxidativo, fermentativo, assacarolítico).
Hugh R. and Leifson E., 1953, J. Bact., 66:24.
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Prova citocromo-oxidase
Este sistema enzimático está relacionado com citocromos da cadeia respiratória de alguns microrganismos.
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Tetrametil p-fenileno de amida recém preparado e protegido da luz.
Adicionado em papel com a bactérias teste.
Cor púrpura em até 1 minuto.
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Meio IAL:
Meio Rugai modificado por Pessoa e Silva
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Outras provas – Citrato de Simmons:
Permite determinar a capacidade de uma bactéria utilizar o citrato como única fonte de carbono.
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Voges Proskauer
O teste Voges-Proskauer detecta a presença de acetilmetilcarbinol. 
Este composto é produzido por certos microrganismos durante o crescimento num caldo tamponado de peptona-glucose.
Voges-Proskauer Reagent A  0,5 mL de alfa-naftol a 5% peso/vol. em álcool absoluto.
Voges-Proskauer Reagent B  contém 0,5 mL de hidróxido de potássio a 40% peso/vol. em água destilada.
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Morfologia de colônia E. coli
Tamanho: Médio.
Borda: Circular.
Elevação: Achatada.
Densidade: Opaca.
Cor: Rosa no Mc.
Consistência: Seca.
Hemólise: Em geral β.
MacConkey: Sim (lactose +).
Odor: Vinagre.
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Morfologia de colônia Klebsiella sp
Tamanho: Grande.
Borda: Circular.
Elevação: Convexa.
Densidade: Opaca.
Cor: Rosa no Mc.
Consistência: Mucóide.
Hemólise: Sem hemólise.
MacConkey: Sim (lactose +).
Odor: Fermento de pão.
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Morfologia de colônia P. aeruginosa
Tamanho: Médio.
Borda: Irregular.
Elevação: Achatada.
Densidade: Transparente.
Cor: Esverdeada.
Consistência: Brilhante.
Hemólise: Com ou sem hemólise.
MacConkey: Sim (esverdeadas).
Odor: Uva..
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Morfologia de colônia Proteus sp
Tamanho: Médio.
Borda: Ondulado.
Elevação: Achatada.
Densidade: Translúcida.
Cor: Incolor.
Consistência: Brilhante.
Hemólise: Sem hemólise.
MacConkey: Sim (incolor  lactose -).
Odor: Fétido.
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Referências bibliográficas: 
	
HENRY, J. B. Diagnóstico Clínico e Tratamento por Métodos Laboratoriais. 20ª ed. Saunders, 2008.
MURRAY, P. R.; ROSENTHAL, K. S.; PFALLER, M. A. Microbiologia Médica. 6A ed. Rio de Janeiro. Elsevier, 2011.
STRASINGER, S.K. & DI LORENZO, M.S. Urinálise e Fluidos Corporais. 5ª ed. Livraria Médica Paulista Editora, 2009.
KONEMAN E. W. et al. Diagnóstico microbiologico. 6A ed. Editora Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 2008.
OPLUSTIL. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. 3A ed. Rio de Janeiro. Sarvier, 2010.